赤水金钗石斛花成分含量测定方法技术

本发明专利技术公开了一种赤水金钗石斛花成分含量测定方法，包括以下步骤：S1.对照品溶液的制备：分别精密称取甘草苷、山柰酚

【技术实现步骤摘要】
赤水金钗石斛花成分含量测定方法


[0001]本专利技术涉及药学
，具体为赤水金钗石斛花成分含量测定方法。

技术介绍

[0002]金钗石斛为兰科石斛属石斛（Dendrobium nobile Lindl.）的新鲜或干燥茎，是2020版中国药典石斛收载的3个主要品种之一。《神农本草经》有记载“金钗石斛主治伤中，除痹，下气，补五脏虚劳赢瘦，强阴。久服厚肠胃。轻身延年。”认为其有益胃生津、滋阴清热等功效。
[0003]金钗石斛在我国主要分布于贵州、四川、云南、广西、海南和台湾等地，以贵州赤水所产为最佳，为“道地药材”。中国药材种植资源普查结果显示，国内现阶段只有贵州赤水符合金钗石斛的野外种植条件，也是我国金钗石斛的主产区。
[0004]目前，金钗石斛的主要应用部位是茎，而对于花等部位的开发不够，大量资源被闲置浪费，阻碍了金钗石斛产业发展。民间金钗石斛花现多被用作茶饮，且已被列为贵州食品地方标准，DBS52/049
‑
2021、DBS52/050
‑
2021。其标准包括了性状、感官要求、污染物限量及水分、灰色等理化检测，同时规定其所含石斛碱含量不得低于0.4%。然而目前对金钗石斛花所含具体化学成分的研究较少，质量控制方法目前也仅有一篇指纹图谱的专利，其仅指认出D
‑
无水葡萄糖这一种成分，特征性不强，尚不全面，有深入研究的必要。因此本专利技术将开发建立简便易行，准确度高，重复性良好且尽可能多地反映赤水金钗石斛花所含多种化学成分的检测方法。
专利技术内容
[0005]本专利技术的目的在于克服上述
技术介绍
困难，提供赤水金钗石斛花成分含量测定方法。
[0006]本专利技术所述的三种化学成分为：甘草苷、山柰酚
‑3‑
葡萄糖鼠李糖苷、异槲皮苷。
[0007]为达到上述目的，采用的技术方案为：本专利技术赤水金钗石斛花成分含量测定方法，包括以下步骤：S1.对照品溶液的制备：分别精密称取甘草苷、山柰酚
‑3‑
葡萄糖鼠李糖苷、异槲皮苷标准品，溶解于溶剂中，得到混合对照品溶液；S2.赤水金钗石斛花供试品溶液的制备：准确称取干燥的金钗石斛花于锥形瓶中，加入适量 70%甲醇，称重，摇匀，超声处理，冷却至室温后再称重，用70%甲醇补足损失的质量，摇匀，过滤，取续滤液，得到供试品溶液；S3.含量测定：采用高效液相色谱法，在相同的检测条件下分别测得对照品溶液和供试品溶液的色谱图；根据对照品溶液的浓度、对照品溶液在色谱图中的峰面积以及供试品溶液中与对
照品溶液相对应成分在色谱图中的峰面积，计算赤水金钗石斛花供试品溶液中与对照品溶液相对应成分的含量。
[0008]进一步的，所述步骤S1中，取各标准品适量，精密称定，分别置于5 mL容量瓶中，用70%甲醇定容至刻度，超声振荡、摇匀，配置成含有甘草苷0.042 mg/mL、山柰酚
‑3‑
葡萄糖鼠李糖苷0.132 mg/mL、异槲皮苷0.040 mg/mL的混合对照品溶液。
[0009]进一步的，所述步骤S2中，准确称取干燥的金钗石斛花0.5 g于锥形瓶中，加入35 mL 70%甲醇，称重，摇匀，超声60 min（45 kHz，90%），冷却至室温后再称重，用70%甲醇补足损失的质量，摇匀，过滤，取续滤液，得到供试品溶液。
[0010]进一步的，步骤S3中，所述检测条件包括：色谱柱Agilent Eclipse Plus C18（4.6 mm
×
150 mm，5μm）；流速1.0 mL/min；检测波长为280 nm；柱温30℃；以0.06%醋酸
‑
水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱。
[0011]进一步的，所述步骤S3中，所述梯度洗脱过程中，流动相A和流动相B的变化为：按照体积分数计，0~4 min，95%A
→
87.5A；4~14 min，87.5%A
→
83%A；14~21 min，83%A
→
73%A；21~25 min，73%A
→
0%A。
[0012]测定方法：吸取混合对照品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪中，得到色谱图，根据色谱图计算供试品中化学成分的含量；色谱条件：色谱柱Agilent Eclipse Plus C
18
（4.6 mm
×
150 mm，5 μm）；流速1.0 mL/min；柱温30℃；以0.06%醋酸
‑
水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱。
