一种用于骨修复的药物组合物制造技术

本发明专利技术的具体实施方式提供一种用于骨修复的药物组合物，所述组合物包括自复制mRNA,其中，所述自复制mRNA包含骨修复基因，所述药物组合物有利于维持促骨修复基因长时间内高表达，对骨损伤位置少量少批次注射便可进行有效修复。效修复。效修复。

【技术实现步骤摘要】
一种用于骨修复的药物组合物


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，特别涉及一种用于骨修复的药物组合物。

技术介绍

[0002]创伤和疾病等原因导致的骨组织缺损是临床常见且较难处理的问题，如何促进骨组织缺损的修复一直是相关领域学者的研究重点。临床治疗骨
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软骨全层缺损的方法有：微裂纹、软骨刮削、关节置换、马赛克成形术、软骨下骨钻孔和假关节置换等。然而，这些治疗方式具有供体来源有限、治疗部位的病变、移植体的松脱和假体有限以及耐久性差等局限性。
[0003]随着生物技术的发展，新得的生物技术不断应用于骨修复，例如有研究通过经皮注射骨生长因子，直接将高效的骨诱导剂输送至骨折、骨缺损及骨不连接部位，具有创伤小，适应症广等优点，针对临床中大段粉碎性骨折患者，在闭合复位后向骨折部位注入骨生长因子能够大大提高骨折愈合率；而对于骨不连患者，在内固定或外固定完善的情况下，采取局部注射骨生长因子，可进一步扩大了非手术治疗的适应范围，但是该方法需要对骨生长因子进行提取纯化，纯化工艺复杂，同时，在纯化保存以及使用过程中，骨生长因子容易失效，并且使用时，有效时间短，需要持续给予注射才能起效。还有研究利用组织工程技术为骨修复，通过间充质干细胞与支架材料复合后进行成骨诱导分化，但利用间充质干细胞进行修复，常常受到局部微环境的调节，炎性细胞因子如肿瘤坏死因子和白细胞介素1等常常抑制间充质干细胞向成骨细胞分化，影响骨再生修复，同时干细胞增生容易引发肿瘤。

