使用腺苷脱氨酶碱基编辑器编辑疾病相关基因的方法，包括遗传性疾病的治疗技术

本发明专利技术提供包括新颖可编程的腺苷碱基编辑器系统(例如，ABE8)的组合物，其提供通过向受试者给药具有提高的效率的可编程的腺苷碱基编辑器系统(例如，ABE8)来治疗受试者的疾病或病症(例如，帕金森氏病、贺勒氏症、蕾特氏症或斯塔加特氏病)的方法及使用这些腺苷脱氨酶变体编辑疾病相关基因的方法。变体编辑疾病相关基因的方法。变体编辑疾病相关基因的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用腺苷脱氨酶碱基编辑器编辑疾病相关基因的方法，包括遗传性疾病的治疗
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请请求保护于2019年2月13日提交的美国临时申请第62/805,271号；2019年5月23日提交的美国临时申请第62/852,228号；2019年5月23日提交的美国临时申请第62/852,224号；2019年7月11日提交的美国临时申请第62/873,138号；2019年8月19日提交的美国临时申请第62/888,867号；2019年11月6日提交的美国临时申请第62/931,722号；2019年11月27日提交的美国临时申请第62/941,569号；2020年1月27日提交的美国临时申请第62/966,526号的权益，其公开内容特此通过引用方式整体并入本文。
[0003]通过引用方式并入
[0004]本说明书中提及的所有出版物、专利和专利申请均以引用方式并入本文，其程度就如同每个单独的出版物、专利或专利申请被具体地和单独地指示为以引用方式并入一样。除非另有说明，本说明书中提及的出版物、专利和专利申请通过引用方式整体并入本文。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种治疗受试者的神经系统失调的方法，所述方法包括：向受试者给药(i)腺苷碱基编辑器或编码所述腺苷碱基编辑器的核酸序列和(ii)向导多核苷酸或编码所述向导多核苷酸的核酸序列，其中所述腺苷碱基编辑器包括可编程的DNA结合结构域和腺苷脱氨酶结构域，其中所述腺苷脱氨酶结构域包括在SEQ ID NO：2中编号为氨基酸位置82或166或其相应位置的氨基酸取代，以及其中所述向导多核苷酸引导所述腺苷碱基编辑器在与所述受试者的所述神经系统失调相关的目标基因或其调控组件中实现A至G核碱基改变，从而治疗所述受试者的所述神经系统失调。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述目标基因是α
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L
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艾杜糖醛酸酶(IDUA)基因，并且所述神经系统疾病是贺勒氏症。3.一种治疗受试者的贺勒氏症的方法，所述方法包括向所述受试者给药(i)腺苷碱基编辑器或编码所述腺苷碱基编辑器的核酸序列和(ii)向导多核苷酸或编码所述向导多核苷酸的核酸序列，其中所述腺苷碱基编辑器包括可编程的DNA结合结构域和腺苷脱氨酶结构域，其中所述腺苷脱氨酶结构域包括在SEQ ID NO：2中编号为氨基酸位置82或166或其相应位置的氨基酸取代，以及其中所述向导多核苷酸引导所述腺苷碱基编辑器在所述受试者的α
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L
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艾杜糖醛酸酶(IDUA)基因或其调控组件中实现A至G核碱基改变，从而治疗所述受试者的贺勒氏症。4.根据权利要求2或3所述的方法，其中所述给药改善与贺勒氏症相关的至少一种症状。5.根据权利要求4所述的方法，其中相较于以所述腺苷脱氨酶中没有所述氨基酸取代的碱基编辑器的治疗，所述给药导致与贺勒氏症相关的至少一种症状的更快改善。6.根据权利要求2至5中任一项所述的方法，其中所述IDUA基因或其调控组件包括与贺勒氏症相关的SNP。7.根据权利要求2至6中任一项所述的方法，其中所述A至G核碱基改变在与贺勒氏症相关的SNP处。