一种提取高纯度酵母β-葡聚糖的方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，提出了一种提取高纯度酵母β

【技术实现步骤摘要】
一种提取高纯度酵母
β
‑
葡聚糖的方法


[0001]本专利技术涉及生物
，具体的，涉及一种提取高纯度酵母β
‑
葡聚糖的方法。

技术介绍

[0002]我国的啤酒产量位居世界首位，因此我国每年预计会产生80
‑
120万吨左右废啤酒酵母。但是，对于啤酒废酵母的回收利用，仅限于用于简单的加工，甚至大量的废旧酵母直接排放，无法得到合理利用甚至造成了严重的污染。
[0003]酵母细胞壁约占细胞干重的20％左右，而酵母细胞壁85％
‑
90％是多糖，10％
‑
13％为蛋白质，其中还含有少量的脂肪等物质。而酵母β
‑
葡聚糖占多糖的30％
‑
50％左右，位于细胞壁的最内层，和原生质体膜相连接。它的主要生理功能是维持细胞壁的机械结构，保持细胞正常的生理形态。酵母β
‑
葡聚糖具有很高的免疫保护效果，能够防止氧化，促进伤口愈合，因此受到了广泛的关注。
[0004]黄丹在《酿酒酵母中活性多糖的提取工艺研究》一文中采用酸法提取β
‑
葡聚糖，探究了最佳提取工艺下，酵母β
‑
葡聚糖得率为21.58％，蛋白质含量为7.21％，多糖含量为71.46％，但是水解产物中同时含有甘露糖和葡萄糖。而采用碱式提取时，虽然纯度高，但是多糖的收率较低。酸式和碱式提取方法中，酸碱用量较大，工艺繁琐，劳动强度大。

