一种利用荧光探针检测酒类样品中乙醛的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用荧光探针检测酒类样品中乙醛的方法，属于酒类质量控制领域。本发明专利技术检测方法是基于荧光探针测定酒类中的乙醛，在pH＝2.0的酸性条件下，利用光电子诱导转移原理实现荧光探针与乙醛的特异性结合。在0

【技术实现步骤摘要】
一种利用荧光探针检测酒类样品中乙醛的方法


[0001]本专利技术涉及一种利用荧光探针检测酒类样品中乙醛的方法，属于酒类质量控制领域。

技术介绍

[0002]酒类的风味物质对其口感和香气起着极其重要的作用，醛类是酒类中存在的主要羰基化合物，其中乙醛是酒类中含量最高的挥发性醛类，在啤酒、白酒、黄酒以及葡萄酒中的含量约占总醛的60％
‑
90％。
[0003]乙醛被国际癌症研究署(International Agency for Research on Cancer，IARC)确认为2B类致癌物，即可能对人类致癌。2009年乙醛被列为I类致癌物，即对人类致癌证据充分。乙醛的含量直接影响着酒类的风味和老化，乙醛浓度低时有水果香，浓度高会产生辛辣的刺激性气味并给酒类带来恶劣的青草味，缩短酒类风味的保鲜期，甚至饮用后会引起人体的不良反应。
[0004]至今，有许多酒类样品中乙醛含量的检测方法，最为常见的是气相色谱法(GC)和高效液相色谱法(HPLC)，为了提高准确性，GC和HPLC法通常会结合固相微萃取或衍生化处理技术。但是GC和HPLC法涉及昂贵仪器的使用、复杂的操作程序以及较长的检测时间，同时为保证检测准确性通常需要对设备进行调试和维护，进而导致较高的检测成本，因此建立一种高效分析和低成本检测酒类样品中乙醛的方法势在必行，这有助于有效控制酒类中乙醛的含量，进而改善酒类的风味，提高我国酒类行业的竞争力。

