【技术实现步骤摘要】
miR
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26a在制备治疗子宫内膜炎的药物中的应用
[0001]本专利技术涉及一种内源性的非编码小RNAs的新应用，尤其涉及miR
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26a 在制备子宫内膜炎炎的药物中的应用，属于生物医药领域。
技术介绍
[0002]子宫内膜炎是造成子宫内膜损伤的主要原因之一，是生殖系统感染中 的常见病，也是奶牛流产的主要原因之一。其分子机制和损伤途径难以捉 摸，子宫内膜炎的发病率很高。子宫内膜上皮细胞是宿主抵御外界刺激的 重要效应细胞，在子宫内膜损伤所涉及的子宫内膜炎症的发病机制中起着 至关重要的作用。
[0003]MicroRNA是一类进化上保守的非编码小分子RNA，通过与靶基因 mRNA的碱基互补，引导沉默复合体(RISC)降解mRNA或阻碍其翻译。MicroRNA可以在翻译水平上调节基因表达。大量证据表明，miRNAs是 治疗多种炎症性疾病的新靶点，并与其发病机制密切相关。miRNAs在反 刍动物生殖系统中的重要作用已在以往的研究中得到广泛认可。近期miRNA表达谱分析也揭示了子宫组织miRNAs参与了奶牛子宫内膜炎症 损伤的发生发展。然而，尚不清楚IFN
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τ对子宫内膜炎症损伤的缓解作用 是否也可由这些差异表达的miRNA介导。
技术实现思路
[0004]本专利技术的目的是提供miR
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26a在制备治疗子宫内膜炎的药物中的应用。 本专利技术利用子宫内膜上皮细胞建立体外炎症损伤模型和小鼠子宫内膜炎症 损伤模型，验证了miR>‑
26a在子宫内膜炎症损伤中的生物学功能和调控机 制。
[0005]为了实现以上技术方案，本专利技术提供了以下技术方案：
[0006]技术方案一：miR
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26a基因在制备抑制子宫内膜炎药物中的应用。
[0007]进一步地，所述miR
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26a通过过表达抑制促炎细胞因子IL
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1β、IL
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6 和TNF
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α的分泌。
[0008]技术方案二：miR
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26a基因在制备调控靶向PTEN表达药物中的应用。
[0009]进一步地，所述miR
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26a是通过靶向并下调PTEN的表达，进而实现治 疗和/或预防子宫内膜炎。
[0010]进一步地：所述miR
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26a是通过靶向下调PTEN表达，激活PI3K/AKT 信号通路，抑制NF
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κB的激活，进而实现治疗和/或预防所述子宫内膜炎 的炎症损伤。
[0011]技术方案三：miR
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26a基因在制备诊断和/或检测子宫内膜炎的试剂盒 中的应用。
[0012]进一步地：所述试剂盒是通过检测所述miR
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26a基因的表达水平来实 现对子宫内膜炎的诊断和/或检测。
[0013]与现有技术相比，本专利技术的有益效果：
[0014]本专利技术证明了miR
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26a的过表达显著抑制促炎细胞因子IL
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1β、IL
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6 和TNF
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α的分泌及miR
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26a通过靶向PTEN 3'
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UTR抑制其翻译，进而激 活PI3K/AKT通路，使NF
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κB信号传导受到抑制。并证实了IFN
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τ作为 抗炎剂可以上调miR
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26a的表达并靶向PTEN基因以抑制
bEECs的炎性损 伤。进一步证实了IFN
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τ作为抗炎剂可以上调miR
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26a的表达并靶向PTEN 基因以抑制bEECs的炎性损伤。上述研究结果为子宫内膜炎发生提供了一 个新的病理生理学机制，并可用于子宫内膜炎疾病的预防与治疗。
附图说明
[0015]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对 实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附 图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出 创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0016]图1为牛子宫内膜上皮细胞(bEEC)的培养和鉴定结果；(A)光学显微镜 下bEECs的细胞形态；(B)bEECs中特定角蛋白18(红色)的表达；(C) 蓝色是DAPI染色的细胞核；(D)合并(
×
400)；数据表示为平均值
±
标准 差，三个独立实验；*p<0.05；**p<0.01；
[0017]图2为bEECs炎症损伤模型的构建；(A)为qPCR检测TNF
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α、IL
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1β 和IL
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6的水平；(B)免疫荧光实验显示p65的磷酸化水平(
×
400，尺度 ＝50μm)；数据表示为平均值
±
标准差，三个独立实验；*p<0.05；**p<0.01；
[0018]图3为IFN
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τ介导miRNA表达结果；(A)为高通量测序结果；(B)miRNA的火山图；(C)miR
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26a在bEEC中的表达；(D)miR
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26a在小鼠子宫内膜组 织中的总表达；数据表示为平均值
±
标准差，三个独立实验。*p<0.05； **p<0.01；
[0019]图4为miR
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26a抑制bEEC中LPS介导的炎性细胞因子；(A)以U6作为 内部对照检测miR
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26a的相对表达水平；(B,C)通过qPCR检测炎性细胞因 子IL
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1β、IL
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6和TNF
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α的mRNA水平；(D,E)ELISA检测细胞因子IL
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1β、 IL
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6和TNF
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α的分泌水平；数据表示为平均值
±
标准差，三个独立实验； *p<0.05；**p<0.01；
[0020]图5为miR
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26a负向调节NF
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κB通路；(A,B)是NF
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κBp65的磷酸化 水平和TLR4的表达水平；(C)p65的磷酸化水平和TLR4的表达；(D,E)p
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p65 核移位和TLR4的荧光强度；数据表示为平均值
±
标准差，三个独立实验； *p<0.05；**p<0.01；
[0021]图6为miR
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26a的过表达激活PI3K/AKT信号；(A)为p
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PI3K和p
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.miR
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26a基因在制备抑制子宫内膜炎药物中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述miR
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26a通过过表达抑制促炎细胞因子IL
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1β、IL
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6和TNF
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α的分泌。3.miR
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26a基因在制备调控靶向PTEN表达药物中的应用。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述miR
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26a是通过靶向并下调PTEN的表达，进...
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