高产L-脯氨酸的谷氨酸棒杆菌以及高产L-脯氨酸的方法技术

本发明专利技术提供了一种生产L

【技术实现步骤摘要】
高产L
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脯氨酸的谷氨酸棒杆菌以及高产L
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脯氨酸的方法


[0001]本专利技术属于分子生物学和生物工程领域，具体涉及一种产L
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脯氨酸的谷氨酸棒杆菌，以及利用该菌株生产L
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脯氨酸及其衍生物的方法。

技术介绍

[0002]L
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脯氨酸，是天然存在的一种人体的非必需氨基酸，在临床、生物材料和工业等方面有广泛的应用。L
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脯氨酸的生产方法主要有化学法和发酵法，由于化学提取法污染严重成本高，已逐渐失去市场，微生物发酵法由于具有生产成本低、生产强度高、高特异性和对环境污染小等优点而成为当今工业应用最广泛的方法。目前，常用的工业发酵菌株有棒杆菌和埃希氏菌，常用的埃希氏菌如大肠杆菌(Escherichia coli)，常用的棒杆菌如谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)，短杆菌如黄色短杆菌(Brevibacterium flavum)、乳酸发酵短杆菌(Brevibacterium lactofermentus)，以及节本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高产L
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脯氨酸的重组谷氨酸棒杆菌，其特征在于，所述菌株中包括以下特征：a)脯氨酸脱氢酶/吡咯
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羧酸脱氢酶PutA失活；且b)谷氨酸激酶ProB活性增强；且c)谷氨酸
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半醛脱氢酶ProA活性增强；且d)吡咯
‑5‑
羧酸脱氢酶ProC活性增强；且e)谷氨酸脱氢酶Gdh活性增强；且f)丙酮酸羧化酶Pyc活性增强；且g)甘油醛
‑3‑
磷酸脱氢酶GapN活性增强；且h)L
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脯氨酸外排蛋白ThrE或SerE活性增强；且i)L
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谷氨酸外排蛋白MscCG失活。2.如权利要求1所述的谷氨酸棒杆菌，其特征在于，a)所述脯氨酸脱氢酶/吡咯
‑5‑
羧酸脱氢酶PutA、L
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谷氨酸外排蛋白MscCG的失活是通过敲除部分或完全编码基因实现的；b)所述谷氨酸激酶ProB、谷氨酸
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半醛脱氢酶ProA、吡咯
‑5‑
羧酸脱氢酶ProC、谷氨酸脱氢酶Gdh、丙酮酸羧化酶Pyc、甘油醛
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磷酸脱氢酶GapN、L
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脯氨酸外排蛋白ThrE或SerE的活性增强是通过强启动子替换野生型启动子实现的。3.如权利要求1或2所述的谷氨酸棒杆菌，其特征在于，a)所述谷氨酸激酶ProB的150位缬氨酸被天冬酰胺取代；b)所述谷氨酸激酶ProB编码基因、谷氨酸
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【专利技术属性】
技术研发人员：郑平，刘娇，孙际宾，刘莫识，周文娟，孙冠男，王钰，石拓，郭轩，马延和，
申请(专利权)人：中国科学院天津工业生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：