脂质纳米颗粒制造技术

本发明专利技术提供了脂质纳米颗粒和含有脂质纳米颗粒的制剂。米颗粒的制剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】脂质纳米颗粒
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2019年4月26日提交的美国申请序列号62/839,452和2019年6月26日提交的美国申请序列号62/867,098的优先权权益，所述申请以引用的方式并入本文。

技术介绍

[0003]脂质纳米颗粒(LNP)是生物活性化合物(如治疗性核酸、蛋白质和肽)的有效药物递送系统，所述化合物否则是细胞不可渗透的。基于核酸的药物(其包括大核酸分子，例如体外转录的信使RNA(mRNA)以及与信使RNA或基因相互作用的较小的多核苷酸)必须被递送至适当的细胞区室以便有效。例如，双链核酸，如双链RNA分子(dsRNA)(包括例如siRNA)受到它们的物理化学性质的影响，所述物理化学性质使得它们是细胞不可渗透的。递送至适当的区室后，siRNA通过称为RNA干扰(RNAi)的高度保守的调控机制阻断基因表达。通常，siRNA的尺寸较大，分子量范围为12
‑
17kDa，并且由于其磷酸主链具有多达50个负电荷而具有高度阴离子性。此外，两条互补的RNA链形成刚性螺旋。这些特征导致了siRNA较差的“类药物”性质。当静脉内施用时，siRNA迅速从体内排出，典型的半衰期在仅10分钟的范围内。此外，siRNA被血液和其他体液或组织中存在的核酸酶快速降解，并且已显示出在体外和体内刺激强烈的免疫应答。参见例如，Robbins等人,Oligonucleotides 19:89
‑
102,2009。mRNA分子遭受类似的不可渗透性、脆性和免疫原性问题。参见国际专利申请公布号WO2016/118697。
[0004]脂质纳米颗粒制剂具有改进的体内核酸递送。例如，此类制剂显著降低了实现体内靶标敲低所需的siRNA剂量。参见Zimmermann等人,Nature 441:111
‑
114,2006.通常，此类脂质纳米颗粒药物递送系统是包含阳离子脂质、辅助脂质和含有聚乙二醇的脂质的多组分制剂。带正电荷的阳离子脂质与阴离子核酸结合，而其他组分支持脂质纳米颗粒的稳定自组装。
[0005]已经致力于提高脂质纳米颗粒制剂的递送功效。许多此类努力旨在开发更合适的阳离子脂质。参见例如，Akinc等人,Nature Biotechnology 26:561
‑
569,2008；Love等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 107:1864
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1869,2010；Baigude等人,Journal of Controlled Release 107:276
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287,2005；Semple等人,Nature Biotechnology 28:172
‑
176,2010。尽管做出了这些努力，但仍然需要含有脂质纳米颗粒的制剂，所述制剂在施用后提供高效力并且允许施用较低剂量的核酸。