8.根据权利要求6或7所述的方法，其中所述与贺勒氏症相关的SNP导致由所述IDUA基因所编码的在SEQ ID NO：4中编号为IDUA多肽或其变体中的W402X或W401X氨基酸突变，其中X是终止密码子。9.根据权利要求6至8中任一项所述的方法，其中所述A至G核碱基改变将所述与贺勒氏症相关的SNP改变为野生型核碱基。10.根据权利要求6至8中任一项所述方法，其中所述A至G核碱基改变将所述与贺勒氏症相关的SNP改变为非野生型核碱基，其导致贺勒氏症的一种或多种改善的症状。11.根据权利要求6至10中任一项所述的方法，其中所述与贺勒氏症相关的SNP处的A至G改变将所述IDUA基因所编码的IDUA多肽中的终止密码子改变为色氨酸。12.根据权利要求6至10中任一项所述的方法，其中所述向导多核苷酸包括与包括与所述贺勒氏症相关的SNP的IDUA基因或其调控组件互补的核酸序列。13.根据权利要求6至12中任一项所述的方法，其中所述腺苷碱基编辑器与单个向导
RNA(sgRNA)形成复合物，所述单个向导RNA(sgRNA)包括与包括与所述贺勒氏症相关的SNP的IDUA基因或其调控组件互补的核酸序列。14.根据权利要求13所述的方法，其中所述sgRNA包括选自由以下所组成的群组的核酸序列：5'
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GACUCUAGGCAGAGGUCUCAA
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3'、5'
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ACUCUAGGCAGAGGUCUCAA
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3'、5'
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CUCUAGGCGAAGUGUCGC
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3'及5'
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GCUCUAGGCCGAAGUGUCGC
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3'。15.根据权利要求1所述的方法，其中所述目标基因是富含亮氨酸的重复激酶2(LRRK2)基因，并且所述神经系统疾病是帕金森氏病。16.一种治疗受试者的帕金森氏病的方法，所述方法包括：向所述受试者给药(i)腺苷碱基编辑器或编码所述腺苷碱基编辑器的核酸序列和(ii)向导多核苷酸或编码所述向导多核苷酸的核酸序列，其中所述腺苷碱基编辑器包括可编程的DNA结合结构域和腺苷脱氨酶结构域，其中所述腺苷脱氨酶结构域包括在SEQ ID NO：2中编号为氨基酸位置82或166或其相应位置的氨基酸取代，以及其中所述向导多核苷酸引导所述腺苷碱基编辑器在所述受试者中影响富含亮氨酸的重复激酶
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2(LRRK2)基因或其调控组件实现A至G核碱基改变，从而治疗受试者的帕金森氏病。17.根据权利要求1、15或16中任一项所述的方法，其中所述给药改善与帕金森氏病相关的至少一种症状。18.根据权利要求17所述的方法，其中相较于以所述腺苷脱氨酶中没有所述氨基酸取代的碱基编辑器的治疗，所述给药导致与帕金森氏病相关的至少一种症状的更快改善。19.根据权利要求15至18中任一项所述的方法，其中所述LRRK2基因或其调控组件包括与帕金森氏病相关的SNP。20.根据权利要求19所述的方法，其中所述A至G核碱基改变在与帕金森氏病相关的SNP处。21.根据权利要求19或20所述的方法，其中所述与帕金森氏病相关的SNP导致由所述LRRK2基因所编码的在SEQ ID NO：3中编号为LRRK2多肽或其变体中的A419V、R1441C、R1441H或G2019S氨基酸突变。22.根据权利要求19至21中任一项所述的方法，其中所述A至G核碱基改变将所述与帕金森氏病相关的SNP改变为野生型核碱基。