[0013]梯度洗脱过程如下：检测波长为280 nm。
[0014]进一步的，所述步骤S3中，所述含量测定，精密量取步骤S1中配置成的混合对照品溶液1、2、5、10、15、20 μL 注入高效液相色谱仪，测定；以进样量为横坐标（X），峰面积积分值为纵坐标（Y），绘制标准曲线，计算各混合对照品的回归方程、线性范围和回归系数。
[0015]进一步的，所述步骤S3中，所述含量测定仪器精密度试验，取步骤S1中配置成的混合对照品溶液，在色谱条件下连续进样6次，测得3个对照品峰面积，分别计算保留时间和峰面积的RSD值。
[0016]进一步的，所述步骤S3中，所述含量测定重复性试验，取同一赤水金钗石斛花样品6份，制备供试品溶液，在相同色谱条件下进样，分别计算保留时间和峰面积的RSD值。
[0017]进一步的，所述步骤S3中，所述含量测定稳定性试验，取同一赤水金钗石斛花样品，按照步骤S2中方法制备得到供试品溶液，在相同色谱条件下，分别于0、4、8、12、16、20、
24小时进样，测得3个对照品峰面积，分别计算保留时间和峰面积的RSD值。
[0018]进一步的，所述步骤S3中，所述含量测定加样回收率试验,精密称定已知含有量的同一样品粉末0.25 g，共9份，分别按1: 0.8、1:1、1:1.2 的比例精密加入混合对照品溶液，按照步骤S2中供试品溶液制备方法制备供试品溶液，分别在色谱条件下测定3次，记录各成分的峰面积，计算回收率。
[0019]本专利技术的有益效果：本专利技术建立的高效液相色谱测定赤水金钗石斛花中3种化学成分的含量方法，符合方法学验证的要求，且操作简便，灵敏度高，测定准确，适用性强，能够用于对该产品的质量控制。可以更全面的反映产品的质量状况，保证该产品的质量稳定性。
附图说明
[0020]图1、赤水金钗石斛花样品溶液色谱图。
[0021]图2、混合对照品溶液色谱图。
[0022]图中，1、甘草苷；2、山柰酚
‑3‑
葡萄糖鼠李糖苷；3、异槲皮苷。
具体实施方式
[0023]下面结合本专利技术的具体实施例，对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述。所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部。基于本专利技术中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.赤水金钗石斛花成分含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.对照品溶液的制备：分别精密称取甘草苷、山柰酚
‑3‑
葡萄糖鼠李糖苷、异槲皮苷标准品，溶解于溶剂中，得到混合对照品溶液；S2.赤水金钗石斛花供试品溶液的制备：准确称取干燥的金钗石斛花于锥形瓶中，加入适量 70%甲醇，称重，摇匀，超声处理，冷却至室温后再称重，用70%甲醇补足损失的质量，摇匀，过滤，取续滤液，得到供试品溶液；S3.含量测定：采用高效液相色谱法，在相同的检测条件下分别测得对照品溶液和供试品溶液的色谱图；根据对照品溶液的浓度、对照品溶液在色谱图中的峰面积以及供试品溶液中与对照品溶液相对应成分在色谱图中的峰面积，计算赤水金钗石斛花供试品溶液中与对照品溶液相对应成分的含量。2.根据权利要求1所述的赤水金钗石斛花成分含量测定方法，其特征在于，步骤S1中，取各标准品适量，精密称定，分别置于5 mL容量瓶中，用70%甲醇定容至刻度，超声振荡、摇匀，配置成含有甘草苷0.042 mg/mL、山柰酚
‑3‑
葡萄糖鼠李糖苷0.132 mg/mL、异槲皮苷0.040 mg/mL的混合对照品溶液。3.根据权利要求1所述的赤水金钗石斛花成分含量测定方法，其特征在于，步骤S2中，准确称取干燥的金钗石斛花0.5 g于锥形瓶中，加入35 mL 70%甲醇，称重，摇匀，超声60 min（45 kHz，90%），冷却至室温后再称重，用70%甲醇补足损失的质量，摇匀，过滤，取续滤液，得到供试品溶液。4.根据权利要求1所述的赤水金钗石斛花成分含量测定方法，其特征在于，步骤S3中，所述检测条件包括：色谱柱Agilent Eclipse Plus C
18
（4.6 mm
×
150 mm，5μm）；流速1.0 mL/min；检测波长为280 nm；柱温30℃；以0.06%醋酸
‑
水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱。5.根据权利要求1所述的赤水金钗石斛花成分含量测定方...

【专利技术属性】
技术研发人员：段灿灿，田鑫，张建永，李尧，冯文忠，
申请(专利权)人：遵义医科大学，
类型：发明
国别省市：