检测氯酮含量的液相色谱分析方法技术

本发明专利技术公开了一种氯酮(1－氯乙基－4－异丁苯酮)的液相色谱分析方法，包括S1、配置待测样品溶液步骤，S2、色谱检测待测样品溶液步骤，S3、配置等差为第一浓度梯度A的标准液步骤，S4、绘制第一标准曲线步骤，S5、优化配置等差为第二浓度梯度B的标准液步骤，S6、优化第一标准曲线为第二标准曲线步骤，S7、计算第二标准曲线表达公式步骤以及S8、获得待测样品中氯酮的含量步骤。本发明专利技术方法针对检测氯酮含量优化了获取绘制的标准曲线的曲率峰值位置的曲线，进而基于优化后的曲线获取准确的表达公式，从而能够获取曲线形标准曲线对应的表达公式，基于所述表达公式求解待测样品对应浓度值位置的氯酮含量，能够快速判断同类产品的杂质是否符合标准。合标准。合标准。

【技术实现步骤摘要】
检测氯酮含量的液相色谱分析方法


[0001]本专利技术涉及制药
，尤其涉及一种检测氯酮含量的液相色谱分析方法。

技术介绍

[0002]布洛芬作为一种有效的非甾体消炎镇痛药，其生产工艺目前国内普遍采用的是芳基1,2
‑
转位重排法，该法以异丁苯为原料，经与2
‑
氯丙酰氯的付克酰化、与新戊二醇的催化缩酮化、催化重排、水解、酸化等步骤制得。该工艺的缩酮化过程，以氯酮、新戊二醇为原料，稀硫酸作催化剂，石油醚为溶剂，而国际上业内公认缩酮化反应是生产布洛芬的核心控制步骤，其中氯酮(1－氯乙基－4－异丁苯酮)是该方法中的中间体，简称氯酮，氯酮作为氯代物，为疑似基因毒杂质，其残留需要在布洛芬成品中严格控制。
[0003]目前，针对氯酮含量的测定，绝大部分文献中使用液相色谱面积归一化方法，色谱柱条件并不清晰，实际生产中产品杂质比较复杂，各组分之间在液相色谱中响应因子差距较大，因此简单用面积归一化法不能准确测定氯酮的含量，对生产工艺影响比较大。
[0004]针对制备布洛芬成品时产生的疑似基因毒杂质残留的检测，专利CN112433016A提供了一种检测重排酯含量的液相色谱分析方法，这种方法十分适用于检测重排酯含量，也能测定氯酮的含量，但是检测重排酯含量时在色谱条件进行色谱分析测定后，以浓度梯度中每个浓度所测的样品峰面积的大小与标样重量的对应关系绘制标准曲线形成的是直线形式，而针对测定氯酮的含量时按照直线形式找不出对应的标准曲线的表达公式，因此无法合理判断对应各个浓度范围下的氯酮含量。因此需要进一步针对液相色谱分析方法提出获取浓度梯度中每个浓度所测的样品峰面积的大小与标样重量的对应关系绘制标准曲线的表达公式，便于快速判断同类产品的杂质是否符合标准。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于，提供一种快速、高效、准确的氯酮的分析方法，用以解决目前检测氯酮含量使用液相色谱分析方法时获取无法获取绘制的标准曲线的表达公式，导致无法合理判断对应各个浓度范围下的氯酮含量的技术问题。
[0006]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供一种检测氯酮含量的液相色谱分析方法，其包括步骤：
[0007]S1、配置待测样品溶液步骤，将含有氯酮的待测样品加入流动相溶解，配置成待测样品溶液；
[0008]S2、色谱检测待测样品溶液步骤，将所述待测样品溶液注入液相色谱仪中，进行色谱检测，以保留时间定性，测得氯酮的含量；
[0009]S3、配置等差为第一浓度梯度A的标准液步骤，取氯酮标准品，按等差为第一浓度梯度A依次增加或减少重量的顺序分为多份，用流动相容摇匀调制为等差为第一浓度梯度A的多份不同浓度梯度的标准液；
[0010]S4、绘制第一标准曲线步骤，分别取一定量的等差为第一浓度梯度A的标准液注入
液相色谱仪中，根据色谱图取所述氯酮标准品的峰面积的值为纵坐标，取所述氯酮标准品的重量为横坐标，制成第一标准曲线；
[0011]S5、优化配置等差为第二浓度梯度B的标准液步骤，在所述第一标准曲线上沿横坐标获取每一点的曲率，获取至少一曲率峰值，在沿横坐标上各个曲率峰值
±
A/2范围内细化配置等差为第二浓度梯度B的标准液，取氯酮标准品，按等差为第二浓度梯度B依次增加或减少重量的顺序分为多份，用流动相容摇匀调制为多份不同浓度梯度的标准液；其中B≤A/4；
[0012]S6、优化第一标准曲线为第二标准曲线步骤，分别取一定量的等差为第二浓度梯度B的标准液注入液相色谱仪中，根据色谱图取所述氯酮标准品的峰面积的值为纵坐标，取所述氯酮标准品的重量为横坐标，在所述第一标准曲线上补充制成第二标准曲线；
[0013]S7、计算第二标准曲线表达公式步骤，基于所述第二标准曲线获取对应的表达公式；以及
[0014]S8、获得待测样品中氯酮的含量步骤，基于所述表达公式求解待测样品对应浓度值位置的氯酮含量。
[0015]进一步地，在所述计算第二标准曲线表达公式步骤S7中，在所述第二标准曲线上沿横坐标获取每一点的曲率，重新获取至少一曲率峰值，按照重新获取的曲率峰值的数量N将所述第二标准曲线划分为N
‑
1段曲线，分N
‑
1段获取对应的表达公式并拟合获取第二标准曲线的表达公式；其中第一段曲线对应的横坐标范围为0至第一个曲率峰值，第N
‑
1段曲线对应的横坐标范围为第N
‑
1个曲率峰值至横坐标最大值点，位于中间的曲线对应的横坐标范围为相邻的两个曲率峰值。