23.根据权利要求19至21中任一项所述的方法，其中所述A至G核碱基改变将与所述帕金森氏病相关的SNP改变为非野生型核碱基，其导致帕金森氏病的一种或多种改善的症状。24.根据权利要求19至22中任一项所述方法，其中所述A至G核碱基改变将由所述LRRK2基因所编码的LRRK2多肽中的半胱氨酸或组氨酸改变为精氨酸。25.根据权利要求19至22中任一项所述的方法，其中所述A至G改变将由所述LRRK2基因所编码的LRRK2多肽中的丝氨酸改变为甘氨酸。26.根据权利要求19至22中任一项所述的方法，其中所述A至G改变在由所述LRRK2基因所编码的在SEQ ID NO:3中编号为LRRK2多肽或其变体的位置144用精氨酸(R)置换半胱氨酸(C)或组氨酸(H)或在位置2019用甘氨酸(G)替换丝氨酸。27.一种治疗受试者的帕金森氏病的方法，所述方法包括：向受试者给药(i)腺苷碱基
编辑器或编码所述腺苷碱基编辑器的核酸序列和(ii)向导多核苷酸或编码所述向导多核苷酸的核酸序列，其中所述腺苷碱基编辑器包括可编程的DNA结合结构域和腺苷脱氨酶结构域，以及其中所述向导多核苷酸引导所述腺苷碱基编辑器实现在与帕金森氏病相关的LRRK2基因的SNP处的A至G核碱基改变，其中所述SNP不编码在SEQ ID NO：3中编号为LRRK2多肽或其变体中的G2019S突变。28.根据权利要求27所述的方法，其中所述腺苷脱氨酶结构域包括在SEQ ID NO：2中编号为氨基酸位置82或166或其相应位置的氨基酸取代。29.根据权利要求15至28中任一项所述的方法，其中所述向导多核苷酸包括与包括与所述帕金森氏病相关的SNP的LRRK2基因或其调控组件互补的核酸序列。30.根据权利要求15至28中任一项所述的方法，其中所述腺苷碱基编辑器与单个向导RNA(sgRNA)形成复合物，所述单个向导RNA(sgRNA)包括与包括与帕金森氏病相关的SNP的LRRK2基因或其调控组件互补的核酸序列。31.根据权利要求30所述的方法，其中所述sgRNA包括核酸序列：5'
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AAGCGCAAGCCUGGAGGGAA
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3'；或5'
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ACUACAGCAUUGCUCAGUAC
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3'。32.根据权利要求1所述的方法，其中所述目标基因是甲基CpG结合蛋白2(MECP2)基因，并且所述神经系统疾病是蕾特氏症。33.一种治疗受试者的蕾特氏症的方法，所述方法包括向受试者给药(i)腺苷碱基编辑器或编码所述腺苷碱基编辑器的核酸序列和(ii)向导多核苷酸或编码所述向导多核苷酸的核酸序列，其中所述腺苷碱基编辑器包括可编程的DNA结合结构域和所述腺苷脱氨酶结构域，其中所述腺苷脱氨酶结构域包括在SEQ ID NO：2中编号为氨基酸位置82或166或其相应位置的氨基酸取代，以及其中所述向导多核苷酸引导所述腺苷碱基编辑器在所述受试者中实现甲基CpG结合蛋白2(MECP2)基因或其调控组件中的A至G核碱基改变，从而治疗所述受试者的蕾特氏症。34.根据权利要求32或33所述的方法，其中所述给药改善与根据蕾特氏症相关的至少一种症状。35.根据权利要求34所述的方法，其中相较于以所述腺苷脱氨酶中没有所述氨基酸取代的碱基编辑器的治疗，所述给药导致与蕾特氏症相关的至少一种症状的更快改善。36.根据权利要求32至35中任一项所述方法，其中所述MECP2基因或其调控组件包括与蕾特氏症相关的SNP。37.根据权利要求36所述的方法，其中所述A至G核碱基改变在与所述蕾特氏症相关的SNP处。38.根据权利要求36或37所述的方法，其中所述与蕾特氏症相关的SNP导致由所述MECP2基因所编码的在SEQ ID NO：5中编号为MECP2多肽或其变体中的R106W或T158M氨基酸突变。39.根据权利要求36或37所述的方法，其中所述与蕾特氏症相关的SNP导致由所述MECP2基因所编码的MECP2多肽中的R255X或R270X氨基酸突变，其中X是终止密码子。40.根据权利要求36至39中任一项所述的方法，其中所述A至G核碱基改变将所述与蕾
