本发明专利技术公开了一种黄精叶多糖及其制备方法和用途，属于植物多糖领域，该多糖是提取自滇黄精、黄精或多花黄精的叶的一种或多种，该多糖分子量为44.7kDa，主要由六种单糖组成，摩尔比为：半乳糖35～41％，阿拉伯糖28～34％，葡萄糖21～25％，木糖2～5％，鼠李糖1～3％，甘露糖1～3％。该多糖可用于制备具有调节肠道菌群功能的保健食品或饮品。功能的保健食品或饮品。功能的保健食品或饮品。
【技术实现步骤摘要】
一种黄精叶多糖及其制备方法和用途
[0001]本专利技术涉及植物多糖领域。
技术介绍
[0002]中药黄精是中国著名的药食两用植物之一。《中国药典》2020版收载了滇黄精、黄精和多花黄精品种。古籍《名医别录》中记载黄精性味甘平，入脾、肾、肺经，具有补气养阴、润肺益肾等功能。现代研究也表明，黄精具有提高免疫、预防肿瘤、降低血糖和血脂等药理作用。多糖是黄精化学成分中的重要活性成分，具有降血脂血糖、提高免疫力、抗癌等功效。
[0003]到目前为止，国内外大多数的研究和开发应用主要着眼于黄精根部。关于黄精茎叶的多糖，则几乎没有研究以及文献报道。一般植物茎叶的多糖含量较根部低，难以提取纯度高的多糖，并且脱色困难。生产实践表明，采集一吨黄精根部药材会产生约400公斤茎叶的副产物，一般做丢弃处理，既浪费资源又污染环境。因此，为有效提高黄精药材的综合利用价值，获取更大的经济收益，对黄精茎叶的开发利用很有必要。在黄精茎叶中，茎的比重很低，并且多糖含量极低，所以本专利技术主要是对黄精叶的多糖进行提取。
[0004]申请号201110360706.5公开了一种从黄精茎叶中提取黄精多糖的方法，其工艺流程是原料精选、粉碎、超声提取、压滤、超滤、浓缩、层析、微滤分离、真空干燥，其有益效果是从黄精茎叶中提取黄精多糖，得到了一个新的提取来源，可使黄精多糖纯度的达75
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95％。该专利技术的不足之处是所得的多糖没有经过脱色、脱蛋白和凝胶柱层析，为多种多糖混合物，纯度最高仅可能达到95％，也没有对所得多糖进行结构测定。本专利技术涉及的多糖经过脱色、脱蛋白、纤维素柱层析和凝胶柱层析，为单一纯净多糖，纯度实测为98％以上，并且对多糖的各个结构参数进行了测定描述，也对该多糖的生物活性进行了试验。
技术实现思路
[0005]为了解决现有技术当中的问题：
[0006]本专利技术的第一个目的在于公开了一种黄精叶多糖，是提取自滇黄精Polygonatum kingianum、黄精Polygonatum sibiricum或多花黄精Polygonatum cyrtonema的叶中的一种或多种。
[0007]本专利技术的多糖分子量为40～50kDa，由六种单糖组成，摩尔比为：半乳糖35～41％，阿拉伯糖28～34％，葡萄糖21～25％，木糖2～5％，鼠李糖1～3％，甘露糖1～3％。具体的摩尔比为：半乳糖38.91％，阿拉伯糖31.21％，葡萄糖23.24％，木糖3.21％，鼠李糖1.75％，甘露糖1.68％。以同样方法提取出的黄精根部的多糖，其单糖组成为甘露糖50.2％，葡萄糖39.7％，半乳糖5.3％，阿拉伯糖4.1％。可见黄精根部多糖与叶部多糖的单糖组成有较大的差异。
[0008]本专利技术的第二个目的，公开了该黄精叶多糖的制备方法，步骤如下：
[0009](1)取干燥黄精茎叶，用水热提后醇沉，将沉淀脱色脱蛋白后得到粗多糖；
[0010](2)粗多糖用DEAE纤维素层析柱纯化、不同梯度的NaCl溶液洗脱，收集多糖富集部
分；
[0011](3)多糖富集部分在Sephadex G交联葡聚糖凝胶柱上继续纯化，不同梯度的NaCl溶液洗脱，收集单峰组分，浓缩，得黄精叶多糖。
[0012]在脱色工艺研究中比较了十种脱色材料，确定脱色的具体步骤为：采用HPD
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5000，NKA
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9或DM130大孔树脂动态吸附，上样浓度为5～30mg/mL，上样量为4～8BV，流速为2～6BV/h。
[0013]在优选的方案中，脱色工艺的具体参数优选为：采用HPD
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5000大孔树脂动态吸附，上样浓度为15mg/mL，上样量为6BV，流速为4BV/h。
[0014]在脱蛋白工艺研究中比较了三种脱蛋白方法，确定盐析法为最优方法，具体步骤为：取脱色后的黄精叶多糖溶液，进行盐析法脱蛋白，反应pH值8.0～9.0，CaCl2浓度6％～10％，水浴温度60℃～80℃，水浴时间10min～30min。然后冷却到室温，稀HCl调节pH至7左右，离心，取上清液浓缩干燥即得。
[0015]在优选方案中，盐析法脱蛋白工艺的具体参数优选为：取脱色后的黄精叶多糖溶液，进行盐析法脱蛋白，反应pH值8.5，CaCl2浓度8％，水浴温度70℃、水浴时间20min。然后冷却到室温，用稀HCl调节pH至7左右，离心，取上清液浓缩干燥即得。
[0016]在纤维素柱层析纯化工艺中，所用DEAE纤维素层析柱的填料包括但不限于DE
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23、DE
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32和DE
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52，优选的方案为DE