[0016]进一步地，当所述第二标准曲线上曲率峰值的数量N为1时，若所述第二标准曲线上沿横坐标获取每一点的曲率均为恒定值，此时所述曲率峰值为0，则对应的所述第二标准曲线为直线形；若所述曲率峰值不为0，则对应的所述第二标准曲线为曲线形。
[0017]进一步地，所述待测样品溶液中的所述待测样品的浓度为(1
‑
300)mg/L。
[0018]进一步地，所述流动相包括第一原料以及第二原料，所述第一原料与所述第二原料的比例为4:1
‑
3:1；所述第一原料为乙腈或者甲醇，所述第二原料为1％磷酸或醋酸水溶液。
[0019]进一步地，所述配置成待测样品溶液步骤S1具体包括：取待测样品0.1g
‑
2.0g，置于100mL容量瓶中，用流动相定容摇匀配置成所述待测样品溶液，当待测液浓度大于300mg/L时，需要二次稀释，将待测液浓度，稀释至300mg/L内，并记录稀释倍数。
[0020]进一步地，所述配置等差为第一浓度梯度A的标准液步骤S3具体包括：分别称取氯酮标准品0.0005g，0.0010g，0.0020g，0.0040g，0.0080g，0.0150g，0.0200g，0.0250g，0.0300g置于100mL容量瓶中，用流动相定容摇匀配置成多份不同浓度梯度的所述标准液。
[0021]进一步地，所述液相色谱仪的色谱条件为：
[0022]a)流动相：第一原料：乙腈或者甲醇；第二原料:1％磷酸或醋酸水溶液；
[0023]b)流动相比例第一原料:第二原料＝80:20；
[0024]c)进样体积：20.0μL；
[0025]d)柱温箱：30℃；
[0026]e)流速：1mL/min；
[0027]f)检测种类：紫外检测器；
[0028]g)检测波长：222nm；
[0029]h)色谱柱：250mm
×
4.6mm
×
2.6μm。
[0030]进一步地，所述液相色谱仪为紫外检测器。
[0031]进一步地，所述液相色谱仪包括色谱柱，所述色谱柱为C18液相色谱柱，其规格为250mm
×
4.6mm
×
2.6μm。
[0032]本专利技术的有益效果在于，提供了一种采用液相色谱法定量分析氯酮方法，该方法使用液相色谱仪，并且选择了C18，250本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测氯酮含量的液相色谱分析方法，其特征在于，包括步骤：S1、配置待测样品溶液步骤，将含有氯酮的待测样品加入流动相溶解，配置成待测样品溶液；S2、色谱检测待测样品溶液步骤，将所述待测样品溶液注入液相色谱仪中，进行色谱检测，以保留时间定性，测得氯酮的含量；S3、配置等差为第一浓度梯度A的标准液步骤，取氯酮标准品，按等差为第一浓度梯度A依次增加或减少重量的顺序分为多份，用流动相容摇匀调制为等差为第一浓度梯度A的多份不同浓度梯度的标准液；S4、绘制第一标准曲线步骤，分别取一定量的等差为第一浓度梯度A的标准液注入液相色谱仪中，根据色谱图取所述氯酮标准品的峰面积的值为纵坐标，取所述氯酮标准品的重量为横坐标，制成第一标准曲线；S5、优化配置等差为第二浓度梯度B的标准液步骤，在所述第一标准曲线上沿横坐标获取每一点的曲率，获取至少一曲率峰值，在沿横坐标上各个曲率峰值
±
A/2范围内细化配置等差为第二浓度梯度B的标准液，取氯酮标准品，按等差为第二浓度梯度B依次增加或减少重量的顺序分为多份，用流动相容摇匀调制为多份不同浓度梯度的标准液；其中B≤A/4；S6、优化第一标准曲线为第二标准曲线步骤，分别取一定量的等差为第二浓度梯度B的标准液注入液相色谱仪中，根据色谱图取所述氯酮标准品的峰面积的值为纵坐标，取所述氯酮标准品的重量为横坐标，在所述第一标准曲线上补充制成第二标准曲线；S7、计算第二标准曲线表达公式步骤，基于所述第二标准曲线获取对应的表达公式；以及S8、获得待测样品中氯酮的含量步骤，基于所述表达公式求解待测样品对应浓度值位置的氯酮含量。2.根据权利要求1所述的检测氯酮含量的液相色谱分析方法，其特征在于，在所述计算第二标准曲线表达公式步骤S7中，在所述第二标准曲线上沿横坐标获取每一点的曲率，重新获取至少一曲率峰值，按照重新获取的曲率峰值的数量N将所述第二标准曲线划分为N
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1段曲线，分N
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1段获取对应的表达公式并拟合获取第二标准曲线的表达公式；其中第一段曲线对应的横坐标范围为0至第一个曲率峰值，第N
‑
1段曲线对应的横坐标范围为第N
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1个曲率峰值至横坐标最大值点，位于中间的曲线对应的横坐标范围为相邻的两个曲率峰值。3.根据权利要求2所述的检测氯酮含量的液相色谱分析方法，其特征在于，当所述第二标准曲线上曲率峰值的数量N为1时，若所述第二标...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜德平，周波，岳金彩，徐文辉，寇祖星，夏丙堃，贾建波，于鹏，孙科，
申请(专利权)人：青岛科技大学青岛银科恒远化工过程信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：