一种快速鉴定和纯化甜瓜亲本P149的分子标记制造技术

本发明专利技术公开了一种快速鉴定和纯化甜瓜亲本P149的分子标记。涉及作物遗传育种技术领域。本发明专利技术提供了扩增分子标记的引物对和快速鉴定和纯化甜瓜亲本P149的方法，能够在苗期从DNA层面，短时间对甜瓜P149的分离群体进行分子标记鉴定，有效区分杂合单株和纯合单株，有目的地选择纯合单株，连续自交2代，即可获得纯系，减少杂合单株的误选，提高亲本提纯的效率，检测P149纯杂效率高。相比于利用表型鉴定筛选纯合单株，无需大田定植甜瓜，结果准确。结果准确。结果准确。

【技术实现步骤摘要】
一种快速鉴定和纯化甜瓜亲本P149的分子标记


[0001]本专利技术涉及作物遗传育种
，更具体的说是涉及一种快速鉴定和纯化甜瓜亲本P149的分子标记。

技术介绍

[0002]本专利技术涉及作物遗传育种分析过程中，亲本的纯度鉴定和纯化环节。甜瓜经济效益高，爬地栽培每亩收益5000
‑
6000元，是重要的经济作物。培育耐低温弱光性能强、适宜早春栽培的甜瓜新品种，是确保甜瓜提早上市、周年供应、增加农民收益的重要举措。
[0003]利用分子标记辅助选育甜瓜新品种，能够缩短育种周期，提高选育效率，但是连锁标记的开发，有赖于利用纯合的、具极端性状的甜瓜亲本构建遗传群体。前期研究(甜瓜耐低温弱光生理指标数据处理及极端材料筛选，华北农学报，2020183
‑
188，宋慧等)发现P149对低温弱光环境(光照4000lux，温度15/8℃，光周期12/12h)表现敏感，是筛选甜瓜耐低温弱光特性紧密连锁分子标记的极端亲本之一。
[0004]极端亲本的纯度，会直接影响标记开发的准确性和效率。亲本纯度越高，亲本的极端表型越稳定，双亲之间筛选到的多态性标记也越稳定；构建的遗传群体重组交换明显，表型分离更加符合正态分布。如果亲本不纯，亲本的极端表型不稳定，双亲之间筛选到的多态性标记会随着亲本单株变化而变化；通过杂交获得的遗传群体表型偏分离。因此，注意和保持甜瓜极端亲本的纯度，是开发甜瓜紧密连锁分子标记环节必须认真解决的重要问题。
[0005]在利用P149筛选双亲多态性分子标记的过程中，我们发现，筛选结果会随着P149单株DNA的更换而出现多态性消失的问题。P149群体单株果实表型差异不显著，通过表型观察难以去杂。一旦选择杂合P149单株进行标记筛选，或者进行后续的杂交或者自交，都会因为杂合体分离产生混杂。
[0006]因此，P149纯度不高，提纯困难，严重影响利用P149开发甜瓜耐低温弱光分子标记的进程，亟需建立一种快速鉴定和纯化甜瓜亲本P149的方法。

