一种脱氢酶突变体L283V/L286V及其制备方法和应用技术

一种脱氢酶突变体L283V/L286V及其制备方法和应用，涉及生物医药技术领域；所述突变体L283V/L286V的氨基酸序列为如SEQ ID NO：1所示；为将氨基酸序列为如SEQ ID NO：3所示的脱氢酶的第283位和第286位的的亮氨酸同时突变为缬氨酸。脱氢酶突变体L283V/L286V在全细胞体系催化麦斯明还原反应生成S

【技术实现步骤摘要】
一种脱氢酶突变体L283V/L286V及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，尤其涉及一种脱氢酶突变体L283V/L286V及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]尼古丁（nicotine），俗称烟碱，是茄科植物烟草中所持有的生物碱，占烟草中全部生物碱的95%以上，其化学名为1
‑
甲基（2
‑
吡啶基）吡咯烷，分子式为C
10
H
14
N2，是具有较强碱性的有机二元弱碱，能和多种无机酸或有机酸生成结晶的单盐或双盐，在烟叶中多以有机盐形式存在。
[0003]烟碱的用途十分广泛，烟碱系列农药属植物杀虫剂，因其具有蒸薰、胃毒、触杀功能及迅速降解无残留等特点广泛用于粮食、油料、蔬菜、水果、牧草等农作物的杀虫剂，是生产绿色食品的理想高效杀虫剂和生物性农药。它还广泛应用于医药工业上，是研制治疗心血管、皮肤病、蛇毒等疾病药物的特种原料。在临床研究中，尼古丁还对预防并治疗老年痴呆症（Alzheimer
’
s disease, AD）和帕金森本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脱氢酶突变体L283V/L286V，其特征在于，所述突变体L283V/L286V的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。2.根据权利要求1所述的一种脱氢酶突变体L283V/L286V，其特征在于，编码所述突变体L283V/L286V的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。3.根据权利要求1所述的一种脱氢酶突变体L283V/L286V，其特征在于，所述突变体L283V/L286V为将氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示的MesPDH酶的第283位和第286位的亮氨酸同时突变为缬氨酸所制成。4.一种权利要求1
‑
3任一项所述的脱氢酶突变体L283V/L286V的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，将编码MesPDH酶的基因连接到质粒中，得到重组质粒；所述MesPDH酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示；S2，设计突变引物，采用突变引物并以所述重组质粒为模板进行PCR扩增，使MesPDH酶的第283位和第286位氨基酸同时突变为缬氨酸，酶切消化去除模板DNA后，回收得到突变产物；S3，将所述突变产物转化至宿主细胞中，培养，得到脱氢酶突变体L283V/L286V表达菌株，诱导表达，得到脱氢酶突变体L283V/L286V。5.根据权利要求4所述的一种脱氢酶突变体L283V/L286V的制备方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄佳俊，李荣旭，江锐冰，吴子蓥，胡浩轩，白少钰，周金林，卢宇靖，
申请(专利权)人：佛山市汇腾生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：