【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于调节T细胞介导的免疫力的材料和方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求以下美国专利申请的权益：2019年5月8日提交的美国申请序列号62/844,959；2019年5月8日提交的美国申请序列号62/844,966；2019年5月8日提交的美国申请序列号62/844,970；2019年5月8日提交的美国申请序列号62/844,976；以及2019年5月8日提交的美国申请序列号62/844,995，这些专利申请中的每一者全文以引用方式并入本文。
[0003]本专利技术尤其涉及抗TRGV9分子，包括抗TRGV9抗体、抗TRGV9/抗癌相关抗原双特异性抗体，以及编码该抗体的核酸和表达载体、含有该载体的重组细胞，和包含该抗体的组合物。还提供了制备该抗体的方法，以及使用该抗体杀死癌细胞的方法。
[0004]以电子方式提交的参考序列表
[0005]本申请包含序列表，该序列表作为ASCII格式的序列表经由EFS
‑
Web以电子方式递交，文件名为“14620
‑
021
‑
228_SEQLIST”并且创建日期为2020年5月4日，大小为349,509字节。经由EFS
‑
Web提交的该序列表是本说明书的一部分并且全文以引用方式并入本文。
技术实现思路
[0006]在一个方面，本文提供了一种结合至T细胞受体γ可变区9(TRGV9)的抗体。在一些实施方案中，该抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)。
...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种抗体，所述抗体结合至T细胞受体γ可变区9（TRGV9），其中所述抗体包含重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）。2. 根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含：(i) VH，所述VH包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:1的VH互补决定区（CDR）1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:2的VH CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:31的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:4的VL CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:5的VL CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:6的VL CDR3。3. 根据权利要求2所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:34的VH。4. 根据权利要求2所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:8的VL。5. 根据权利要求2所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:34的VH和具有氨基酸序列SEQ ID NO:8的VL。6. 根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含：(i) VH，所述VH包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:1的VH CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:2的VH CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:32的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:4的VL CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:5的VL CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:6的VL CDR3。7. 根据权利要求6所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:35的VH。8. 根据权利要求6所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:8的VL。9. 根据权利要求6所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:35的VH和具有氨基酸序列SEQ ID NO:8的VL。10. 根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含：(i) VH，所述VH包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:1的VH CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:2的VH CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:33的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:4的VL CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:5的VL CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:6的VL CDR3。11. 根据权利要求10所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:36的VH。12. 根据权利要求10所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:8的VL。13. 根据权利要求10所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:36的VH和具有氨基酸序列SEQ ID NO:8的VL。14. 根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含：(i) VH，所述VH包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:1的VH CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:76的VH CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:3的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:77的VL CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:5的VL CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:6的VL CDR3。15. 根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含：
