同时检测多种酸性单糖的方法技术

本发明专利技术公开了一种同时检测多种酸性单糖的方法，该方法包括：将待测样本进行酸解处理，以便得到酸解后的样本；以及利用离子色谱

【技术实现步骤摘要】
同时检测多种酸性单糖的方法


[0001]本专利技术设计分析化学领域，具体的，涉及同时检测多种酸性单糖的方法。

技术介绍

[0002]多糖是糖天然存在的重要形式,包括结构多糖、储存多糖和生物活性多糖。其中含有酸性基团的多糖一般称为酸性多糖。酸性多糖具有增强机体免疫功能、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、抗衰老等重要生物活性,在功能性食品、生物医药、生物材料等领域中得到广泛应用。为了对酸性多糖对组成进行分析，一个重要的基础就是需要把酸性多糖用酸水解成单糖后进行分析，因此，同时对多种酸性单糖进行分析方法有待研究。

技术实现思路

[0003]本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术的一个目的在于提出一种同时检测多种酸性单糖的方法，该方法能同时对多种单糖进行检测，检测的灵敏度高，准确性好，该方法尤其适用于食物中的酸性单糖的检测，例如燕窝中酸性单糖的检测。
[0004]因而，根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了一种同时检测多种酸性单糖的方法。根据本专利技术的实施例，该方法包括：将待测样本进行酸解处理，以便得到酸解后的样本；利用离子色谱
‑
脉冲安培检测系统对所述酸解后的样本进行检测，以便获得所述酸性单糖的含量。
[0005]根据本专利技术实施例的同时检测多种酸性单糖的方法，先对样本进行酸解处理，促进多糖分解，再利用离子色谱
‑
脉冲安培检测系统进行检测，检测的灵敏度和准确度高。
[0006]另外，根据本专利技术上述实施例的同时检测多种酸性单糖的方法，还可以具有如下附加的技术特征：
[0007]根据本专利技术的实施例，利用三氟乙酸进行所述酸解处理，优选地，所述三氟乙酸的浓度为0.02
‑
0.1mmol/L，优选地，为0.05
‑
0.1mmol/L。
[0008]根据本专利技术的实施例，基于0.1g所述待测样本，所述三氟乙酸的加入量为100
‑
300μL。
[0009]根据本专利技术的实施例，所述酸解处理的时间为10
‑
20分钟。
[0010]根据本专利技术的实施例，所述离子色谱
‑
脉冲安培联用检测系统的离子色谱检测条件：色谱柱：Dionex CarboPac PA 20色谱柱，规格为3mm
×
150mm，6μm；柱温：30℃；流速：0.4mL/min；进样量：5μL。
[0011]根据本专利技术的实施例，所述离子色谱仪的洗脱方式为等度洗脱。
[0012]根据本专利技术的实施例，所述等度洗脱的洗脱液为10mM NaOH和140mM醋酸钠组成的混合溶液。
[0013]根据本专利技术的实施例，所述离子色谱
‑
脉冲安培检测系统中的脉冲安培检测条件为积分脉冲检测，并选用四波形电位采样。
[0014]根据本专利技术的实施例，所述酸性单糖为选自N
‑
乙酰神经氨酸(N
‑
acetyl neuraminic acid)、N
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羟乙酰神经氨酸(N
‑
glycolylneuraminic acid)、D
‑
甘露糖醛酸(manuuronic acid)、葡萄糖醛酸(Glucuronic acid)和D
‑
(+)
‑
半乳糖醛酸(D
‑
(+)
‑
Galacturonic acid)中的至少一种。
[0015]根据本专利技术的实施例，所述多种为至少5种。
[0016]本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。
附图说明
[0017]本专利技术的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：
[0018]图1显示了根据本专利技术一个实施例的使用不同色谱柱时HPLC
‑
MS/MS分析唾液酸色谱结果实验图，其中，A为反相C18色谱柱；B为亲水Hilic色谱柱；
[0019]图2显示了根据本专利技术一个实施例的离子色谱分析5种唾液酸类酸性单糖色谱结果示意图，其中，1为N
‑
乙酰神经氨酸；2为N
‑
羟乙酰神经氨酸；3为D
‑
(+)
‑
半乳糖醛酸；4为葡萄糖醛酸；5为D
‑
甘露糖醛酸；
[0020]图3显示了根据本专利技术一个实施例的燕窝样品分别经不同物质酸解后的离子色谱图，其中，A为0.02M和0.05M盐酸酸解；B为0.05M和0.1M三氟乙酸酸解；C为乙酸、盐酸和三氟乙酸酸解。
具体实施方式
[0021]下面详细描述本专利技术的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，仅用于解释本专利技术，而不能理解为对本专利技术的限制。
[0022]需要说明的是，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。进一步地，在本专利技术的描述中，除非另有说明，“多个”的含义是两个或两个以上。
[0023]根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了一种同时检测多种酸性单糖的方法。根据本专利技术实施例的同时检测多种酸性单糖的方法，先对样本进行酸解处理，促进多糖分解，在利用离子色谱
‑
脉冲安培检测系统进行检测，检测的灵敏度和准确度高。
[0024]本专利技术实施例选择离子色谱
‑
脉冲安培检测系统进行检测，相对于液相色谱
‑
串联系统，灵敏度和准确度更高，采用液相色谱
‑
串联质谱检测酸性单糖，在液相色谱上没有酸性单糖保留。为了便于理解该同时检测多种酸性单糖的方法，在此对该方法进行解释说明，根据本专利技术的实施例，该方法包括：
[0025]S100酸解处理
[0026]根据本专利技术的实施例，将待测样本进行酸解处理，以便得到酸解后的样本。由于生物样本中的酸性单糖多是以糖苷键的形式和蛋白或是别的单糖以共价键相结合，所以需要在检测前进行酸解处理，将之变成单糖后进行检测。
[0027]根据本专利技术的实施例，利用三氟乙酸进行所述酸解处理。由于三氟乙酸是有机酸，可以在酸性水解过程中对单糖的羟基起到保护作用，并且，三氟乙酸属于强酸，酸性远大于乙酸，仅略小于盐酸，酸解能力强，有利于实现糖蛋白中酸性单糖的解离，适于食品的酸解处理。根据本专利技术的优选实施例，所述三氟乙酸的浓度为0.02
‑
0.1mmol/L，优选地，为0.05
‑
0.1mmol/L。由此，在该浓度范围，三氟乙酸的酸解效果更佳。
[0028]根据本专利技术的实施例，基于0.1g所述待测样本本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时检测多种酸性单糖的方法，其特征在于，包括：将待测样本进行酸解处理，以便得到酸解后的样本；以及利用离子色谱
‑
脉冲安培检测系统对所述酸解后的样本进行检测，以便获得所述酸性单糖的含量。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，利用三氟乙酸进行所述酸解处理，优选地，所述三氟乙酸的浓度为0.02
‑
0.1mmol/L，优选地，为0.05
‑
0.1mmol/L。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，基于0.1g所述待测样本，所述三氟乙酸的加入量为100
‑
300μL。4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述酸解处理的时间为10
‑
20分钟。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述离子色谱
‑
脉冲安培联用检测系统的离子色谱检测条件：色谱柱：Dionex CarboPac PA 2...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯峰，王东亮，刘芳，林小仙，苗树，
申请(专利权)人：北京小仙炖生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：