特氏症相关的SNP改变为野生型核碱基。41.根据权利要求36至39中任一项所述的方法，其中所述A至G核碱基改变将所述与蕾特氏症相关的SNP改变为非野生型核碱基，其导致改善的蕾特氏症症状。42.根据权利要求36至39中任一项所述的方法，其中所述与蕾特氏症相关的SNP处的A至G核碱基改变将MECP2多肽中的终止密码子改变为色氨酸。43.根据权利要求36至42中任一项所述的方法，其中所述向导多核苷酸包括与包括与蕾特氏症相关的SNP的MECP2基因或其调控组件互补的核酸序列。44.根据权利要求36至42中任一项所述的方法，其中所述腺苷碱基编辑器与单个向导RNA(sgRNA)形成复合物，所述单个向导RNA(sgRNA)包括与包括与蕾特氏症相关的SNP的MECP2基因或其调控组件互补的核酸序列。45.根据权利要求44所述的方法，其中所述向导多核苷酸包括选自由以下所组成的群组的核酸序列：5'
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CUUUUCACUUCCUGCCGGGG
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3'、5'
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AGCUUCCAUGUCCAGCCUUC
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3'、5'
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ACCAUGAAGUCAAAAUCAUU
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3'及5'
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GCUUUCAGCCCCGUUUCUUG
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3'。46.根据权利要求1所述的方法，其中所述目标基因是ATP结合盒亚家族成员4(ABCA4)基因，并且所述神经系统疾病是斯塔加特氏病。47.一种治疗受试者的斯塔加特氏病的方法，所述方法包括向受试者给药(i)腺苷碱基编辑器或编码所述腺苷碱基编辑器的核酸序列和(ii)向导多核苷酸或编码所述向导多核苷酸的核酸序列，其中所述腺苷碱基编辑器包括可编程的DNA结合结构域和腺苷脱氨酶结构域，其中腺苷脱氨酶结构域包括在SEQ ID NO：2中编号为氨基酸位置82或166或其相应位置的氨基酸取代，以及其中所述向导多核苷酸引导所述腺苷碱基编辑器在所述受试者中实现ATP结合盒亚家族成员4(ABCA4)基因或其调控组件中的A至G核碱基改变，从而治疗所述受试者中的斯塔加特氏病。48.如权利要求46或47所述的方法，其中所述给药改善至少一种与斯塔加特氏病相关的症状。49.根据权利要求48所述的方法，其中相较于以所述腺苷脱氨酶中没有所述氨基酸取代的碱基编辑器的治疗，所述给药导致与斯塔加特氏病相关的至少一种症状的更快改善。50.根据权利要求46至49中任一项所述的方法，其中所述ABCA4基因包括与斯塔加特氏病相关的SNP。51.根据权利要求50所述的方法，其中所述A至G核碱基改变在与斯塔加特氏病相关的SNP处。52.根据权利要求50或51所述的方法，其中所述与斯塔加特氏病相关的SNP导致由所述ABCA4基因所编码的在SEQ ID NO：6中编号为ABCA4多肽或其变体中的A1038V或G1961E氨基酸突变。53.根据权利要求52所述的方法，其中所述与斯塔加特氏病相关的SNP导致在SEQ ID NO：6中编号为ABCA4多肽或其变体中的G1961E氨基酸突变。54.根据权利要求51至53中任一项所述的方法，其中所述A至G核碱基改变将所述与斯塔加特氏病相关的SNP改变为野生型核碱基。
