一种RhoC共价结合抑制剂制造技术

本发明专利技术涉及一种化合物，可作为直接靶向RhoC的共价结合抑制剂。本发明专利技术通过“点击化学”特异化学反应，合成具有蓝萼甲素原有活性及失活型两种化学小分子探针，并找到两个探针所结合的差异蛋白（即蓝萼甲素发挥生物功能的直接作用靶点）。利用生物信息学分析等方法筛选出关键靶标——RhoC，所述化合物通过Lys18氨基酸残基位点与RhoC共价结合，并在小鼠成纤维细胞NIH

【技术实现步骤摘要】
一种RhoC共价结合抑制剂


[0001]本专利技术属于医药生物
，具体地说，本专利技术涉及一种RhoC共价结合抑制剂。

技术介绍

[0002]Rho家族蛋白是一种单体G蛋白，已被确定为细胞内重要的调节因子，被报道参与多种生物过程，它们在各类疾病及相关信号通路中起到了至为关键的作用。在研究历程中，Rho
‑
GTPases作为Rho家族中的一个亚族，在多种细胞中高表达，是第一个被发现的GTP酶，其中包括RhoA、RhoB和RhoC，可影响细胞骨架的动态变化，在人类生物学过程中发挥重要作用。在体内，Rho蛋白在与无活性的二磷酸鸟苷(GDP)结合状态(Rho
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GDP)和有活性的鸟苷三磷酸(GTP)结合状态(Rho
‑
GTP)之间反复循环。当Rho与GTP结合时，Rho
‑
GTP会与其下游激酶、磷脂酶、肌动蛋白调节剂和衔接蛋白等发生相互作用，以发挥特定的生物学功能。
[0003]在心血管方面，RhoC被认为是内皮细胞中VEGF的下游调节剂，可促进血管生成(Wang W,Wu F,Fang F,et al.RhoC is essential for angiogenesis induced by hepatocellular carcinoma cells via regulation of endothelial cell organization[J].Cancer science,2008,99(10):2012
‑
2018)，其GTP活性可影响缺氧性肺血管收缩(Robertson T P,Dipp M,Ward J P T,et al.Inhibition of sustained hypoxic vasoconstriction by Y
‑
27632in isolated intrapulmonary arteries and perfused lung of the rat[J].British journal of pharmacology,2000,131(1):5
‑
9；Robertson T P,Aaronson P I,Ward J P.Hypoxic vasoconstriction and intracellular Ca2+in pulmonary arteries:evidence for PKC
‑
independent Ca2+sensitization[J].American Journal ofPhysiology
‑
Heart and Circulatory Physiology,1995,268(1):H301
‑
H307)。在神经系统中，当Rho
‑
GTPases活性被抑制，可阻止神经中枢细胞凋亡(Dubreuil C I,Winton M J,McKerracher L.Rho activation patterns after spinal cord injury and the role ofactivated Rho in apoptosis in the central nervous system[J].The Journal of cell biology,2003,162(2):233
‑
243)。此外，多篇文章报道Rho的活性与肾间质纤维化、糖尿病肾病、肾癌等疾病相关(柳飞,付平.RhoA/Rho相关卷曲螺旋形成的蛋白激酶信号通路与慢性肾脏疾病[J].华西医学,2011,26(5):781
‑
783；高辉,樊均明.Rho GTP酶/Rho激酶系统与肾间质纤维化[J].临床荟萃,2005,20(15):896
‑
898)。同时，Rho激酶信号通路参与了许多呼吸系统疾病的发生、发展过程，如慢性阻塞性肺疾病、支气管哮喘、肺高压、特发性肺纤维化、肺癌等(俞龙,解卫平.Rho激酶与呼吸系统疾病[J].国际呼吸杂志,2013,33(3):232
‑
234；孙兴珍,李军,王大为.Rho/Rho激酶信号通路与缺氧性肺动脉高压[J].国外医学:呼吸系统分册,2005,25(10):755
‑
758)。另有报道称Rho是一种可调节肌动蛋白细胞骨架的信号蛋白(Ridley A J.Rho family proteins:coordinating cell responses[J].Trends in cell biology,2001,11(12):471
‑
477)。因此，开发Rho蛋白靶向抑制剂具有十分重大的科研意义及应用价值。
[0004]但由于Rho
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GTPases对底物GDP和GTP具有极强的结合亲和力，且Rho
‑
GTPases中缺
乏理想的结合位点，很难找到靶向这一结合口袋的小分子抑制剂，Rho
‑
GTPases家族蛋白通常被认为是“不可药用”的靶点，这也成为靶向Rho
‑
GTPases家族蛋白药物开发进展缓慢的重要原因。
[0005]在现有的报道中，已有部分间接靶向Rho
‑
GTPases开发出的小分子抑制剂。如FTI
‑
277和GGTI
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298，该类分子的作用机制即需要Rho蛋白定位于质膜。或降脂类药物辛伐他汀，即通过抑制Rho蛋白的修饰来发挥生物活性。但上述小分子或药物抑制剂均不是直接靶向Rho蛋白。对于靶向Rho
‑
GTPases的小分子抑制剂，大多数正在研究中或已研发上市的抑制剂药物均通过靶向Rho和Rho
‑
GEF的作用位点，及其下游激酶底物和羧基末端的脂质修饰区域。已有报道找到直接靶向RhoA的小分子抑制剂DC
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Rhoins，该小分子通过与RhoA半胱氨酸残基Cys107结合，破坏Rho和Rho
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GEF或Rho
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GDI之间的相互作用，进而影响RhoA
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GTPase活性。然而，仍未有报道找到直接作用于RhoC的靶向抑制剂。

技术实现思路

[0006][0007]本专利技术的目的是提供一种RhoC抑制剂，是可作为直接靶向RhoC的共价结合抑制剂。
[0008]其名称为：蓝萼甲素，分子式为：C
20
H
28
O4，提纯自唇形科植物冬凌草Rabdosiarubescens。
[0009]本专利技术目的是寻找直接靶向RhoC的小分子抑制剂药物。因RhoC在心血管系统、泌尿生殖系统、神经系统、呼吸系统等疾病中都发挥着重要作用，本专利技术可用于RhoC活性异常的各类疾病的救治。
[0010]本专利技术发现上述式(Ⅰ)结构直接靶向RhoC，与RhoC发生共价结合，特异影响Rho本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.蓝萼甲素作为RhoC共价结合抑制剂的用途。2.一种具有抑制RhoC功能的药物，其活性成分...

【专利技术属性】
技术研发人员：张琪，姜修博，
申请(专利权)人：南京基树医药科技有限公司，
类型：发明
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