技术实现思路

[0006]本文提供了脂质纳米颗粒和包含所述脂质纳米颗粒的药物组合物。所述脂质纳米颗粒和药物组合物特别适用于向患者(例如人)或细胞递送核酸。
[0007]可用于递送核酸的脂质纳米颗粒制剂通常采用PEG
‑
脂质缀合物，其有助于在LNP制造过程中控制粒度并防止施用后在小瓶中和血液中的不想要的聚集。PEG
‑
脂质缀合物还有助于防止血液中的不想要的调理作用。这些PEG
‑
脂质缀合物使用MW为约2000的PEG聚合
物组分是非常典型的。所述缀合物使用包含2个C
14
链的脂质部分并且这些PEG
‑
脂质缀合物以0.5％至2％的摩尔比(相对于所述组合物中的其他脂质)使用也是典型的。相比之下，本文所述的脂质纳米颗粒制剂可含有PEG脂质，所述PEG脂质的PEG MW为500
‑
1000，摩尔比为2％至5％；并且PEG聚合物大小为5000
‑
20000，摩尔比为0.2％至0.5％。因此，并且如本文更充分地描述，已经开发了新的制剂，所述制剂使用不同于通常使用的那些、以不同量使用的PEG
‑
脂质缀合物结构以为脂质纳米颗粒提供有益性质。
[0008]因此，在一个实施方案中，本文提供了一种脂质纳米颗粒，所述脂质纳米颗粒包含：
[0009](a)核酸；
[0010](b)以所述颗粒中存在的总脂质的约30至约70mol％的量的阳离子脂质；
[0011](c)以所述颗粒中存在的总脂质的约30至约70mol％的量的非阳离子脂质，其中所述非阳离子脂质包含磷脂和胆固醇或其衍生物的混合物；以及
[0012](d)以所述颗粒中的总脂质的约2至约5mol％的量的聚乙二醇(PEG)
‑
脂质缀合物，所述聚乙二醇(PEG)
‑
脂质缀合物抑制脂质纳米颗粒的聚集，
[0013]其中所述PEG
‑
脂质缀合物包含与脂质锚定部分连接的PEG部分，
[0014]其中所述PEG
‑
脂质缀合物的PEG部分具有约500至约1,000道尔顿的平均分子量，
[0015]条件是当所述脂质锚定部分是二烷基部分时，两个烷基链中的至少一个小于C
14
。
[0016]还提供了一种脂质纳米颗粒，所述脂质纳米颗粒包含：
[0017](a)核酸；
[0018](b)以所述颗粒中存在的总脂质的约30至约70mol％的量的阳离子脂质；
[0019](c)以所述颗粒中存在的总脂质的约30至约70mol％的量的非阳离子脂质，其中所述非阳离子脂质包含磷脂和胆固醇或其衍生物的混合物；以及
[0020](d)以所述颗粒中的总脂质的约0.2至约0.5mol％的量的聚乙二醇(PEG)
‑
脂质缀合物，所述聚乙二醇(PEG)
‑
脂质缀合物抑制脂质纳米颗粒的聚集，
[0021]其中所述PEG
‑
脂质缀合物包含与脂质锚定部分连接的PEG部分，
[0022]其中所述PEG
‑
脂质缀合物的PEG部分具有约5,000至约20,000道尔顿的平均分子量。
[0023]还提供了一种脂质纳米颗粒，所述脂质纳米颗粒包含：
[0024](a)核酸，其中所述核酸是mRNA；
[0025](b)阳离子脂质；
[0026](c)非阳离子脂质，其中所述非阳离子脂质包含磷脂和胆固醇或其衍生物的混合物；以及
[0027](d)聚乙二醇(PEG)
‑
脂质缀合物，所述聚乙二醇(PEG)
‑
脂质缀合物抑制脂质纳米颗粒的聚集，
[0028]其中所述PEG
‑
脂质缀合物包含与脂质锚定部分连接的PEG部分，其中所述脂质锚定部分是单链C
18
烷基部分。
[0029]还提供了一种脂质纳米颗粒，所述脂质本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种脂质纳米颗粒，所述脂质纳米颗粒包含：(a)核酸；(b)以所述颗粒中存在的总脂质的约30至约70mol％的量的阳离子脂质；(c)以所述颗粒中存在的总脂质的约30至约70mol％的量的非阳离子脂质，其中所述非阳离子脂质包含磷脂和胆固醇或其衍生物的混合物；以及(d)以所述颗粒中的总脂质的约2至约5mol％的量的聚乙二醇(PEG)
‑
脂质缀合物，所述聚乙二醇(PEG)
‑
脂质缀合物抑制脂质纳米颗粒的聚集，其中所述PEG
‑
脂质缀合物包含与脂质锚定部分连接的PEG部分，其中所述PEG
‑
脂质缀合物的所述PEG部分具有约500至约1,000道尔顿的平均分子量，条件是当所述脂质锚定部分是二烷基部分时，两个烷基链中的至少一个小于C
14
。2.如权利要求1所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是单个C
10
‑
C
24
烷基链。3.如权利要求1所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是单个C
10
、C
12
、C
14
、C
16
或C
18
链。4.如权利要求1所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是单个C
18
链。5.如权利要求1所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是单个C
16
‑
C
24
烷基链。6.如权利要求5所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是单个C
18
‑
C
22
烷基链。7.如权利要求1所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分包含固醇或固醇衍生物。8.如权利要求1所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分包含胆固醇或胆固醇衍生物。9.如权利要求1所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分包含多环结构。10.如权利要求1所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是二烷基部分。11.如权利要求10所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是对称二烷基部分。12.如权利要求10所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是不对称二烷基部分。13.如权利要求12所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是具有C
10
和C
14
烷基链的不对称二烷基部分。14.如权利要求11所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是具有两个C8烷基链的二烷基部分。15.如权利要求11所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是具有两个C