55.根据权利要求51至53中任一项所述的方法，其中所述A至G核碱基改变将与所述斯塔加特氏病相关的SNP改变为非野生型核碱基，其导致斯塔加特氏病的一种或多种改善的症状。56.根据权利要求51至55中任一项所述方法，其中所述向导多核苷酸包括与包括与所述斯塔加特氏病相关的SNP的ABCA4基因或其调控组件互补的核酸序列。57.根据权利要求51至56中任一项所述方法，其中所述腺苷碱基编辑器与单个向导RNA(sgRNA)形成复合物，所述单个向导RNA(sgRNA)包括与包括与斯塔加特氏相关的SNP的ABCA4基因或其调控组件互补的核酸序列。58.根据权利要求57所述的方法，其中所述sgRNA包括序列5'
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CUCCAGGGCGAACUUCGACACACAGC
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3'。59.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中相较于以所述腺苷脱氨酶中没有所述氨基酸取代的碱基编辑器的治疗，所述给药导致与神经系统失调相关的改善的症状。60.一种编辑与神经系统失调相关的目标基因或其调控组件的方法，所述方法包括使所述目标基因或其调控组件与(i)腺苷碱基编辑器和(ii)向导多核苷酸接触，其中所述腺苷碱基编辑器包括可编程的DNA结合结构域和腺苷脱氨酶结构域，其中所述腺苷脱氨酶结构域包括在SEQ ID NO：2中编号为氨基酸位置82或166或其相应位置的氨基酸取代，其中所述向导多核苷酸引导所述腺苷碱基编辑器在所述与神经系统失调相关的目标基因或其调控组件中实现A至G核碱基改变。61.根据权利要求60所述的方法，其中所述目标基因是富含亮氨酸的重复激酶2(LRRK2)基因，并且所述神经系统疾病是帕金森氏病。62.一种编辑富含亮氨酸的重复激酶
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2(LRRK2)基因或其调控组件的方法，所述方法包括使LRRK2基因或其调控组件与(i)腺苷碱基编辑器或编码所述腺苷碱基编辑器的核酸序列和(ii)向导多核苷酸或编码所述向导多核苷酸的核酸序列接触，其中所述腺苷碱基编辑器包括可编程的DNA结合结构域和腺苷脱氨酶结构域，其中所述腺苷脱氨酶结构域包括在SEQ ID NO：2中编号为氨基酸位置82或166或其相应位置的氨基酸取代，以及其中所述向导多核苷酸引导所述腺苷碱基编辑器在LRRK2基因及其调节组件中实现A至G核碱基改变。63.根据权利要求62所述的方法，其中所述A至G核碱基改变在与所述帕金森氏病相关的SNP处。64.根据权利要求62或63所述的方法，其中所述与帕金森氏病相关的SNP导致由所述LRRK基因所编码的在SEQ ID NO：3中编号为LRRK2多肽或其变体中的A419V、R1441C、R1441H或G2019S氨基酸突变。65.根据权利要求62至64中任一项所述的方法，其中所述A至G核碱基改变将所述与帕金森氏病相关的SNP改变为野生型核碱基。66.根据权利要求62至64中任一项所述的方法，其中所述A至G核碱基改变将所述A至G核碱基改变将与帕金森氏病相关的SNP改变为非野生型核碱基，其导致帕金森氏病的一种或多种改善的症状。
67.根据权利要求62至66中任一项所述的方法，其中所述A至G核碱基改变将由所述LRRK2基因所编码的LRRK2多肽中的半胱氨酸或组氨酸改变为精氨酸。68.根据权利要求62至66中任一项所述的方法，其中所述A至G改变将由所述LRRK2基因所编码的LRRK2多肽中的丝氨酸改变为甘氨酸。69.根据权利要求62至66中任一项所述的方法，其中所述A至G改变在由所述LRRK2基因所编码的在SEQ ID NO:3中编号为LRRK2多肽或其变体的位置144用精氨酸(R)替换半胱氨酸(C)或组氨酸(H)或在位置2019用甘氨酸(G)替换丝氨酸。70.一种编辑富含亮氨酸的重复激酶