(i) VH，所述VH包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:60的VH CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:61的VH CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:62的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:63的VL CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:64的VL CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:6的VL CDR3。16. 根据权利要求14或15所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:65的VH。17. 根据权利要求14或15所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:66的VL。18. 根据权利要求14或15所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:65的VH和具有氨基酸序列SEQ ID NO:66的VL。19. 根据权利要求14或15所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:67的VH。20. 根据权利要求14或15所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:68的VL。21. 根据权利要求14或15所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:67的VH和具有氨基酸序列SEQ ID NO:68的VL。22. 根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含：(i) VH，所述VH包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:98的VH CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:99的VH CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:100的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:101的VL CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:102的VL CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:103的VL CDR3。23. 根据权利要求22所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:104的VH。24. 根据权利要求22所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:105的VL。25. 根据权利要求22所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:104的VH和具有氨基酸序列SEQ ID NO:105的VL。26. 根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含：(i) VH，所述VH包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:107的VH CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:108的VH CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:109的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:110的VL CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:111的VL CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:112的VL CDR3。27. 根据权利要求26所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:113的VH。28. 根据权利要求26所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:114的VL。29. 根据权利要求26所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:113的VH和具有氨基酸序列SEQ ID NO:114的VL。30. 根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含：
(i) VH，所述VH包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:117的VH CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:118的VH CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:119的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:120的VL CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:121的VL CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:122的VL CDR3。31. 根据权利要求30所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:123的VH。32. 根据权利要求30所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:124的VL。33. 根据权利要求30所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:123的VH和具有氨基酸序列SEQ ID NO:124的VL。34. 根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含：(i) VH，所述VH包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:127的VH CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:128的VH CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:129的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:130的VL CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:131的VL CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:132的VL CDR3。35. 根据权利要求34所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:133的VH。36. 根据权利要求34所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:134的VL。37. 根据权利要求34所述的抗体，其中所述抗体包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:133的VH和具有氨基酸序列SEQ ID NO:134的VL。38. 根据权利要求1至37中任一项所述的抗体，其中所述TRGV9存在于γδ T细胞的表面上。39.根据权利要求1至38中任一项所述的抗体，其中所述抗体为人源化抗体。40.根据权利要求1至39中任一项所述的抗体，其中所述抗体为IgG抗体。41.根据权利要求40所述的抗体，其中所述IgG抗体为IgG1、IgG2、IgG3或IgG4抗体。42.根据权利要求1至41中任一项所述的抗体，其中所述抗体为多价的。43.根据权利要求42所述的抗体，其中所述抗体能够结合至少三种抗原。44.根据权利要求42所述的抗体，其中所述抗体能够结合至少五种抗原。45.一种核酸，所述核酸编码根据权利要求1至44中任一项所述的抗体。46.一种载体，所述载体包含根据权利要求45所述的核酸。47.一种宿主细胞，所述宿主细胞包含根据权利要求45所述的载体。48.一种试剂盒，所述试剂盒包含根据权利要求45所述的载体和用于所述载体的包装。49.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1至44中任一项所述的抗体，以及药学上可接受的载剂。50.一种制备根据权利要求49所述的药物组合物的方法，所述方法包括将所述抗体与药学上可接受的载剂组合，以获得所述药物组合物。51. 一种激活表达TRGV9的γδ T细胞的方法，所述方法包括使所述γδ T细胞与根据权利要求1至44中任一项所述的抗体接触。
