一种蔗糖异构酶突变体及其构建方法与应用及一种重组表达载体和重组菌技术

本发明专利技术涉及一种蔗糖异构酶突变体及其构建方法与应用及一种重组表达载体和重组菌，涉及酶工程技术领域。所述蔗糖异构酶突变体PdSIase

【技术实现步骤摘要】
一种蔗糖异构酶突变体及其构建方法与应用及一种重组表达载体和重组菌


[0001]本专利技术涉及酶工程
，尤其涉及一种蔗糖异构酶突变体及其构建方法与应用及一种重组表达载体和重组菌。

技术介绍

[0002]异麦芽酮糖是蔗糖优良的高附加值产品。它学名为6
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O
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a
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D
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吡喃葡糖基
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D
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果糖是蔗糖的1种同分异构体，其很多物理性质与蔗糖相似，具有甜度、易溶于水的特点。此外，异麦芽酮糖不易水解，被食用后，人体内葡萄糖和胰岛素浓度仍然维持在一定范围内，能够有效预防糖尿病，异麦芽酮糖具有低热量、低致龋齿性、热稳定性优越等优点。因此被看作糖尿病患者的理想食品。目前，工业上，通过蔗糖异构酶转化蔗糖生产异麦芽酮糖。此酶可以催化蔗糖异构化主要生成异麦芽酮糖和海藻酮糖，同时伴随着水解副产物葡萄糖和果糖的生成。酶法生产异麦芽酮糖已经工业化生产，不但延伸了蔗糖产业链，同样产品功能很大程度上克服蔗糖存在的缺点，是成功伸延蔗糖产业链的典范。
[000本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蔗糖异构酶突变体PdSIase
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QAF，其特征在于，所述PdSIase
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QAF的氨基酸如SEQ ID NO.1所示。2.一种编码权利要求1所述蔗糖异构酶突变体PdSIase
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QAF的核苷酸，其特征在于，所述核苷酸的序列如SEQ ID NO.2所示。3.一种权利要求1所述蔗糖异构酶突变体PdSIase
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QAF的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)以蔗糖异构酶PdSIase的核苷酸序列为模板，利用突变引物对所述的核苷酸序列进行突变，得到权利要求2所述的编码蔗糖异构酶突变体PdSIase
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QAF的核苷酸；(2)将权利要求2所述的编码蔗糖异构酶突变体PdSIase
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QAF的核苷酸进行翻译得到蔗糖异构酶突变体PdSIase
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QAF；所述突变的位点为编码蔗糖异构酶PdSIase第148位、第224位和第306位氨基酸的核苷酸位点。4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述蔗糖异构酶PdSIase的氨基酸如SEQ ID NO.3所示；编码所述蔗糖异构酶PdSIase的核苷酸如SEQ ID NO.4所示。5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，编码所述蔗糖异构酶PdSIase第148位氨基酸的核苷酸的突变引物如SEQ ID NO.5～6所示；编码所述蔗糖异构酶PdSIase第148位氨基酸的核苷酸的突变为：由编码精氨酸的核苷酸序列突变为编码谷氨酰胺的核苷酸序列。6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，编码所述蔗糖异...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘丽霞，吕建珍，阳丽艳，杨登峰，伍雅励，李红亮，李娟，
申请(专利权)人：广西中医药大学，
类型：发明
国别省市：