用于检测碳青霉烯酶酶型的检测试剂和方法技术

本发明专利技术涉及碳青霉烯酶酶型的检测技术领域，具体而言，涉及用于检测碳青霉烯酶酶型的检测试剂和方法。检测试剂的原料包括乙二胺四乙酸类化合物和三氨基苯硼酸，且含有所述乙二胺四乙酸类化合物的溶液的浓度为0.8

【技术实现步骤摘要】
用于检测碳青霉烯酶酶型的检测试剂和方法


[0001]本专利技术涉及碳青霉烯酶酶型的检测
，具体而言，涉及用于检测碳青霉烯酶酶型的检测试剂和方法。

技术介绍

[0002]近年来的流行病学提示，随着广谱抗生素及碳青酶烯类抗生素在疾病感染中的广泛使用，耐碳青酶烯肠杆菌(Carbapenem
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resistant Enterobacteriaceae,CRE)感染发生率逐年上升，多项研究提示，若发生CRE感染，传统抗生素治疗效果差，患者死亡率高。碳青霉烯酶是指能够水解碳青霉烯类抗生素的一大类β
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内酰胺酶，可分为A类、B类和D类酶。A类、D类为丝氨酸酶，B类为金属酶。而A类的KPC丝氨酸酶是近年来肠杆菌科细菌最主要的耐药机制，能被新型酶抑制剂阿维巴坦、雷利巴坦所抑制，临床多用头孢他啶
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阿维巴坦治疗产KPC酶的细菌感染。另外，B类的NDM金属酶对氨曲南的水解活性弱，不被β
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内酰胺酶抑制剂所抑制，因此，氨曲南与头孢他啶
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阿维巴坦联合用药是治疗产NDM酶细菌感染的有效方法。所以，临床可以依据碳青霉烯酶的分型选择有效的治疗方案，提高CRE治疗水平。
[0003]鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供用于检测碳青霉烯酶酶型的检测试剂和方法。该检测试剂不仅能实现碳青霉烯酶的分型，同时操作简单，结果易读，成本低，非常适合临床用于碳青霉烯酶表型检测。
[0005]本专利技术是这样实现的：
[0006]第一方面，本专利技术提供一种用于检测碳青霉烯酶酶型的检测试剂，其原料包括乙二胺四乙酸类化合物和三氨基苯硼酸，且含有所述乙二胺四乙酸类化合物的溶液的浓度为0.8
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1.2mol/L，含有所述三氨基苯硼酸的浓度为40
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60mg/ml。
[0007]在可选的实施方式中，所述乙二胺四乙酸类化合物包括乙二胺四乙酸和乙二胺四乙酸盐；
[0008]优选地，所述乙二胺四乙酸盐为乙二胺四乙酸钠盐。
[0009]在可选的实施方式中，所述检测试剂包括含有乙二胺四乙酸类化合物的第一溶液和含有三氨基苯硼酸的第二溶液，所述第一溶液中乙二胺四乙酸类化合物的浓度为0.8
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1.2mol/L，所述第二溶液中三氨基苯硼酸的浓度为40
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60mg/ml。
[0010]在可选的实施方式中，所述第一溶液和所述第二溶液的体积比为1：1
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3：2。
[0011]在可选的实施方式中，所述第一溶液是将所述乙二胺四乙酸类化合物溶解后形成的溶液；
[0012]所述第二溶液是将所述三氨基苯硼酸和二甲基亚砜与水的混合溶剂混合后形成的溶液。
[0013]在可选的实施方式中，所述第一溶液和所述第二溶液均于2
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8℃条件下进行保存。
[0014]在可选的实施方式中，在使用所述检测试剂时，再将所述第一溶液和所述第二溶液混合。
[0015]在可选的实施方式中，所述第一溶液中乙二胺四乙酸的浓度为0.5mol/L，所述第二溶液中三氨基苯硼酸的浓度为50mg/ml，所述第一溶液和所述第二溶液的体积比为1：1。
[0016]第二方面，本专利技术提供一种检测碳青霉烯酶酶型的方法，包括：利用前述实施方式任一项所述的用于检测碳青霉烯酶酶型的检测试剂进行检测。
[0017]本专利技术具有以下有益效果：本专利技术实施例通过采用乙二胺四乙酸类化合物和三氨基苯硼酸配合，并限定二者的配比，不仅能实现碳青霉烯酶的分型，同时操作简单，结果易读，成本低，非常适合临床用于碳青霉烯酶表型检测。
附图说明
[0018]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0019]图1为本专利技术实施例2提供的检测碳青霉烯酶酶型的方法中纸片具体贴的位置图；