10
烷基链的二烷基部分。16.如权利要求11所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是具有两个C
12
烷基链的二烷基部分。17.如权利要求1所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是三烷基部分。18.如权利要求17所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是具有三个C
10
或更小的烷基链的三烷基部分。19.如权利要求17或18所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是对称三烷基部分。20.如权利要求17或18所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是不对称三烷基部分。21.如权利要求1所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是四烷基部分。
22.如权利要求21所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是具有三个C8或更小的烷基链的四烷基部分。23.如权利要求21或22所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是对称四烷基部分。24.如权利要求21或22所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是不对称四烷基部分。25.如权利要求1
‑
24中任一项所述的脂质纳米颗粒，其中所述PEG
‑
脂质缀合物的所述PEG部分具有约750道尔顿的平均分子量。26.如权利要求1
‑
25中任一项所述的脂质纳米颗粒，其中抑制脂质纳米颗粒的聚集的所述聚乙二醇(PEG)
‑
脂质缀合物以所述颗粒中的总脂质的约2mol％的量存在。27.如权利要求1
‑
25中任一项所述的脂质纳米颗粒，其中抑制脂质纳米颗粒的聚集的所述聚乙二醇(PEG)
‑
脂质缀合物以所述颗粒中的总脂质的约3mol％的量存在。28.如权利要求1
‑
25中任一项所述的脂质纳米颗粒，其中抑制脂质纳米颗粒的聚集的所述聚乙二醇(PEG)
‑
脂质缀合物以所述颗粒中的总脂质的约4mol％的量存在。29.如权利要求1
‑
25中任一项所述的脂质纳米颗粒，其中抑制脂质纳米颗粒的聚集的所述聚乙二醇(PEG)
‑
脂质缀合物以所述颗粒中的总脂质的约5mol％的量存在。30.一种脂质纳米颗粒，所述脂质纳米颗粒包含：(a)核酸；(b)以所述颗粒中存在的总脂质的约30至约70mol％的量的阳离子脂质；(c)以所述颗粒中存在的总脂质的约30至约70mol％的量的非阳离子脂质，其中所述非阳离子脂质包含磷脂和胆固醇或其衍生物的混合物；以及(d)以所述颗粒中的总脂质的约0.2至约0.5mol％的量的聚乙二醇(PEG)
‑
脂质缀合物，所述聚乙二醇(PEG)
‑
脂质缀合物抑制脂质纳米颗粒的聚集，其中所述PEG
‑
脂质缀合物包含与脂质锚定部分连接的PEG部分，其中所述PEG
‑
脂质缀合物的所述PEG部分具有约5,000至约20,000道尔顿的平均分子量。31.如权利要求30所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是单个烷基链。32.如权利要求30所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分包含固醇或固醇衍生物。33.如权利要求30所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分包含胆固醇或胆固醇衍生物。34.如权利要求30所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分包含多环结构。35.如权利要求30所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是二烷基部分。36.如权利要求35所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是对称二烷基部分。37.如权利要求35所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是不对称二烷基部分。38.如权利要求35所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是具有长于C
14
的烷基链的二烷基部分。39.如权利要求35所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是具有C
14
‑
C
22
烷基链的二烷基部分。
40.如权利要求36所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是具有两个C
14
烷基链的二烷基部分。41.如权利要求36所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是具有两个C
16
烷基链的二烷基部分。42.如权利要求36所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是具有两个C
18
烷基链的二烷基部分。43.如权利要求30所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是三烷基部分。44.如权利要求30所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是具有三个C8或更大的烷基链的三烷基部分。45.如权利要求43或44所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是对称三烷基部分。46.如权利要求43或44所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部分是不对称三烷基部分。47.如权利要求30所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质锚定部...

【专利技术属性】
技术研发人员：詹姆斯，
申请(专利权)人：盖纳万科学有限公司，
类型：发明
国别省市：