技术实现思路

[0004]本专利技术的具体实施方式提供一种克服以上所述问题的用于骨修复的药物组合物，具体方案如下：
[0005]一种用于骨修复的药物组合物，所述组合物包括自复制mRNA,其中，所述自复制mRNA包含骨修复基因。
[0006]可选的，所述骨修复基因为BMP基因或VEGFA基因。
[0007]可选的，所述自复制mRNA为BMP2基因自复制mRNA、VEGFA基因自复制mRNA或BMP2与VEGFA双基因自复制mRNA。
[0008]可选的，所述组合物还包括脂质体，所述自复制mRNA分散于脂质体中。
[0009]可选的，所述脂质体由DOTAP、HSPC、Chol和PEG
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DSPE组成。
[0010]可选的，所述脂质体包含阳离子穿膜肽。
[0011]可选的，所述组合物还包括水凝胶，所述自复制mRNA与脂质体负载于所述水凝胶上。
[0012]可选的，所述水凝胶为甲基丙烯酸酐化明胶水凝胶。
[0013]可选的，所述水凝胶中，甲基丙烯酸酐化明胶的重量百分比为3wt％～9wt％。
[0014]可选的，所述BMP2基因自复制mRNA的序列如SEQ ID NO.1所示，所述VEGFA基因自
复制mRNA的序列如SEQ ID NO.2所示，所述BMP2与VEGFA双基因自复制mRNA的序列如SEQ ID NO.3所示。
[0015]可选的，所述药物组合物为骨损伤部原位注射制剂。
[0016]本专利技术具体实施方式的用于骨修复的药物组合物，所述组合物包括自复制mRNA,其中，所述自复制mRNA包含BMP基因或VEGFA基因的骨修复基因，所述药物组合物有利于维持促骨修复基因长时间内高表达，对骨创伤位置少量少批次注射便可进行有效修复。
附图说明
[0017]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
[0018]图1为实施例中3wt％,5wt％,7wt％,和9wt％浓度的GelMA制备的水凝胶球的显微镜观察及组织切片内部表征结果；
[0019]图2为实施例中脂质体、短链BMP2基因mRNA与脂质体复合,自复制BMP2基因mRNA与脂质体复合的混合物的SEM观察形态图；
[0020]图3为实施例中BMP4基因自复制mRNA、TGFB基因自复制mRNA、BMP2基因自复制mRNA、VEGFA基因自复制mRNA、以及BMP2与VEGFA双基因自复制mRNA体外细胞实验结果；
[0021]图4为实施中骨修复的实验效果图。
具体实施方式
[0022]本专利技术的具体实施方式提供一种用于骨修复的药物组合物，所述组合物包括自复制mRNA,其中，所述自复制mRNA包含骨修复基因。本专利技术的专利技术人研究发现，当骨创伤位置原位施用所述药物组合物后，促骨修复基因会在长的时间内得到持续显著表达，少量少批次注射便可对骨损伤进行有效修复。
[0023]本专利技术具体实施方式的药物组合物，所述自复制mRNA包括自复制序列以及骨修复基因序列，在一些具体实施方式种，所述自复制序列来源于正链ssRNA病毒，具体例如委内瑞拉马脑脊髓炎病毒(TC83 Venezuelan Equine Encephalitis Virus，VEEV)，辛德毕斯病毒(Sin
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dbis virus)、屈曲病毒(Chikungunya virus)、东方马脑脊髓炎病毒(Eastern equine encephali
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tis virus)、西方马脑脊髓炎病毒(Western equineencephalitis virus)、马雅鲁病毒(Mayarovirus)、生里基森林病毒(Semliki forest virus)、委内瑞拉马脑脊髓炎病毒(Venezuelan equine encephalitisvirus)等，特别的为用委内瑞拉马脑脊髓炎病毒(TC83 Venezuelan Equine Encephalitis Virus，VEEV)。
[0024]本专利技术具体实施方式的药物组合物，在一些具体实施方式中，所述自复制mRNA包含BMP基因或VEGFA基因，在一些具体实施方式中，所述自复制mRNA为BMP2基因自复制mRNA，在一些具体实施方式中，所述自复制mRNA为VEGFA基因自复制mRNA，在一些具体实施方式中所述自复制mRNA为BMP2与VEGFA双基因自复制mRNA，所述实施方式的自复制mRNA，特别是当自复制mRNA为BMP2与VEGFA双基因自复制mRNA时，具有更为显著的促骨修复基因表达。
[0025]本专利技术具体实施方式的药物组合物，在一些具体实施方式中，所述BMP2基因自复制mRNA的序列如SEQ ID NO.1所示，所述VEGFA基因自复制mRNA的序列如SEQ ID NO.2所示，所述BMP2与VEGFA双基因自复制mRNA的序列如SEQ ID NO.3所示。
[0026]本专利技术具体实施方式的药物组合物，为提高所述自复制mRNA的生物活性，在一些具体实施方式中，所述组合物还包括脂质体，所述自复制mRNA分散于脂质体中，通过所述脂质体作为所述药物组合物的递送载体。在一些具体实施方式中，所述脂质体的脂质为磷脂，例如氢化大豆卵磷脂(HSPC)，卵磷脂、磷脂酰乙醇胺、鞘磷脂、脑磷脂、心磷脂，在一些具体实施方式中所述脂质还包括阳离子脂质，例如1，2
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于骨修复的药物组合物，其特征在于，所述组合物包括自复制mRNA,其中，所述自复制mRNA包含骨修复基因。2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述骨修复基因为BMP基因或VEGFA基因。3.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，所述自复制mRNA为BMP2基因自复制mRNA、VEGFA基因自复制mRNA或BMP2与VEGFA双基因自复制mRNA。4.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物还包括脂质体，所述自复制mRNA分散于脂质体中。5.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述脂质体由DOTAP、HSPC、Chol和PEG
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DSPE组成。6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述脂质体包含阳离子穿膜肽。7.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：李亘，杨太华，王蕾，崔文国，阮慧瞳，杨仁豪，徐艺冬，张尹，
申请(专利权)人：上海唯可生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：