基于核磁共振技术的异麦芽酮糖天然丰度双量子转移谱的测试方法技术

本发明专利技术公开了一种基于核磁共振技术的异麦芽酮糖天然丰度双量子转移谱的测试方法，属于化学分析技术领域。所述方法步骤包括：(1)将异麦芽酮糖溶于氘代二甲亚砜和四甲基硅烷的混合溶剂中，转移至核磁管中，将核磁管放入核磁谱仪的检测磁体中；(2)在仪器工作站中选择氘代二甲亚砜，进行调谐、匀场和锁场；(3)采用绝热180

【技术实现步骤摘要】
基于核磁共振技术的异麦芽酮糖天然丰度双量子转移谱的测试方法


[0001]本专利技术涉及化学分析
，特别涉及基于核磁共振技术的异麦芽酮糖天然丰度双量子转移谱(INADEQUATEAD)的测试方法。

技术介绍

[0002]异麦芽酮糖(Isomaltulose)源自甜菜，是一种天然糖类，具有独特的分子结构。与蔗糖类似，它由葡萄糖和果糖分子组成，但其分子间的连接比蔗糖更强，这意味着它能被人体完全消化，但速度更慢。作为一种能够缓慢释放碳水化合物的天然成分，异麦芽酮糖能以更稳定、更持续的方式提供完整的碳水化合物能量(葡萄糖)，同时保持血糖平衡，能够在更长时间内利用体内的碳水化合物能量来源。同时，因其优良口感、低甜和具有抑制蛀牙的特性，被广泛地应用于各种食品和甜味剂中。
[0003]异麦芽酮糖的结构式如下：
[0004][0005]中国专利CN100448884C，CN1324038C，CN1324039C，CN1148377C，CN1030530C报道了异麦芽酮糖的制备方法。专利CN1297217C报道了异麦芽酮糖在食物中的应用。因此如何表征、检测的异麦芽酮糖的结构显得尤为重要，更有利于异麦芽酮糖的使用。近年来，已有将二维核磁共振谱技术应用于有机分子结构的测定分析中，二维的天然丰度双量子转移实验(Incredible Natural Abundance DoublE QUAntum Transfer Experiment，INADEQUATE)谱是一种
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C
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13r/>C化学位移相关谱，该谱在化合物结构确定及
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C谱峰指认的NMR研究中具有重要的价值，但由于该谱灵敏度较低，做谱有一定难度，应用报告不多。目前尚没有关于异麦芽酮糖的INADEQUATEAD谱测试方法的报道。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种基于核磁共振技术的异麦芽酮糖天然丰度双量子转移谱的测试方法。通过采用绝热180
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和梯度
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梯度稳态的方式，并将改造的脉冲序列应用于测试异麦芽酮糖天然丰度双量子转移谱，得到更清晰的异麦芽酮糖天然丰度双量子转移谱。
[0007]为实现上述目的，本专利技术提供了如下技术方案：
[0008]一种基于核磁共振技术的异麦芽酮糖天然丰度双量子转移谱的测试方法，包括以下步骤：
[0009](1)将异麦芽酮糖溶于氘代二甲亚砜和四甲基硅烷(TMS)的混合溶剂中，转移至核磁管中，将核磁管放入核磁谱仪的检测磁体中；
[0010](2)在仪器工作站中选择氘代二甲亚砜，进行调谐、匀场和锁场；
[0011](3)采用绝热180
°
和梯度
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梯度稳态的脉冲方式，载入脉冲序列并设置其他检测参数；
[0012](4)完成设置后执行程序，得到异麦芽酮糖天然丰度双量子转移谱；
[0013]步骤(3)中所述脉冲序列为：以碳为观测核，依次经过一个梯度场(hsgt)、一个矩形π/2脉冲(pw)、一个梯度场(hsgt)、一个驰豫延迟时间(d1)、一个矩形π/2脉冲(pw)、一段绝热脉冲(ad)、一个梯度
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梯度稳态(compad)、一段绝热脉冲(ad)、两个矩形π/2脉冲(pw)和一个采样时间(at)。
[0014]优选地，所述梯度场(hsgt)的时间为2.0ms；所述矩形π/2脉冲(pw)的脉冲时间为10.1μs；所述驰豫延迟时间(d1)为1.0s；所述绝热脉冲(ad)的脉冲时间为3.545ms；所述梯度
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梯度稳态(compad)的时间为1.999ms；所述采样时间(at)为30～65ms。
[0015]优选地，步骤(3)中所述其他检测参数包括：直接维谱宽(sw)、
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C
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C耦合常数(J
C
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C
)、扫描次数(nt)和采集模式。