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2(LRRK2)基因或其调控组件的方法，所述方法包括使LRRK基因或其调控组件与(i)腺苷碱基编辑器或编码所述腺苷碱基编辑器的核酸序列和(ii)向导多核苷酸或编码所述向导多核苷酸的核酸序列，其中所述腺苷碱基编辑器包括可编程的DNA结合结构域和腺苷脱氨酶结构域，并且其中所述向导多核苷酸引导所述腺苷碱基编辑器实现LLRK2基因中SNP处的A至G核碱基改变，其中所述SNP不编码在SEQ ID NO：3中编号为LRRK2多肽或其变体中的G2019S突变。71.根据权利要求70所述的方法，其中所述腺苷脱氨酶结构域包括在SEQ ID NO：2中编号为氨基酸位置82或166或其相应位置的氨基酸取代。72.根据权利要求61至71中任一项所述的方法，其中所述向导多核苷酸包括与包括与所述帕金森氏病相关的SNP的LRRK2基因或其调控组件互补的核酸序列。73.根据权利要求61至71中任一项所述的方法，其中所述腺苷碱基编辑器与单个向导RNA(sgRNA)形成复合物，所述单个向导RNA(sgRNA)包括与包括与帕金森氏病相关的SNP的LRRK2基因或其调控组件互补的核酸序列。74.根据权利要求73所述的方法，其中所述sgRNA包括核酸序列：5'
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AAGCGCAAGCCUGGAGGGAA
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3'；或5'
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ACUACAGCAUUGCUCAGUAC
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3'。75.根据权利要求60所述的方法，其中所述目标基因是α
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L
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艾杜糖醛酸酶(IDUA)基因，并且所述神经系统疾病是贺勒氏症。76.一种编辑α
‑
L
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艾杜糖醛酸酶(IDUA)基因或其调控组件的方法，所述方法包括使所述IDUA基因或其调控组件与(i)腺苷碱基编辑器或编码所述腺苷碱基编辑器的核酸序列和(ii)向导多核苷酸或编码所述向导多核苷酸的核酸序列接触，其中所述腺苷碱基编辑器包括可编程的DNA结合结构域和腺苷脱氨酶结构域，其中所述腺苷脱氨酶结构域包括在SEQ ID NO：2中编号为氨基酸位置82或166或其相应位置的氨基酸取代，以及其中所述向导多核苷酸引导所述腺苷碱基编辑器在IDUA基因或其调控组件中实现A至G核碱基改变。77.根据权利要求75或76中任一项所述的方法，其中所述IDUA基因或其调控组件包括与贺勒氏症相关的SNP。78.根据权利要求75至77中任一项所述的方法，其中所述A至G核碱基改变在与贺勒氏症相关的SNP处。79.根据权利要求77或78所述的方法，其中所述与贺勒氏症相关的SNP导致由所述IDUA基因所编码的在SEQ ID NO:4中编号为IDUA多肽或其变体中的W402X或W401X氨基酸突变，其中X是终止密码子。
80.根据权利要求77至79中任一项所述的方法，其中所述A至G核碱基改变将所述与贺勒氏症相关的SNP改变为野生型核碱基。81.根据权利要求77至79中任一项所述的方法，其中所述A至G核碱基改变将所述与贺勒氏症相关的SNP改变为非野生型核碱基，其导致贺勒氏症的一种或多种改善的症状。82.根据权利要求77至81中任一项所述的方法，其中所述与贺勒氏症相关的SNP处的A至G改变将由所述IDUA基因所编码的IDUA多肽中的终止密码子改变为色氨酸。83.根据权利要求77至81中任一项所述的方法，其中所述向导多核苷酸包括与包括与贺勒氏症相关的SNP的IDUA基因或其调控组件互补的核酸序列。84.根据权利要求77至83中任一项所述的方法，其中所述腺苷碱基编辑器与单个向导RNA(sgRNA)形成复合物，所述单个向导RNA(sgRNA)包括与包括与贺勒氏症相关的SNP的IDUA基因或其调控组件互补的核酸序列。85.根据权利要求84所述方法，其中所述sgRNA包括选自由以下所组成的群组的核酸序列：5'
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GACUCUAGGCAGAGGUCUCAA