52. 根据权利要求51所述的方法，其中所述接触导致与表达TRGV9的对照γδ T细胞相比，CD69、CD25和/或颗粒酶B表达的增加。53. 一种双特异性抗体，所述双特异性抗体包含：(a) 结合至TRGV9的第一结合结构域，和(b) 结合至不是TRGV9的第二靶标的第二结合结构域。54. 根据权利要求53所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含：(i) VH，所述VH包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:1的VH CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:2的VH CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:3的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:4的VL CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:5的VL CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:6的VL CDR3。55. 根据权利要求54所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:7的VH。56. 根据权利要求54所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:8的VL。57. 根据权利要求54所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:7的VH和具有氨基酸序列SEQ ID NO:8的VL。58. 根据权利要求53所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含：(i) VH，所述VH包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:1的VH CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:2的VH CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:31的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:4的VL CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:5的VL CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:6的VL CDR3。59. 根据权利要求58所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:34的VH。60. 根据权利要求58所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:8的VL。61. 根据权利要求58所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:34的VH和具有氨基酸序列SEQ ID NO:8的VL。62. 根据权利要求53所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含：(i) VH，所述VH包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:1的VH CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:2的VH CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:32的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:4的VL CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:5的VL CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:6的VL CDR3。63. 根据权利要求62所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:35的VH。64. 根据权利要求62所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:8的VL。65. 根据权利要求62所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:35的VH和具有氨基酸序列SEQ ID NO:8的VL。66. 根据权利要求53所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含：
(i) VH，所述VH包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:1的VH CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:2的VH CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:33的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:4的VL CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:5的VL CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:6的VL CDR3。67. 根据权利要求66所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:36的VH。68. 根据权利要求66所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:8的VL。69. 根据权利要求66所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:36的VH和具有氨基酸序列SEQ ID NO:8的VL。70. 根据权利要求53所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含：(i) VH，所述VH包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:1的VH CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:76的VH CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:3的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:77的VL CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:5的VL CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:6的VL CDR3。71. 根据权利要求53所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含：(i) VH，所述VH包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:60的VH CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:61的VH CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:62的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:63的VL CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:64的VL CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:6的VL CDR3。72. 根据权利要求70或71所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:65的VH。73. 根据权利要求70或71所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:66的VL。74. 根据权利要求70或71所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:65的VH和具有氨基酸序列SEQ ID NO:66的VL。75. 根据权利要求70或71所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:67的VH。76. 