遗传修饰动物细胞的改进方法技术

本申请涉及遗传修饰动物细胞的改进方法。本发明专利技术涉及通过降低细胞和遗传修饰剂之间的距离以提高遗传修饰的效率和/或减少基因修饰剂的使用来遗传修饰动物细胞的改进方法。剂的使用来遗传修饰动物细胞的改进方法。剂的使用来遗传修饰动物细胞的改进方法。

【技术实现步骤摘要】
遗传修饰动物细胞的改进方法
[0001]本申请是申请号为201480052400.5的专利技术名称为“遗传修饰动物细胞的改进方法”的中国专利申请的分案申请，原申请是2014年09月23日提交的PCT国际申请PCT/US2014/057030于2016年03月23日进入中国国家阶段的申请。
[0002]相关申请
[0003]本申请要求2013年9月23日提交的标题为“IMPROVED METHODS OF CELL TRANSDUCTION”的美国临时申请No.61/881,259的权益，其整体通过引用并入本文。
[0004]本申请中引用的每个申请、专利和论文，以及每个申请、专利和论文中引用的每个文献或参考(包括每个授权专利公诉期间；“申请引用文献”)，未决美国专利申请10/961,814(下文中Wilson
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814)、未决美国专利申请13/475,700(下文中Vera
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700)、未决美国专利申请13/493,768(下文中Vera
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768)、未决美国专利申请11/952,848(下文中Wils本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.转导动物细胞的方法，其包括：将培养基、动物细胞和遗传修饰剂添加到包含可透气、不可透液体材料的装置中，所述动物细胞的浓度为3百万至2千万个细胞/毫升培养基，所述动物细胞与所述可透气、不可透液体材料接触，所述可透气、不可透液体材料处于水平位置，以及允许经过一段时间，由此所述遗传修饰剂起作用以转导至少一部分所述细胞。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述动物细胞的浓度为4百万至2千万个细胞/毫升培养基。3.根据权利要求1所述的方法，其中所述动物细胞的浓度为5百万至2千万个细胞/毫升培养基。4.根据权利要求1所述的方法，其中所述动物细胞的浓度为6百万至2千万个细胞/毫升培养基。5.根据权利要求1所述的方法，其中所述装置中的培养基在所述一段时间的至少一部分中不处于静态，由此所述遗传修饰剂起作用以转导至少一部分所述动物细胞。6.根据权利要求1所述的方法，其中所述遗传修饰剂由慢病毒构成。7.根据权利要求1所述的方法，其中所述可透气、不可透液体材料与可透气材料支持物接触并且与环境气体接触。8.根据权利要求1所述的方法，其中添加至所述装置的遗传修饰剂的数量与动物细胞的量的比不大于2。9.转导动物细胞的方法，其包括：a)将培养基和一定量的动物细胞添加到包含由可透气、不可透液体材料构成之水平细胞生长表面的可透气装置中，并且允许动物细胞被重力吸引至所述可透气、不可透液体材料，由此所述动物细胞处于第一细胞浓度，培养基为第一培养基高度，并且培养基处于第一培养基体积，所述第一细胞浓度为所述动物细胞的量除以所述第一培养基体积，所述第一培养基高度由当所述细胞生长表面处于水平位置时所述培养基的最上面位置与所述培养基的最下面位置之间的距离定义，b)从所述装置移出一部分所述第一培养基体积，从而在所述装置中留下第二培养基体积，其中动物细胞处于第二细胞浓度，所述第二细胞浓度大于所述第一细胞浓度，培养基处于第二培养基高度，所述第二培养基高度由当所述细胞生长表面处于水平位置时所述培养基的最上面位置与所述培养基的最下面位置之间的距离定义，c)将遗传修饰剂添加到所述装置中，d)允许经过一段时间，以使得所述遗传修饰剂转导至少一部分所述动物细胞，e)将一定体积的培养基添加至所述装置中，以及f)当所述装置定向成使得至少一部分所述动物细胞驻留在所述细胞生长表面上，并且所述细胞生长表面以水平位置定向，且适合细...

【专利技术属性】
技术研发人员：约翰，
申请(专利权)人：威尔逊沃夫制造公司，
类型：发明
国别省市：