生产脱环氧埃坡霉素B的重组菌及其用途制造技术

本发明专利技术涉及用于发酵生产脱环氧埃坡霉素B的重组纤维堆囊菌(Sorangium cellulosum)，该重组菌中埃坡霉素生物合成基因簇中的epoK基因被插入失活，以及使用所述重组菌生产脱环氧埃坡霉素B的方法。埃坡霉素B的方法。埃坡霉素B的方法。

【技术实现步骤摘要】
生产脱环氧埃坡霉素B的重组菌及其用途


[0001]本申请涉及重组细菌及其用途，更具体涉及生产脱环氧埃坡霉素B的重组纤维堆囊菌及其用途。

技术介绍

[0002]埃坡霉素(Epothilone)是一类由土壤微生物产生的作用于微管蛋白的具抗肿瘤活性的大环内酯类抗生素，于20世纪90年代初首先从粘细菌纤维堆囊菌(Sorangium cellulosum)中分离出来，主要有A和B两种产物，其结构如下。
[0003][0004]对纤维堆囊菌菌埃坡霉素生物合成基因簇中的基因的克隆分析表明，埃坡霉素聚酮合酶(polyketide synthases)利用酰基辅酶A为单位聚合形成微生物的次级代谢产物脱环氧埃坡霉素A和B，比例为2:1，其作为中间代谢产物再通过epoK基因产物细胞色素P450氧化酶的作用，最终分别形成环氧型的埃坡霉素A和B。在天然产生菌纤维堆囊菌中，脱环氧埃坡霉素A和B只以微量存在，远远低于终产物埃坡霉素A和B的产量，并且纤维堆囊菌发酵液中至少还有35种其它埃坡霉素类似物存在(Hardt，et al.,J Nat Prod 64:847-8本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于发酵生产脱环氧埃坡霉素B的重组菌纤维堆囊菌(Sorangium cellulosum)，该重组菌中埃坡霉素生物合成基因簇中的epoK基因是失活的。2.权利要求1所述的重组菌，其中所述epoK基因通过点突变、插入、缺失、取代而失活。3.前述任一项权利要求所述的重组菌，其是来自纤维堆囊菌So ce90(Sorangium cellulosum So ce90)的重组菌。4.前述任一项权利要求所述的重组菌，其中所述epoK基因通过插入而失活，所述epoK基因包含核苷酸序列SEQ ID NO.1，插入序列是SEQ ID NO.1的核苷酸基中第291位至第1960位。5.前述任一项权利要求所述的重组菌，该菌株生产以脱环氧埃坡霉素B为主要代谢产物的高产菌株。6.一种生产脱环氧埃坡霉素B的方法，包括在培养基中培养权利要求1至5任一项中所述的重组菌。7.权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐莉，邱荣国，
申请(专利权)人：成都华昊中天药业有限公司，
类型：发明
国别省市：