根据权利要求70或71所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:68的VL。77. 根据权利要求70或71所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:67的VH和具有氨基酸序列SEQ ID NO:68的VL。78. 根据权利要求53所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含：(i) VH，所述VH包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:89的VH CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:90的VH CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:91的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:92的VL CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:93的VL CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:94的VL CDR3。79. 根据权利要求78所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:95的VH。
ID NO:128的VH CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:129的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:130的VL CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:131的VL CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:132的VL CDR3。95. 根据权利要求94所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:133的VH。96. 根据权利要求94所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:134的VL。97. 根据权利要求94所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:133的VH和具有氨基酸序列SEQ ID NO:134的VL。98.根据权利要求53至97中任一项所述的双特异性抗体，其中所述第二靶标是存在于癌细胞的表面上的癌抗原。99.根据权利要求98所述的双特异性抗体，其中所述癌细胞的表面上的抗原是肿瘤特异性抗原、肿瘤相关抗原或新抗原。100.根据权利要求53至99中任一项所述的双特异性抗体，其中所述第二靶标是CD123。101. 根据权利要求100所述的双特异性抗体，其中所述第二结合结构域包含：(i) VH，所述VH包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:9的VH CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:10的VH CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:11的VH CDR3；和(ii) VL，所述VL包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:12的VL CDR1、具有氨基酸序列SEQ ID NO:13的VL CDR2、以及具有氨基酸序列SEQ ID NO:14的VL CDR3。102. 根据权利要求101所述的双特异性抗体，其中所述第二结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:15的VH。103. 根据权利要求101所述的双特异性抗体，其中所述第二结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:16的VL。104. 根据权利要求101所述的双特异性抗体，其中所述第二结合结构域包含具有氨基酸序列SEQ ID NO:15的VH和具有氨基酸序列SEQ ID NO:16的VL。105. 根据权利要求53至104中任一项所述的双特异性抗体，其中所述TRGV9存在于γδ T细胞的表面上。106. 根据权利要求53至104中任一项所述的双特异性抗体，其中所述TRGV9存在于γδ T细胞的表面上，并且所述第二靶标是在所述癌细胞的表面上表达的癌抗原。107. 根据权利要求106所述的双特异性抗体，其中当所述双特异性抗体结合至所述γδ T细胞的表面上的所述TRGV9和所述癌细胞的表面上的抗原时，所述癌细胞被杀死。108.根据权利要求53至107中任一项所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域是人源化的，所述第二结合结构域是人源化的，或者所述第一结合结构域和所述第二结合结构域都是人源化的。109.根据权利要求53至108中任一项所述的双特异性抗体，其中所述双特异性抗体为IgG抗体。110.根据权利要求109所述的双特异性抗体，其中所述IgG抗体为IgG1、IgG2、IgG3或IgG4抗体。111.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求53至110中任一项所述的双
特异性抗体，以及药学上可接受的载剂。112. 一种将表达TRGV9的γδ T细胞引导至癌细胞的方法，所述方法包括使所述γδ T细胞与根据权利要求53至110中任一项所述的双特异性抗体接触，其中所述接触将所述γδ T细胞引导至所述癌细胞。113.一种抑制在细胞表面上表达癌抗原的癌细胞的生长或增殖的方法，所述方法包括使所述癌细胞与根据权利要求53至110中任一项所述的双特异性抗体接触，其中使所述癌细胞与所述药物组合物接触抑制所述癌细胞的生长或增殖。114. 根据权利要求113所述的方法，其中所述癌细胞在表达TRGV9的γδ T细胞的存在下与所述双特异性抗体接触。115.一种用于消除受试者中的癌细胞的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求53至110中任一项所述的双特异性抗体。116.根据权利要求115所述的方法，其中所述受试者是有需要的受试者。117.根据权利要求115或116所述的方法，其中所述受试者是人。118. 一种激活表达TRGV9的γδ T细胞的方法，所述方法包括使所述γδ T细胞与根据权利要求53至110中任一项所述的双特异性抗体接触。119.一种分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段，所述分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段包含：a. 第一重链（HC1）；b. 第二重链（HC2）；c. 第一轻链（LC1）；以及d. 第二轻链（LC2），其中HC1与LC1缔合，并且HC2与LC2缔合，并且其中(A) HC1包含具有如下氨基酸序列的重链互补决定区1（HCDR1）、HCDR2和HCDR3：i. 分别为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3，ii. 分别为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:31，iii. 分别为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:32，或者iv. 分别为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:33，并且LC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的轻链互补决定区1（LCDR1）、LCDR2和LCDR3，以形成第一抗原的结合位点，并且其中HC2和LC2形成第二抗原的结合位点，(B) HC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:76和SEQ ID NO:3的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且LC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:77、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的LCDR1、LCDR2和LCDR3，以形成第一抗原的结合位点，并且其中HC2和LC2形成第二抗原的结合位点；(C) HC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:61和SEQ ID NO:62的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且LC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:64和SEQ ID NO:6的LCDR1、LCDR2和LCDR3，以形成第一抗原的结合位点，并且其中HC2和LC2形成第二抗原的结