技术实现思路

[0005]本专利技术要解决的技术问题是提供一种利用荧光探针检测酒类样品中乙醛的方法，荧光探针本身具有较弱的荧光，与乙醛作用后荧光发生增强，而且荧光强度正比于乙醛浓度，从而实现对乙醛浓度的定量，使得对酒类产品中乙醛含量的评价更加高效、科学、全面。
[0006]本专利技术涉及的的荧光探针，其结构式如下：
[0007][0008][0009]本专利技术提供的一种利用荧光探针检测酒类样品中乙醛含量的方法，包括如下步骤：
[0010](1)将式(I)所示结构的荧光探针分散在有机溶剂中，获得荧光探针溶液；然后将荧光探针溶液、盐酸溶液与一系列已知浓度的乙醛标准溶液分别混合，0
‑
10℃下进行反应，反应结束后，获得混合体系；
[0011](2)利用荧光光谱仪上测定混合体系的荧光强度，并利用荧光强度及其相应乙醛
标准溶液的浓度进行线性关联，获得定量检测模型；
[0012](3)按照步骤(1)的过程，将荧光探针溶液、盐酸溶液与酒类样品混合反应，然后测定混合体系的荧光强度，并通过步骤(2)中的定量检测模型，计算得到酒类样品中乙醛的浓度。
[0013]在本专利技术的一种实施方式中，荧光探针溶液、盐酸溶液、乙醛标准溶液的体积比为2：1：1。
[0014]在本专利技术的一种实施方式中，步骤(1)中所述有机溶剂为乙腈、DMSO，乙腈与DMSO的体积比为10：1。
[0015]在本专利技术的一种实施方式中，荧光探针溶液的浓度为600mg/L。
[0016]在本专利技术的一种实施方式中，盐酸溶液是利用乙腈为溶剂配制盐酸溶液。
[0017]在本专利技术的一种实施方式中，盐酸溶液的pH为2；质量分数为2.96％。
[0018]在本专利技术的一种实施方式中，一系列已知浓度的乙醛标准溶液的浓度范围为0
‑
200mg/L。具体可为0mg/L、10mg/L、20mg/L、50mg/L、100mg/L、150mg/L、200mg/L。
[0019]在本专利技术的一种实施方式中，反应的时间为40
‑
60min；具体可选50min。
[0020]在本专利技术的一种实施方式中，反应的温度具体可选5℃。
[0021]在本专利技术的一种实施方式中，荧光强度为发射波长553nm处的荧光强度。
[0022]在本专利技术的一种实施方式中，定量检测模型为F
553nm
＝346.14C+45.17，R2＝0.9954；C的单位为mg/L。
[0023]在本专利技术的一种实施方式中，485nm为激发波长，553nm为发射波长。
[0024]在本专利技术的一种实施方式中，酒样样品还需经过如下预处理：
[0025]啤酒等含气样品需滴加一滴消泡剂，白酒、黄酒以及葡萄酒样品需要用蒸馏水稀释25倍；取50mL酒样，使用双乙酰蒸馏装置蒸馏酒样，当馏出液接近10mL时停止接收，并用蒸馏水补足到10mL，得到馏出液A，即为酒样样品。
[0026]在本专利技术的一种实施方式中，蒸馏过程在1min内完成，馏出液在冰浴下使用10mL具塞比色管接收。
[0027]在本专利技术的一种实施方式中，酒样包括白酒、黄酒以及葡萄酒样品。
[0028]在本专利技术的一种实施方式中，所述检测方法具体过程如下：
[0029](1)以乙腈为溶剂配制质量分数为2.96％的盐酸溶液；以乙腈为溶剂、DMSO为助溶剂(10：1，v/v)配制600mg/L的荧光探针溶液；
[0030](2)用蒸馏水配制0mg/L、10mg/L、20mg/L、50mg/L、100mg/L、150mg/L、200mg/L浓度的乙醛溶液；在96孔酶标板中加入50μL盐酸溶液，50μL标准乙醛溶液，100μL荧光探针溶液，置于5℃培养箱中低温反应50min；在荧光光谱仪上测定荧光强度F
553nm
，以乙醛浓度C为横坐标，荧光强度为纵坐标，得到标准工作曲线，线性回归方程为：
[0031]F
553nm
＝346.14C+45.17，R2＝0.9954，C的单位为mg/L；
[0032](3)取酒样50mL(啤酒等含气样品需滴加一滴消泡剂，白酒、黄酒以及葡萄酒样品需要用蒸馏水稀释25倍)，使用双乙酰蒸馏装置蒸馏酒样，当馏出液接近10mL时停止接收，并用蒸馏水补足到10mL，得到馏出液A；
[0033](4)在96孔酶标板中加入50μL盐酸溶液，50μL馏出液A，100μL荧光探针溶液，置于5℃培养箱中低温反应50min后在荧光光谱仪上检测，将荧光强度带入步骤(2)的线性回归方
程中，得到浓度C，样品的浓度为：
[0034]C
样品
＝C/N(N为样品的浓缩倍数，样品为啤酒时N＝5，样品为白酒、黄酒或葡萄酒时N＝0.2)。
[0035]在本专利技术的一种实施方式中，所述荧光探针可购买或者自制获得。自制的合成方法为：称取500mg NBD
‑
Cl于烧瓶中，外壁包裹锡纸避光。加入50ml氯仿使NBD
‑
Cl充分溶解。加入50ml 5％水合联氨(3.1ml 80％水合联氨+46.9ml甲醇)，氮气吹扫后封口静置1h，析出黄褐色沉淀并抽滤，用二氯甲烷清洗滤饼，得到固体探针产品；相应的合成路线为：
[0036][0037]本专利技术使用荧光探针的检测乙醛的原理是：强供电子基团肼基向吸电子基团硝基提供电子，荧光基团受光电子诱导转移效应影响，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用荧光探针检测酒类样品中乙醛含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将式(I)所示结构的荧光探针分散在有机溶剂中，获得荧光探针溶液；然后将荧光探针溶液、盐酸溶液与一系列已知浓度的乙醛标准溶液分别混合，0
‑
10℃下进行反应，反应结束后，获得混合体系；(2)利用荧光光谱仪上测定混合体系的荧光强度，并利用荧光强度及其相应乙醛标准溶液的浓度进行线性关联，获得定量检测模型；(3)按照步骤(1)的过程，将荧光探针溶液、盐酸溶液与酒类样品混合反应，然后测定混合体系的荧光强度，并通过步骤(2)中的定量检测模型，计算得到酒类样品中乙醛的浓度。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，荧光探针溶液、盐酸溶液、乙醛标准溶液的体积比为2：1：1。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述有机溶剂为乙腈、DMSO；乙腈与DMSO的体积比为10：1。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，荧光探...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘春凤，刘宜嵩，陈珊珊，李崎，王金晶，郑飞云，钮成拓，许鑫，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：