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52。
[0017]在葡聚糖凝胶柱层析纯化工艺中，所用Sephadex G交联葡聚糖凝胶柱的填料包括但不限于G
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75、G
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100和G
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150，优选的方案为G
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100。
[0018]本专利技术的第三个目的，公开了上述黄精叶多糖的用途，即公开了一种具有调节肠道菌群功能的保健食品，采用上述黄精叶多糖作为有效成份。
[0019]相对于现有技术，本专利技术的有益效果如下：本专利技术所述黄精叶多糖是首次从中药黄精的叶中分离获得，是一种具有全新结构的多糖分子，并对脱色、脱蛋白、柱层析等提取纯化工艺进行了优化。其提取原料易得，工艺简单可行，制备成本低。所述黄精叶多糖可调节肠道菌群，调节体内短链脂肪酸含量，具有类似益生菌的活性，可作为保健食品的有效成分。
附图说明
[0020]图1脱色材料对比
[0021]图2脱色材料用量对比
[0022]图3脱色温度对比
[0023]图4脱色时间对比
[0024]图5脱色PH值对比
[0025]图6脱色最大上样浓度对比
[0026]图7脱色最大上样量对比
[0027]图8脱色洗脱流速对比
[0028]图9 Sevage法脱蛋白效果
[0029]图10木瓜蛋白酶法脱蛋白效果
[0030]图11pH值对脱蛋白效果的影响
[0031]图12 CaCl2浓度对脱蛋白效果的影响
[0032]图13温度对脱蛋白效果的影响
[0033]图14时间对脱蛋白效果的影响
[0034]图15黄精叶多糖HYP
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2s的紫外光谱
[0035]图16黄精叶多糖HYP
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2s的分子量标准曲线
[0036]图17黄精叶多糖HYP
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2s的高效凝胶渗透色谱洗脱曲线
[0037]图18黄精叶多糖HYP
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2s的单糖组分分析
[0038]图19高碘酸钠标准曲线
[0039]图20黄精叶多糖HYP
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2s的傅立叶
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红外光谱图
[0040]图21黄精叶多糖HYP
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2s的三螺旋结本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种黄精叶多糖，其特征在于，所述黄精叶多糖提取自黄精叶，由六种单糖组成，包括：半乳糖，阿拉伯糖，葡萄糖，木糖，鼠李糖和甘露糖。2.根据权利要求1所述的黄精叶多糖，其特征在于，其单一纯净多糖的纯度在98％以上；其分子量为40～50kDa。3.根据权利要求1～2所述的黄精叶多糖，其特征在于，其含有1
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4，1
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2，1
→
2,6和1
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3糖苷键。4.根据权利要求3所述的黄精叶多糖，其特征在于，其六种单糖的摩尔比为：半乳糖35～41％，阿拉伯糖28～34％，葡萄糖21～25％，木糖2～5％，鼠李糖1～3％，甘露糖1～3％。5.一种黄精叶多糖，其特征在于，其提取自滇黄精、黄精或多花黄精的叶的一种或多种，其由六种单糖组成，包括：半乳糖，阿拉伯糖，葡萄糖，木糖，鼠李糖和甘露糖。6.根据权利要求5所述的黄精叶多糖，其特征在于，其含有三股螺旋结构；其单一纯净多糖的纯度在98％以上。7.根据权利要求5～6所述的黄精叶多糖，其特征在于，其含有β
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型糖苷键且含有吡喃环骨架。8.一种用于获取权利要求1～7任一项所述的黄精叶多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)黄精叶用水热提后醇沉，将沉淀脱色脱蛋白后得到粗多糖；(2)粗多糖用DEAE纤维素层析柱纯化，不同梯度的NaCl溶液洗脱，以苯酚硫酸法进行监测，收集多糖富集部分；(3)多糖富集部分在Sephadex G交联葡聚糖凝胶柱上继续纯化，不同梯度的NaCl溶液洗脱，以...
【专利技术属性】
技术研发人员：罗禹，
申请(专利权)人：西南医科大学，
类型：发明
国别省市：
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