技术实现思路

[0005]本专利技术提出一种提取高纯度酵母β
‑
葡聚糖的方法，解决了现有技术中提取工艺复杂，产品收率低纯度低的问题。
[0006]本专利技术的技术方案如下：
[0007]一种提取高纯度酵母β
‑
葡聚糖的方法，包括以下步骤：
[0008]S1、向啤酒废酵母中加入水，加热升温；
[0009]S2、加入自溶剂，加热升温，得到自溶酵母；
[0010]S3、将自溶后的酵母加入缓冲液重悬后抽提，得到酵母不溶物；
[0011]S4、将酵母不溶物与水混合制成悬浮液，加入中性蛋白酶、甘露聚糖酶和山梨醇酶解后，进行高压均质后离心洗涤干燥即得酵母β
‑
葡聚糖。
[0012]作为进一步的技术方案，所述步骤S1中，水的质量为啤酒废酵母的2
‑
2.5倍，加热至45
‑
48℃。
[0013]作为进一步的技术方案，所述步骤S2中，自溶剂为溴化钠、乙酸乙酯、甲酯化植物油的混合物，三者的质量比为(3
‑
4):(6
‑
8):1。
[0014]作为进一步的技术方案，所述自溶剂为水的质量的0.02
‑
0.05倍，升温至80
‑
82℃，保温20
‑
30min。
[0015]作为进一步的技术方案，所述步骤S3缓冲液为pH 7的磷酸缓冲液。
[0016]作为进一步的技术方案，所述步骤S4中的悬浮液的质量浓度为30％
‑
40％。
[0017]作为进一步的技术方案，所述中性蛋白酶质量为悬浮液中干物质质量的0.1％
‑
0.2％，甘露聚糖酶质量为悬浮液中干物质质量的0.1％
‑
0.2％。
[0018]作为进一步的技术方案，所述山梨醇为悬浮液的质量的0.15％
‑
0.3％。
[0019]作为进一步的技术方案，所述高压均质的条件具体为压力1400
‑
1600bar。
[0020]作为进一步的技术方案，所述步骤S4中，酶解9
‑
12h。
[0021]本专利技术的有益效果为：
[0022]1、本专利技术制备得到的酵母β
‑
葡聚糖纯度高达92.4％
‑
93.5％，产率可达26.0％
‑
26.8％，放置9个月菌落仅为5.3
×
103‑
6.3
×
103CFU/g，纯度和产率都有所提高，长期放置抗菌性较好。
[0023]2、本专利技术采用溴化钠替换常规的氯化钠可以提高自溶效率，而如果用同样的工艺条件，采用氯化钠时，提取效果不如溴化钠，专利技术人认为这是由于如果采用溴化钠，只需要半小时以内就可以完成溶解，但是如果用氯化钠是无法实现的，所以最终导致纯度和产率都有所降低。本专利技术使用甲酯化植物油不仅可以促进酯溶解，还能提高最终产物的抗菌性。还添加有山梨醇提高抗菌性和提取效果，但是本专利技术中的山梨醇含量过多并不能带来更好的效果。
具体实施方式
[0024]下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都涉及本专利技术保护的范围。
[0025]实施例1
[0026]S1、向啤酒废酵母中加入2.3倍的水，加热升温至45℃；
[0027]S2、加入水质量0.03倍的自溶剂，升温至80℃保温25min自溶酵母，自溶剂为溴化钠、乙酸乙酯、甲酯化植物油的混合物，三者的质量比为4:7:1；
[0028]S3、将自溶后的酵母加入质量为自溶后的酵母10％的0.2mol/L pH 7的磷酸缓冲液重悬后抽提，得到酵母不溶物；
[0029]S4、将酵母不溶物与水混合制成质量浓度为35％悬浮液，加入中性蛋白酶、甘露聚糖酶、山梨醇，酶解10h后进行高压均质后离心洗涤干燥即得酵母β
‑
葡聚糖，高压均质压力1500bar；
[0030]中性蛋白酶质量为悬浮液中干物质质量的0.1％，甘露聚糖酶质量为悬浮液中干物质质量的0.1％，山梨醇为悬浮液的质量的0.15％。
[0031]实施例2
[0032]S1、向啤酒废酵母中加入2倍的水，加热升温至46℃；
[0033]S2、加入水质量0.04倍的自溶剂，升温至81℃保温30min自溶酵母，自溶剂为溴化钠、乙酸乙酯、甲酯化植物油的混合物，三者的质量比为3:7:1；
[0034]S3、将自溶后的酵母加入质量为自溶后的酵母10％的0.2mol/L pH 7的磷酸缓冲液重悬后抽提，得到酵母不溶物；
[0035]S4、将酵母不溶物与水混合制成质量浓度为38％悬浮液，加入中性蛋白酶、甘露聚糖酶、山梨醇，酶解9h后进行高压均质后离心洗涤干燥即得酵母β
‑
葡聚糖，高压均质压力
1550bar；
[0036]中性蛋白酶质量为悬浮液中干物质质量的0.2％，甘露聚糖酶质量为悬浮液中干物质质量的0.2％，山梨醇为悬浮液的质量的0.3％。
[0037]实施例3
[0038]S1、向啤酒废酵母中加入2.5倍的水，加热升本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提取高纯度酵母β
‑
葡聚糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、向啤酒废酵母中加入水，加热升温；S2、加入自溶剂，加热升温，得到自溶酵母；S3、将自溶后的酵母加入缓冲液重悬后抽提，得到酵母不溶物；S4、将酵母不溶物与水混合制成悬浮液，加入中性蛋白酶、甘露聚糖酶和山梨醇酶解后，进行高压均质后离心洗涤干燥即得酵母β
‑
葡聚糖。2.根据权利要求1所述的提取高纯度酵母β
‑
葡聚糖的方法，其特征在于，所述步骤S1中，水的质量为啤酒废酵母的2
‑
2.5倍，加热至45
‑
48℃。3.根据权利要求1所述的提取高纯度酵母β
‑
葡聚糖的方法，其特征在于，所述步骤S2中，自溶剂为溴化钠、乙酸乙酯、甲酯化植物油的混合物，三者的质量比为(3
‑
4):(6
‑
8):1。4.根据权利要求3所述的提取高纯度酵母β
‑
葡聚糖的方法，其特征在于，所述自溶剂为水的质量的0.02
‑
0.05倍，升温至80
‑
82℃，保温20
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐婷婷，江建梅，姜峰，李丹丹，刘立娟，周雪玲，刘银生，陈志颖，
申请(专利权)人：唐山泰普纽特生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：