一种具有ROS响应性的桔梗多糖衍生物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种具有ROS响应性的桔梗多糖衍生物及其制备方法和应用，其中，制备方法包括以下步骤：(1)将4

【技术实现步骤摘要】
一种具有ROS响应性的桔梗多糖衍生物及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及一种多糖衍生物及其制备方法和应用，具体涉及一种具有ROS响应性的桔梗多糖衍生物及其制备方法和应用，属于功能性医药材料和纳米


技术介绍

[0002]天然多糖通常具有良好的生物相容性和可降解性。根据天然多糖的不同特性，可将其进行结构修饰，制备功能化的药用高分子材料。随着人们环保与安全意识的提高，利用天然多糖代替合成高分子材料作为医药功能性材料的优势越来越明显。
[0003]近年来中药的归经理论与现代药物制剂靶向技术联系的愈发紧密，中药材桔梗在多个经典名方中，如“血府逐瘀汤”、“天王补心丹”等均充当“载药上行”的作用。桔梗多糖是桔梗的主要活性成分，有研究表明桔梗含有的桔梗多糖由葡萄糖、半乳糖和甘露糖(质量比例为7.0：1.1：0.6)组成，具有良好的生物相容性和可降解性，并且具有增强免疫功能以及抗炎症、调节免疫等活性。但是天然的桔梗多糖水溶性较好，生物利用度以及成药性较差，若将传统中医药引经理论与现代靶向技术相结合，需要对其进行疏水性改性，从而构建桔梗多糖活性衍生物。
[0004]活性氧(Reactive oxygen species，ROS)是一类在细胞内产生并参与许多分子生物过程的反应性物质。在正常生理条件下，低浓度ROS作为信号传导分子参与到许多代谢途径中，此时它们的作用是有益的。但在炎症早期，存在过表达的ROS不仅能氧化脂蛋白，而且能诱导细胞凋亡，加速炎症部位进展。利用病变组织高水平ROS的环境，研究者探索出许多ROS响应性载体材料。苯硼酸及其衍生物是构建功能聚合物的基团，苯硼酸和苯硼酸酯被H2O2氧化为苯酚和硼酸，化学键断裂，从而释放药物。
[0005]目前对桔梗多糖的研究大多停留在药理研究上，桔梗多糖结构中含有大量的活性羟基，易于进行结构修饰，本专利技术首次构建了具有ROS响应性的桔梗多糖衍生物，拟通过现代制剂技术阐释桔梗“载药上行”的引经理论。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种具有ROS响应性的桔梗多糖衍生物及其制备方法和应用。
[0007]为了实现上述目标，本专利技术采用如下的技术方案：
[0008]一种具有ROS响应性的桔梗多糖衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0009](1)将4
‑
(羟甲基)苯硼酸频那醇酯与N,N
’‑
羰基二咪唑按照摩尔比1：2混合于二氯甲烷中，于室温反应1h，将反应得到的溶液依次用纯化水、饱和盐水、纯化水进行洗涤，将洗涤得到的有机层用无水硫酸钠干燥过夜，将干燥后的溶液过滤，过滤后得到的固体用真空干燥箱烘干，最终得到ROS响应基团；
[0010](2)将桔梗多糖以及上一步得到的ROS响应基团分别溶解于有机溶剂中，在催化剂存在的条件下，将ROS响应基团溶液逐滴加入到桔梗多糖溶液中，ROS响应基团与桔梗多糖
的摩尔比为5～10:1，室温下恒温磁力搅拌反应过夜，将反应后的溶液用透析袋在纯化水中透析，待有机溶剂透析完全后，取透析得到的沉淀并冻干，最终得到具有ROS响应性的桔梗多糖衍生物。
[0011]优选的，在步骤(2)中，所述桔梗多糖是由桔梗粗多糖经过分离纯化得到，分子量为5.1～6.3
×
103Da。
[0012]优选的，在步骤(2)中，将桔梗多糖溶解于甲酰胺中，将ROS响应基团溶解于二甲基亚砜中。
[0013]优选的，在步骤(2)中，所述催化剂选用的是4
‑
二甲氨基吡啶，与ROS响应基团的摩尔比为1：1.5～2。
[0014]优选的，在步骤(2)中，所述透析袋选用的是MWCO：8000～14000Da。
[0015]一种具有ROS响应性的桔梗多糖衍生物，其特征在于，由前述的制备方法制备而来。
[0016]前述的具有ROS响应性的桔梗多糖衍生物的应用，其特征在于，用于包载疏水性药物，所述疏水性药物包括姜黄素。
[0017]前述的具有ROS响应性的桔梗多糖衍生物包载姜黄素的方法包括以下步骤：
[0018](1)将具有ROS响应性的桔梗多糖衍生物与姜黄素溶解于二甲基亚砜中；
[0019](2)对混合溶液依次进行透析、离心、过膜操作，最终得到载药桔梗多糖衍生物。
[0020]优选的，所述具有ROS响应性的桔梗多糖衍生物与姜黄素的质量比为8：1。
[0021]本专利技术的有益之处在于：
[0022](1)本专利技术制备得到的具有ROS响应性的桔梗多糖衍生物，能够响应炎症微环境；
[0023](2)本专利技术制备得到的具有ROS响应性的桔梗多糖衍生物，粒径范围在90～130nm；