技术实现思路

[0007]有鉴于此，本专利技术提供了一种快速鉴定和纯化甜瓜亲本P149的分子标记。在短时间内可以纯化甜瓜亲本P149。
[0008]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0009]一种快速鉴定和纯化甜瓜亲本P149的分子标记，包括以下分子标记的组合：SSR1/2、SSR3/4、SSR5/6、SSR7/8、SSR9/10、SSR11/12、SSR13/14、SSR15/16、SSR17/18、SSR19/20和SSR21/22；扩增所述分子标记德引物核苷酸序列如下：
[0010]SSR1/2上游引物序列为5
’‑
GAAAGAATGGGGGAAAAGAG
‑3’
，如SEQ ID NO.1所示；
[0011]SSR1/2下游引物序列为5
’‑
ACCAATCCATCACTCTCACT
‑3’
，如SEQ ID NO.2所示；
[0012]SSR3/4上游引物序列为5
’‑
CGATCTTCTTTATTCTTCGCC
‑3’
，如SEQ ID NO.3所示；
[0013]SSR3/4下游引物序列为5
’‑
GCTGTAAAACGAAACGGAGA
‑3’
，如SEQ ID NO.4所示；
[0014]SSR5/6上游引物序列为5
’‑
CCATCTCTTAACTTTCTCTC
‑3’
，如SEQ ID NO.5所示；
[0015]SSR5/6下游引物序列为5
’‑
TACATTATGGGTAAGGTAAG
‑3’
，如SEQ ID NO.6所示；
[0016]SSR7/8上游引物序列为5
’‑
TCTCTTAACTTTCTCTCTCC
‑3’
，如SEQ ID NO.7所示；
[0017]SSR7/8下游引物序列为5
’‑
GGGCCATTTTCTTTTTACAT
‑3’
，如SEQ ID NO.8所示；
[0018]SSR9/10上游引物序列为5
’‑
GGACAATTTAGGGAGGATC
‑3’
，如SEQ ID NO.9所示；
[0019]SSR9/10下游引物序列为5
’‑
CACTACCTTAAAACAGAATTG
‑3’
，如SEQ ID NO.10所示；
[0020]SSR11/12上游引物序列为5
’‑
ATTCGTAGTTCATACTCTCTTTCTC
‑3’
，如SEQ ID NO.11所示；
[0021]SSR11/12下游引物序列为5
’‑
CGGAGAAGAAGGAAGGGTTTTAAG A
‑3’
，如SEQ ID NO.12所示；
[0022]SSR13/14上游引物序列为5
’‑
CTCCCCAGTGTATCAGCCAAATCTC
‑3’
，如SEQ ID NO.13所示；
[0023]SSR13/14下游引物序列为5
’‑
AACGGGATTTTGGAGGCATATTCGG
‑3’
，如SEQ ID NO.14所示；
[0024]SSR15/16上游引物序列为5
’‑
TGGGAAAGAAAGAGAATCAAAA
‑3’
，如SEQ ID NO.15所示；
[0025]SSR15/16下游引物序列为5
’‑
AAAGAAAGAAACGCAACTTCG
‑3’
，如SEQ ID NO.16所示；
[0026]SSR17/18上游引物序列为5
’‑
AATGGAAAAGGGAAGTGCAA
‑3’
，如SEQ ID NO.17所示；
[0027]SSR17/18下游引物序列为5
’‑
TTTCACTTTTTCCCGCCG
‑3’
，如SEQ ID NO.18所示；
[0028]SSR19/20上游引物序列为5
’‑
CGAATGTGAAATCTCTTCTCCC
‑3’
，如SEQ ID NO.19所示；
[0029]SSR19/20下游引物序列为5
’‑
TATGAAGCGCGCATAAACAG
‑3’
，如SEQ ID NO.20所示；
[0030]SSR21/22上游引物序列为5
’‑
GGATTCCTCTTCTCCTTTTGCT
‑3’
，如SEQ I本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种快速鉴定和纯化甜瓜亲本P149的分子标记，其特征在于，包括以下分子标记的组合：SSR1/2、SSR3/4、SSR5/6、SSR7/8、SSR9/10、SSR11/12、SSR13/14、SSR15/16、SSR17/18、SSR19/20和SSR21/22；扩增所述分子标记德引物核苷酸序列如下：SSR1/2上游引物序列为5
’‑
GAAAGAATGGGGGAAAAGAG
‑3’
，如SEQ ID NO.1所示；SSR1/2下游引物序列为5
’‑
ACCAATCCATCACTCTCACT
‑3’
，如SEQ ID NO.2所示；SSR3/4上游引物序列为5
’‑
CGATCTTCTTTATTCTTCGCC
‑3’
，如SEQ ID NO.3所示；SSR3/4下游引物序列为5
’‑
GCTGTAAAACGAAACGGAGA
‑3’
，如SEQ ID NO.4所示；SSR5/6上游引物序列为5
’‑
CCATCTCTTAACTTTCTCTC
‑3’
，如SEQ ID NO.5所示；SSR5/6下游引物序列为5
’‑
TACATTATGGGTAAGGTAAG
‑3’
，如SEQ ID NO.6所示；SSR7/8上游引物序列为5
’‑
TCTCTTAACTTTCTCTCTCC
‑3’
，如SEQ ID NO.7所示；SSR7/8下游引物序列为5
’‑
GGGCCATTTTCTTTTTACAT
‑3’
，如SEQ ID NO.8所示；SSR9/10上游引物序列为5
’‑
GGACAATTTAGGGAGGATC
‑3’
，如SEQ ID NO.9所示；SSR9/10下游引物序列为5
’‑
CACTACCTTAAAACAGAATTG
‑3’
，如SEQ ID NO.10所示；SSR11/12上游引物序列为5
’‑
ATTCGTAGTTCATACTCTCTTTCTC
‑3’
，如SEQ ID NO.11所示；SSR11/12下游引物序列为5
’‑
CGGAGAAGAAGGAAGGGTTTTAAGA
‑3’
，如SEQ ID NO.12所示；SSR13/14上游引物序列为5
’‑
CTCCCCAGTGTATCAGCCAAATCTC
‑3’
，如SEQ ID NO.13所示；SSR13/14下游引物序列为5
’‑
AACGGGATTTTGGAGGCATATTCGG
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【专利技术属性】
技术研发人员：宋慧，臧全宇，丁伟红，
申请(专利权)人：宁波市农业科学研究院，
类型：发明
国别省市：