一种改变2,3-氧化鲨烯环化酶的活性或功能的方法技术

本发明专利技术涉及2,3

【技术实现步骤摘要】
一种改变2,3-氧化鲨烯环化酶的活性或功能的方法


[0001]本专利技术涉及2,3-氧化鲨烯环化酶的催化机制研究，具体涉及一种改变2,3-氧化鲨烯环化酶的活性或功能的方法。

技术介绍

[0002]三萜类化合物是天然产物中种类最多的一类，迄今为止，已经发现超过20,000种，主要分布在植物中，其中双子叶植物三萜化合物的分布较为丰富，动物和微生物中也有分布，如在海洋动物海参和海星中发现了三萜类化合物的存在，在真菌灵芝中发现150余种灵芝三萜，细菌中可以催化鲨烯(squalene)合成三萜何帕烯(hopene)。
[0003]2,3-氧化鲨烯环化酶(2,3-Oxidosqualene cyclase，OSC)是三萜类化合物合成途径中的关键酶，其催化的酶反应因反应的复杂性和产物的多样性被认为是最复杂的酶反应之一，催化的基本过程：(1)底物的结合和预折叠；(2)底物环氧基团质子化起始环化反应；(3)碳阳离子中间体的环化和重排；(4)去质子化或捕获一个水分子终止反应。底物的预折叠在反应过程中极为关键，它的构象决定了环化产物的合成途径，这对OSC产物本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种改变2,3-氧化鲨烯环化酶的活性或功能的方法，其特征在于：所述方法包括：将2,3-氧化鲨烯环化酶的氨基酸序列中与SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的第261位氨基酸相对应的氨基酸替换成其它氨基酸；所述2,3-氧化鲨烯环化酶的氨基酸序列中与SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的第257位氨基酸相对应的氨基酸为酪氨酸或苯丙氨酸。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述改变2,3-氧化鲨烯环化酶的活性或功能是指提高或降低所述2,3-氧化鲨烯环化酶的催化活性，或者改变所述2,3-氧化鲨烯环化酶的催化产物。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述其它氨基酸选自丙氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、精氨酸和色氨酸组成的组。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述2,3-氧化鲨烯环化酶来自植物。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述2,3-氧化鲨烯环化酶为来自水稻(Oryza sativa)的帕克醇合酶OsPS，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；或来自水稻(Oryza sativa)的籼稻醇合酶OsOS，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；或来自燕麦(Avena strigosa)的β-香树素合酶AsbAS1，其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示；或来自拟南芥(Arabidopsis thaliana)的β-香树素合酶AtLUP4，其氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示；或来自绿玉树(Euphorbia tirucalli)的β-香树素合酶EtAS，其氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示；或来自人参(Panax ginseng)的β-香树素合酶PgPNY1，其氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示；或来自油橄榄(Olea europaea)的α-香树素合酶OeOEA，其氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示；或来自百脉根(Lotus japonicus)的羽扇豆醇合酶LjOSC3，其氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示；或来自油橄榄(Olea europaea)的羽扇豆醇合酶OeOEW，其氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述2,3-氧化鲨烯环化酶为OsPS，所述方法包括：将SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的第261位的缬氨酸替换成丙氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸；或所述2,3-氧化鲨烯环化酶为OsOS，所述方法包括：将SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的第261位的缬氨酸替换成苯丙氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、精氨酸、色氨酸或酪氨酸；或所述2,3-氧化鲨烯环化酶为AsbAS1，所述方法包括：将SEQ ID NO:3所示氨基酸序列的第263位的异亮氨酸替换成苯丙氨酸、色氨酸或酪氨酸；或所述2,3-氧化鲨烯环化酶为AtLUP4，所述方法包括：将SEQ ID NO:4所示氨基酸序列的第264位的缬氨酸替换成苯丙氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛哲勇，郭妍宏，华欣，谭盛男，
申请(专利权)人：东北林业大学，
类型：发明
国别省市：