[0020]图2为本专利技术实施例2提供的产丝氨酸酶的理论纸片结果图；
[0021]图3为本专利技术实施例2提供的产金属酶的理论纸片结果图；
[0022]图4为本专利技术实施例2提供的同产丝氨酸酶和金属酶的理论纸片结果图；
[0023]图5为本专利技术实施例2提供的实验结果图。
具体实施方式
[0024]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0025]本专利技术实施例提供用于检测碳青霉烯酶酶型的检测试剂，其原料包括乙二胺四乙酸类化合物和三氨基苯硼酸，且含有所述乙二胺四乙酸类化合物的溶液的浓度为0.8
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1.2mol/L，含有所述三氨基苯硼酸的浓度为40
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60mg/ml。
[0026]采用乙二胺四乙酸类化合物和三氨基苯硼酸配合，并限定二者的配比，不仅能实现碳青霉烯酶的分型，同时操作简单，结果易读，成本低，非常适合临床用于碳青霉烯酶表型检测。
[0027]其中，乙二胺四乙酸类化合物包括乙二胺四乙酸和乙二胺四乙酸盐，优选地，所述乙二胺四乙酸盐为乙二胺四乙酸钠盐。
[0028]进一步地，检测试剂包括含有乙二胺四乙酸类化合物的第一溶液和含有三氨基苯硼酸的第二溶液，其中，所述第一溶液中乙二胺四乙酸类化合物的浓度为0.8
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1.2mol/L，例如为0.8mol/L、0.85mol/L、0.9mol/L、1.0mol/L、1.05mol/L、1.1mol/L、1.15mol/L以及1.2mol/L等0.8
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1.2mol/L之间的任意数值；所述第二溶液中三氨基苯硼酸的浓度为40
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60mg/ml，例如为40mg/ml、45mg/ml、47mg/ml、50mg/ml、52mg/ml、55mg/ml、58mg/ml以及
60mg/ml等40
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60mg/ml之间的任意数值。第一溶液和所述第二溶液的体积比为1：1
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3：2。例如为1：1、1.2：1、1.5：1等1：1
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3：2之间的任意数值。
[0029]进一步地，所述第一溶液是将所述乙二胺四乙酸类化合物溶解后形成的溶液；或者可以是将高浓度的乙二胺四乙酸类化合物溶液进行稀释得到所需浓度的第一溶液。第二溶液是将所述三氨基苯硼酸和二甲基亚砜与水的混合溶剂混合后形成的溶液。
[0030]且第一溶液和所述第二溶液均于2
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8℃条件下进行保存，继而能够减少第一溶液和第二溶液内成分变质，有利于提升检测结果。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测碳青霉烯酶酶型的检测试剂，其特征在于，其原料包括乙二胺四乙酸类化合物和三氨基苯硼酸，且含有所述乙二胺四乙酸类化合物的溶液的浓度为0.8
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1.2mol/L，含有所述三氨基苯硼酸的浓度为40
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60mg/ml。2.根据权利要求1所述的用于检测碳青霉烯酶酶型的检测试剂，其特征在于，所述乙二胺四乙酸类化合物包括乙二胺四乙酸和乙二胺四乙酸盐。3.根据权利要求2所述的用于检测碳青霉烯酶酶型的检测试剂，其特征在于，所述乙二胺四乙酸盐为乙二胺四乙酸钠盐。4.根据权利要求1所述的用于检测碳青霉烯酶酶型的检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括含有乙二胺四乙酸类化合物的第一溶液和含有三氨基苯硼酸的第二溶液，所述第一溶液中乙二胺四乙酸类化合物的浓度为0.8
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1.2mol/L，所述第二溶液中三氨基苯硼酸的浓度为40
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60mg/ml。5.根据权利要求4所述的用于检测碳青霉烯酶酶型的检测试剂，其特征在于，所述第一溶液和所述第二溶液的体积比为...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪璐，曲远青，刘媛，蒲晓凤，刘璐，
申请(专利权)人：中国人民解放军西部战区总医院，
类型：发明
国别省市：