附图说明
[0024]图1是PGP和Oxi
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PGP的红外光谱图，其中，上面的是Oxi
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PGP的红外光谱，下面的是PGP的红外光谱；
[0025]图2是PGP和Oxi
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PGP的1H
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NMR光谱图；
[0026]图3是Oxi
‑
PGP在不同浓度H2O2的PBS中的水解率图；
[0027]图4是PNPs
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Cur的透射电镜图；
[0028]图5是PNPs
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Cur的粒径分布图；
[0029]图6是PNPs
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Cur的Zeta电位图；
[0030]图7是Cur、CNPs
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Cur、PNPs
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Cur被RAW264.7细胞摄取的荧光图；
[0031]图8是Cur、CNPs
‑
Cur、PNPs
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Cur被LPS刺激活化的RAW264.7炎症细胞模型摄取的荧光图。
具体实施方式
[0032]以下结合附图和具体实施例对本专利技术作具体的介绍。
[0033]第一部分、具有ROS响应性的桔梗多糖衍生物的制备及表征
[0034]1、提取桔梗多糖
[0035]将桔梗粉碎，粉末过60目筛，称取1.5g桔梗粉末，加入45mL水，浸泡2h，在功率
200W、温度45℃条件下超声25min，加入桔梗粉末质量0.9％的中性纤维素酶，酶解温度45℃，pH值5.5，在功率500W、频率700MHz的条件下酶解20min，100℃灭酶5min。
[0036]将酶解液浓缩至原体积的1/3，按照体积比5:1将浓缩液加入到由氯仿和正丁醇按照体积比4:1混合而成的混合溶剂中，电磁搅拌30min，静置1h，弃去沉淀层，取上清液，重复2～3次，将收集到的上清液浓缩至原体积的1/2，按照体积比1:4将浓缩液加入到95％乙醇中，醇沉过夜后离心取沉淀，冻干即得桔梗粗多糖。
[0037]将桔梗粗多糖溶于甲酰胺中，用透析袋(MWCO：8000～14000Da)在1000mL纯化水中透析36h，每隔2h换一次水，将透析本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有ROS响应性的桔梗多糖衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将4
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(羟甲基)苯硼酸频那醇酯与N,N
’‑
羰基二咪唑按照摩尔比1：2混合于二氯甲烷中，于室温反应1h，将反应得到的溶液依次用纯化水、饱和盐水、纯化水进行洗涤，将洗涤得到的有机层用无水硫酸钠干燥过夜，将干燥后的溶液过滤，过滤后得到的固体用真空干燥箱烘干，最终得到ROS响应基团；(2)将桔梗多糖以及上一步得到的ROS响应基团分别溶解于有机溶剂中，在催化剂存在的条件下，将ROS响应基团溶液逐滴加入到桔梗多糖溶液中，ROS响应基团与桔梗多糖的摩尔比为5～10:1，室温下恒温磁力搅拌反应过夜，将反应后的溶液用透析袋在纯化水中透析，待有机溶剂透析完全后，取透析得到的沉淀并冻干，最终得到具有ROS响应性的桔梗多糖衍生物。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述桔梗多糖是由桔梗粗多糖经过分离纯化得到，分子量为5.1～6.3
×
103Da。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(2...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈大全，刘雪，李毅，郭春静，陈强，苏彦国，郭慧敏，孔明，
申请(专利权)人：潍坊中医药产业技术研究院中国海洋大学，
类型：发明
国别省市：