合位点；(D) HC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:90和SEQ ID NO:91的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且LC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:92、SEQ ID NO:93和SEQ ID NO:94的LCDR1、LCDR2和LCDR3，以形成第一抗原的结合位点，并且其中HC2和LC2形成第二抗原的结合位点；(E) HC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:98、SEQ ID NO:99和SEQ ID NO:100的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且LC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:101、SEQ ID NO:102和SEQ ID NO:103的LCDR1、LCDR2和LCDR3，以形成第一抗原的结合位点，并且其中HC2和LC2形成第二抗原的结合位点；(F) HC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:107、SEQ ID NO:108和SEQ ID NO:109的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且LC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:110、SEQ ID NO:111和SEQ ID NO:112的LCDR1、LCDR2和LCDR3，以形成第一抗原的结合位点，并且其中HC2和LC2形成第二抗原的结合位点；(G) HC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:117、SEQ ID NO:118和SEQ ID NO:119的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且LC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:120、SEQ ID NO:121和SEQ ID NO:122的LCDR1、LCDR2和LCDR3，以形成第一抗原的结合位点，并且其中HC2和LC2形成第二抗原的结合位点；或者(H) HC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:127、SEQ ID NO:128和SEQ ID NO:129的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且LC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:130、SEQ ID NO:131和SEQ ID NO:132的LCDR1、LCDR2和LCDR3，以形成第一抗原的结合位点，并且其中HC2和LC2形成第二抗原的结合位点。120.根据权利要求119所述的分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段，其中(A) HC1包含的氨基酸序列与氨基酸序列SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:35或SEQ ID NO:36具有至少95%的同一性，并且LC1包含的氨基酸序列与氨基酸序列SEQ ID NO:8具有至少95%的同一性；(B) HC1包含的氨基酸序列与氨基酸序列SEQ ID NO:65具有至少95%的同一性，并且LC1包含的氨基酸序列与氨基酸序列SEQ ID NO:66具有至少95%的同一性；(C) HC1包含的氨基酸序列与氨基酸序列SEQ ID NO:67具有至少95%的同一性，并且LC1包含的氨基酸序列与氨基酸序列SEQ ID NO:68具有至少95%的同一性；(D) HC1包含的氨基酸序列与氨基酸序列SEQ ID NO:95具有至少95%的同一性，并且LC1包含的氨基酸序列与氨基酸序列SEQ ID NO:96具有至少95%的同一性；(E) HC1包含的氨基酸序列与氨基酸序列SEQ ID NO:104具有至少95%的同一性，并且LC1包含的氨基酸序列与氨基酸序列SEQ ID NO:105具有至少95%的同一性；(F) HC1包含的氨基酸序列与氨基酸序列SEQ ID NO:113具有至少95%的同一性，并且
LC1包含的氨基酸序列与氨基酸序列SEQ ID NO:114具有至少95%的同一性；(G) HC1包含的氨基酸序列与氨基酸序列SEQ ID NO:123具有至少95%的同一性，并且LC1包含的氨基酸序列与氨基酸序列SEQ ID NO:124具有至少95%的同一性；或者(H) HC1包含的氨基酸序列与氨基酸序列SEQ ID NO:133具有至少95%的同一性，并且LC1包含的氨基酸序列与氨基酸序列SEQ ID NO:134具有至少95%的同一性。121.根据权利要求120所述的分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段，其中(A) HC1包含氨基酸序列SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:35或SEQ ID NO:36，并且LC1包含氨基酸序列SEQ ID NO:8；(B) HC1包含氨基酸序列SEQ ID NO:65，并且LC1包含氨基酸序列SEQ ID NO:66；(C) HC1包含氨基酸序列SEQ ID NO:67，并且LC1包含氨基酸序列SEQ ID NO:68；(D) HC1包含氨基酸序列SEQ ID NO:95，并且LC1包含氨基酸序列SEQ ID NO:96；(E) HC1包含氨基酸序列SEQ ID NO:104，并且LC1包含氨基酸序列SEQ ID NO:105；(F) HC1包含氨基酸序列SEQ ID NO:113，并且LC1包含氨基酸序列SEQ ID NO:114；(G) HC1包含氨基酸序列SEQ ID NO:123，并且LC1包含氨基酸序列SEQ ID NO:124；或者(H) HC1包含氨基酸序列SEQ ID NO:133，并且LC1包含氨基酸序列SEQ ID NO:134。122. 根据权利要求119至121中任一项所述的分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段，其中所述第一抗原的结合位点结合至γδ T细胞上的TRGV9。123.根据权利要求119至122中任一项所述的分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段，其中所述第二抗原的结合位点结合至存在于癌细胞的表面上的癌抗原。124. 根据权利要求123所述的分离的TRGV9双特异性抗体或抗原结合片段，其中所述双特异性抗体结合至存在于所述γδ T细胞的表面上的TRGV9以及结合存在于所述癌细胞的表面上的所述癌抗原导致杀死所述癌细胞。125.根据权利要求119至124中任一项所述的分离的TRGV9双特异性抗体或抗原结合片段，其中HC1和LC1是人源化的。126.根据权利要求119至125中任一项所述的分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段，其中HC2和LC2结合至CD123。127.根据权利要求119至126中任一项所述的分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段，其中所述双特异性抗体或其抗原结合片段为IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同种型。128.根据权利要求119至127中任一项所述的分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段，其中所述双特异性抗体或其抗原结合片段为IgG4同种型。129. 根据权利要求119至128中任一项所述的分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段，其中所述双特异性抗体或其抗原结合片段在体外以小于约500 pM的EC
