一种生产莽草酸的重组菌及其构建方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种生产莽草酸的重组菌，表达调控细胞不对称分裂的靶点基因和调控莽草酸生产的靶点基因；调控细胞不对称分裂的靶点基因包括编码细胞骨架蛋白PopZ的基因popZ，调控莽草酸生产的靶点基因包括编码DAHP合成酶的基因aroG，编码3

【技术实现步骤摘要】
一种生产莽草酸的重组菌及其构建方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物工程
，尤其涉及一种生产莽草酸的重组菌及其构建方法和应用。

技术介绍

[0002]莽草酸是一种良好的医药中间体，通过影响花生四烯酸代谢，抑制血小板聚集，抑制动、静脉血栓及脑血栓形成，并具有抗炎、镇痛作用，还可作为抗病毒、抗血栓、抗脑缺血和抗癌药物。莽草酸还是微生物代谢的重要中间体，是合成生物碱、芳香族氨基酸和吲哚衍生物等的原料，具有极高的应用价值。近年来，莽草酸作为临床上对抗禽流感的唯一有效药物达菲的合成前体而倍受关注。
[0003]莽草酸途径广泛存在于植物、细菌等微生物中，利用微生物工程菌合成莽草酸，在生产规模、生产工艺与生产周期等方面具有显著优势，因此成为国内外很多医药公司与实验室研究的热点。莽草酸途径是以磷酸烯醇式丙酮酸、4
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磷酸赤藓糖为起始底物，在生物体内经过一系列催化酶的催化作用生成莽草酸，然后再以莽草酸为中间化合物合成一系列芳香族类化合物，如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸等的过程。生物细胞以葡萄糖为初始底物，在经过糖酵解途径合成磷酸烯本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生产莽草酸的重组菌，其特征在于：所述重组菌敲除了编码莽草酸激酶I的基因aroK和编码莽草酸激酶II的基因aroL，并表达了调控细胞不对称分裂的靶点基因和调控莽草酸生产的靶点基因；所述调控细胞不对称分裂的靶点基因包括编码细胞骨架蛋白PopZ的基因popZ，所述调控莽草酸生产的靶点基因依次为编码3
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脱氢奎宁酸合酶的基因aroB、编码DAHP合成酶的基因aroG和编码转酮醇酶的基因tktA。2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于：所述重组菌以菌株GL0002为宿主。3.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于：所述重组菌以pETac
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PopZ和PJ01
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GAB为表达载体，其中，所述pETac
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PopZ以pETac为载体连接了基因popZ，所述PJ01
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GAB以PJ01为载体依次连接了基因aroB、基因aroG和基因tktA。4.根据权利要求3所述的重组菌，其特征在于，所述表达载体的构建方法为：将含有B0034RBS的基因popZ插入至pETac载体中得到pETac
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PopZ；将含有B0034RBS的基因aroB、aroG和tktA依次插入至PJ01载体中得到PJ01
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GAB。5.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于：所述编码细胞骨架蛋白PopZ的基因popZ的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。6.权利要求1
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5任一项所述的重组菌的构建方法，其特征在于，包括以下步...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘立明，丁强，陈修来，高聪，郭亮，胡贵鹏，刘佳，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：