‑
3'、5'
‑
ACUCUAGGCAGAGGUCUCAA
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3'、5'
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CUCUAGGCCGAAGUGUCGC
‑
3'、及5'
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GCUCUAGGCCGAAGUGUCGC
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3'。86.根据权利要求60所述的方法，其中所述目标基因是甲基CpG结合蛋白2(MECP2)基因，并且所述神经系统疾病是蕾特氏症。87.一种编辑甲基CpG结合蛋白2(MECP2)基因或其调控组件的方法，所述方法包括向受试者给药(i)腺苷碱基编辑器或编码所述腺苷碱基编辑器的核酸序列和(ii)向导多核苷酸或编码所述向导多核苷酸的核酸序列，其中所述腺苷碱基编辑器包括可编程的DNA结合结构域和腺苷脱氨酶结构域，其中所述腺苷脱氨酶结构域包括在SEQ ID NO：2中编号为氨基酸位置82或166或其相应位置的氨基酸取代，以及其中所述向导多核苷酸引导所述腺苷碱基编辑器在MECP2基因或其调控组件中实现A至G核碱基改变。88.根据权利要求86或87所述的方法，其中所述MECP2基因或其调控组件包括与蕾特氏症相关的SNP。89.根据权利要求88所述的方法，其中所述A至G核碱基改变在与所述蕾特氏症相关的SNP处。90.根据权利要求88或89所述的方法，其中所述与蕾特氏症相关的SNP导致由所述MECP2基因所编码的在SEQ ID NO:5中编号为MECP2多肽或其变体中的R106W或T158M氨基酸突变。91.根据权利要求88或89所述的方法，其中所述与蕾特氏症相关的SNP导致由所述MECP2基因所编码的MECP2多肽中的R255X或R270X氨基酸突变，其中X是终止密码子。92.根据权利要求88至81中任一项所述的方法，其中所述A至G核碱基改变将所述与蕾特氏症相关的SNP改变为野生型核碱基。93.根据权利要求88至91中任一项所述的方法，其中所述A至G核碱基改变将所述与蕾特氏症相关的SNP改变为非野生型核碱基，其导致蕾特氏症的一种或多种改善的症状。94.根据权利要求88至91中任一项所述的方法，其中所述与蕾特氏症相关的SNP处的A至G核碱基改变将MECP2多肽中的终止密码子改变为色氨酸。
95.根据权利要求88至94中任一项所述的方法，其中所述向导多核苷酸包括与包括所述与蕾特氏症相关的SNP的MECP2基因或其调控组件互补的核酸序列。96.根据权利要求88至94中任一项所述的方法，其中所述腺苷碱基编辑器与单个向导RNA(sgRNA)形成复合物，所述单个向导RNA(sgRNA)包括与包括与蕾特氏症相关的SNP的MECP2基因或其调控组件互补的核酸序列。97.根据权利要求96所述的方法，其中所述向导多核苷酸包括选自由以下所组成的群组的核酸序列：5
’‑
CUUUUCACUUCCUGCCGGGG
‑3’
、5
’‑
AGCUUCCAUGUCCAGCCUUC
‑3’
、5
’‑
ACCAUGAAGUCAAAAUCAUU
‑3’
、及5
’‑
GCUUUCAGCCCCGUUUCUUG
‑3’
。98.根据权利要求60所述的方法，其中所述目标基因是ATP结合盒亚家族成员4(ABCA4)基因，并且所述神经系统疾病是斯塔加特氏病。99.一种编辑ATP结合盒亚家族成员4(ABCA4)基因或其调控组件的方法，所述方法包括使ABCA4基因或其调控组件与(i)腺苷碱基编辑器或编码所述腺苷碱基编辑器的核酸序列和(ii)向导多核苷酸或编码所述向导多核苷酸的核酸序列接触，其中所述腺苷碱基编辑器包括可编程的DNA结合结构域和腺苷脱氨酶结构域，其中所述腺苷脱氨酶结构域包括在SEQ ID NO：2中编号为氨基酸位置82或166或其相应位置的氨基酸取代，以及其中所述向导多核苷酸引导所述腺苷碱基编辑器在ABCA4基因或其调控组件中...

【专利技术属性】
技术研发人员：I，
申请(专利权)人：比姆医疗股份有限公司，
类型：发明
国别省市：