[0016]更优选地，所述直接维谱宽(sw)为37878.8Hz；所述
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C
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C耦合常数(J
C
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C
)为45～65Hz；所述扫描次数(nt)为256～512次。
[0017]优选地，步骤(1)中所述混合溶剂中氘代二甲亚砜和四甲基硅烷的体积比为100:3；所述异麦芽酮糖在所述混合溶剂中的浓度为50mg/mL。
[0018]本专利技术的有益技术效果如下：
[0019]本专利技术采用基于碳核的绝热180
°
脉冲(Adiabatic Pulses)，比通常的INADEQUATE谱产生更高灵敏度，特别是当碳脉冲未针对给定样品进行完美校准时，并且绝热180
°
脉冲在较宽的13C谱宽上提供了更均匀的反转。绝热脉冲是一种特殊条件下的射频脉冲，是一种电磁波。对于一个核磁共振序列，射频脉冲是不可或缺，可以说没有射频脉冲就不能产生磁共振信号。电磁振动的传播是一个电磁波，共振的本质是能量传播，如果发射一个射频(RadioFrequency，RF)脉冲，且该射频脉冲的频率等于位于静电场B0磁场环境中的氢质子进动频率(即拉莫尔频率)，则质子能够吸收能量，产生能量跃迁，该现象就叫做核磁共振。RF脉冲分类很多，按对场敏感性来说，分为绝热脉冲和非绝热脉冲等。绝热脉冲所需要的时间较短，对射频场B1不敏感，保证反转角度的准确。绝热脉冲的脉宽比较长，B1幅度大，可增加样品对RF能量的吸收；为了保证绝热脉冲对B1非均匀性不敏感，脉冲角度只能选择90
°
的整倍数，可提高对流动、偏共振和弛豫效应的敏感性。此外，使用梯度
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90
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梯度(Grad
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Grad)稳态有助于清除未松弛的磁化，这可以产生更清晰的谱图。
[0020]由于二维INADEQUATEAD谱灵敏度较常规碳谱低两个数量级，信号灵敏度低，噪声较大，假峰较多，并且还会因为个别碳核灵敏度过低，其谱峰被噪声淹没，以及因数值分辨率不够大，因此造成峰的丢失。本专利技术通过优化了相关参数(
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C
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C耦合常数、采样时间、扫描次数)，为异麦芽酮糖样品的
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C
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C化学位移相关谱测定提供了一种简便有效的手段。
附图说明
[0021]图1为本专利技术实施例1中异麦芽酮糖的
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C谱的脉冲序列；
[0022]其中，脉冲序列的时序分为预备期、演化期和检测期三个时期，以碳为观测核，在预备期经过一段弛豫延迟时间(d1)；在演化期x轴上加一个矩形π激发脉冲(p1)，经过脉冲
间隔时间(d2)后再加上一个矩形π/2脉冲本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于核磁共振技术的异麦芽酮糖天然丰度双量子转移谱的测试方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将异麦芽酮糖溶于氘代二甲亚砜和四甲基硅烷的混合溶剂中，转移至核磁管中，将核磁管放入核磁谱仪的检测磁体中；(2)在仪器工作站中选择氘代二甲亚砜，进行调谐、匀场和锁场；(3)采用绝热180
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和梯度
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梯度稳态的脉冲方式，载入脉冲序列并设置其他检测参数；(4)完成设置后执行程序，得到异麦芽酮糖天然丰度双量子转移谱；步骤(3)中所述脉冲序列为：以碳为观测核，依次经过一个梯度场、一个矩形π/2脉冲、一个梯度场、一个驰豫延迟时间、一个矩形π/2脉冲、一段绝热脉冲、一个梯度
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梯度稳态、一段绝热脉冲、两个矩形π/2脉冲和一个采样时间。2.根据权利要求1所述的基于核磁共振技术的异麦芽酮糖天然丰度双量子转移谱的测试方法，其特征在于，所述梯度场的时间为2.0ms；所述矩形π/2脉冲的脉冲时间为10.1μs；所述驰豫...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘雅琴，余明新，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：