兽疫链球菌的基因工程菌株及其应用制造技术

本发明专利技术提出了一种兽疫链球菌的基因工程菌株。所述基因工程菌株携带外源的基因表达框，所述外源的基因表达框包括第一基因表达框和第二基因表达框，其中，所述第一基因表达框包括第一启动子和hasA基因，所述第一启动子和hasA基因可操作的连接；所述第二基因表达框包括第二启动子和hasB基因，所述第二启动子和hasB基因可操作的连接。根据本发明专利技术实施例的兽疫链球菌的基因工程菌株，携带外源的hasA基因表达框和外源的hasB基因表达框，而不携带外源的hasC基因表达框，外源的基因表达框中的hasA基因和hasB基因在两个独立地启动子下启动表达，相比于现有兽疫链球菌的基因工程菌株，具有显著更高的HA合成产量。有显著更高的HA合成产量。

【技术实现步骤摘要】
兽疫链球菌的基因工程菌株及其应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体地，本专利技术涉及兽疫链球菌的基因工程菌株及其应用，更具体地，本专利技术涉及兽疫链球菌的基因工程菌株、提高兽疫链球菌合成透明质酸的方法以及生产透明质酸的方法。

技术介绍

[0002]透明质酸(hyaluronic acid或hyaluronan,HA)是由葡萄糖醛酸和氨基葡糖的双糖重复单位所组成的多糖，广泛分布于软骨组织、关节液和皮肤组织的真皮以及表皮中，并在其中起到保湿、营养、修复和预防损伤等生理作用。透明质酸的生产方法有动物组织提取法和发酵法，由于动物组织提取法的制备成本高，分离纯化复杂，逐渐被发酵法所取代。
[0003]由于发酵方法简单，所需原料易得，成本相对较低，微生物发酵法生产透明质酸是当前生产透明质酸最主要的方式之一。目前可用于直接生产HA的微生物菌株主要分为链球菌属中的A类和C类，如酿脓链球菌和兽疫链球菌等。兽疫链球菌作为C类链球菌中的一员，由于其更低的致病性，更高的HA产率而常常受到青睐。然而，利用微生物发酵法生产HA也体现出许多局限。受宿主菌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种兽疫链球菌的基因工程菌株，其特征在于，携带外源的基因表达框，所述外源的基因表达框包括第一基因表达框和第二基因表达框，其中，所述第一基因表达框包括第一启动子和hasA基因，所述第一启动子和hasA基因可操作的连接；所述第二基因表达框包括第二启动子和hasB基因，所述第二启动子和hasB基因可操作的连接。2.根据权利要求1所述基因工程菌株，其特征在于，所述第一基因表达框和第二基因表达框设置于不同的构建体或同一构建体上；任选地，所述构建体包括选自pSET4、pSET4s、pEU308、pDL276至少之一；任选地，所述第一基因表达框和第二基因表达框设置于同一构建体上，所述第一基因表达框的3
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端与所述第二基因表达框的5
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端相连或所述第二基因表达框的3
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端与所述第一基因表达框的5
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端相连。3.根据权利要求2所述的基因工程菌株，其特征在于，所述构建体为游离型pSET4载体。4.根据权利要求1所述的基因工程菌株，其特征在于，所述第一启动子启动基因表达的强度弱于所述第二启动子启动基因表达的强度。5.根据权利要求1所述的基因工程菌株，其特征在于，所述第一启动子和第二启动子分别独立地选自PGAPDH、PacK、PABC或Pldh；优选地，所述第一启动子为PABC，所述第二启动子为Pldh。6.根据权利要求1所述的基因工程菌株，其特征在于，所述hasB基因的起始密码子为ATG。7.根据权利要求1所述的基因工程菌株，其特征在于，所述兽疫链球菌的保藏号为CCTCC NO:M ...

【专利技术属性】
技术研发人员：李凯峰，谭秀梅，鲍素敏，石江水，谢文平，徐宇骋，肖文龙，马雷磊，
申请(专利权)人：宜昌东阳光生化制药有限公司，
类型：发明
国别省市：