50
诱导癌细胞的γδ T细胞依赖性细胞毒性。130. 根据权利要求129所述的分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段，其中所述双特异性抗体或其抗原结合片段在体外以小于约300 pM的EC
50
诱导癌细胞的γδ T细胞依赖性细胞毒性。131. 根据权利要求129所述的分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段，其中所述双特异性抗体或其抗原结合片段在体外以小于约160 pM的EC
50
诱导癌细胞的γδ T细胞
依赖性细胞毒性。132. 根据权利要求129至131中任一项所述的分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段，其中用γδ T效应细胞和Kasumi3 AML靶细胞的混合物评估所述EC
50
。133.根据权利要求132所述的分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段，其中所述效应细胞与所述靶细胞的比率为约0.01比1至约5比1。134.根据权利要求133所述的分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段，其中所述效应细胞与所述靶细胞的比率为约0.1比1至约2比1。135.根据权利要求134所述的分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段，其中所述效应细胞与所述靶细胞的比率为约1:1。136.根据权利要求119至135中任一项所述的分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段，其中所述双特异性抗体或其抗原结合片段为多价的。137.根据权利要求136所述的分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段，其中所述双特异性抗体或其抗原结合片段能够结合至少三种抗原。138.根据权利要求136所述的分离的TRGV9双特异性抗体或其抗原结合片段，其中所述双特异性抗体或其抗原结合片段能够结合至少五种抗原。139. 一种分离的γδ T细胞双特异性抗体或其抗原结合片段，所述分离的γδ T细胞双特异性抗体或其抗原结合片段包含：a. HC1；b. HC2；c. LC1；以及d. LC2，其中HC1与LC1缔合，并且HC2与LC2缔合，其中HC1和LC1在γδ T细胞上形成第一抗原的结合位点，并且其中HC2和LC2形成第二抗原的结合位点。140.一种双特异性抗体，所述双特异性抗体包含：能够特异性地结合T细胞受体γ链的第一构件；以及能够特异性地结合不是T细胞受体γ链的靶分子的第二构件。141.一种用于制备能够特异性地结合至多于一种靶分子的分子的方法，所述分子包括：用于执行获得能够结合至T细胞受体γ链的寡肽或多肽的功能的步骤；用于执行获得能够结合至靶标的寡肽或多肽的功能的步骤；以及用于执行提供能够特异性地结合至T细胞受体γ链和靶分子的分子的功能的步骤。142.根据权利要求141所述的方法，其中将用于执行获得能够结合至靶标的寡肽或多肽的功能的所述步骤重复n次，并且还包括用于执行提供能够特异性地结合至T细胞受体γ链和n种靶分子的分子的功能的n个步骤，其中n为至少2。143.一种分离的抗TRGV9/抗CD123双特异性抗体或其抗原结合片段，包含：a. HC1；b. HC2c. LC1；以及d. LC2，其中HC1与LC1缔合，并且HC2与LC2缔合，并且其中
(A) HC1包含具有如下氨基酸序列的HCDR1、HCDR2和HCDR3：i. 分别为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3，ii. 分别为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:31，iii. 分别为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:32，或者iv. 分别为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:33，并且LC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的LCDR1、LCDR2和LCDR3，以形成特异性地结合Vγ9的第一抗原的结合位点；(B) HC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:76和SEQ ID NO:3的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且LC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:77、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的LCDR1、LCDR2和LCDR3，以形成特异性地结合Vγ9的第一抗原的结合位点；(C) HC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:61和SEQ ID NO:62的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且LC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:64和SEQ ID NO:6的LCDR1、LCDR2和LCDR3，以形成特异性地结合Vγ9的第一抗原的结合位点；(D) HC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:90和SEQ ID NO:91的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且LC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:92、SEQ ID NO:93和SEQ ID NO:94的LCDR1、LCDR2和LCDR3，以形成特异性地结合Vγ9的第一抗原的结合位点；(E) HC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:98、SEQ ID NO:99和SEQ ID NO:100的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且LC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:101、SEQ ID NO:102和SEQ ID NO:103的LCDR1、LCDR2和LCDR3，以形成特异性地结合Vγ9的第一抗原的结合位点；(F) HC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:107、SEQ ID NO:108和SEQ ID NO:109的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且LC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:110、SEQ ID NO:111和SEQ ID NO:112的LCDR1、LCDR2和LCDR3，以形成特异性地结合Vγ9的第一抗原的结合位点；(G) HC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:117、SEQ ID NO:118和SEQ ID NO:119的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且LC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:120、SEQ ID NO:121和SEQ ID NO:122的LCDR1、LCDR2和LCDR3，以形成特异性地结合Vγ9的第一抗原的结合位点；或者(H) HC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:127、SEQ ID NO:128和SEQ ID NO:129的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且LC1包含分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:130、SEQ ID NO:131和SEQ ID NO...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。