【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】指环体和使用方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2018年12月12日提交的美国临时申请号62/778,841和2018年12月12日提交的美国临时申请号62/778,866的权益。上述申请的内容通过引用整体并入本文。
[0003]序列表
[0004]本申请包含序列表，该序列表已以ASCII格式电子提交，并通过引用以其整体并入本文。所述ASCII副本创建于2019年12月9日，名为V2057
‑
7005WO_SL.txt，并且大小为825,796字节。
技术介绍
[0005]持续需要开发合适的载体以向患者递送治疗性遗传物质。
技术实现思路
[0006]本公开提供了一种指环体(anellosome)，例如合成的指环体，其可用作递送媒介物，例如用于向真核细胞(例如人细胞或人组织)递送遗传材料、用于递送效应子(例如有效负载)，或用于递送治疗剂或治疗效应子。在一些实施例中，指环体(例如颗粒，例如病毒颗粒，例如指环病毒(Anellovirus)颗粒)包含包封在蛋白质外部的...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种合成的指环体，所述合成的指环体包含：(i)遗传元件，其包含：(a)启动子元件，(b)编码外源性效应子的核酸序列，其中所述核酸序列与所述启动子元件可操作地连接，和(c)5
’
UTR，其包含SEQ ID NO:878的核苷酸185
‑
255的核苷酸序列，或与其至少90％相同的核酸序列；和(ii)蛋白质外部，所述蛋白质外部包含ORF1分子，所述ORF1分子包含SEQ ID NO:921或927的氨基酸序列，或与其具有至少90％同一性的氨基酸序列；其中所述遗传元件被封闭在所述蛋白质外部内；并且其中所述合成的指环体能够将所述遗传元件递送到人细胞中。2.如权利要求1所述的合成的指环体，其中所述遗传元件包含SEQ ID NO:878的核苷酸185
‑
255的指环病毒5
’
UTR保守结构域核苷酸序列，或与其至少95％相同的核酸序列。3.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，其中所述遗传元件包含SEQ ID NO:886的核苷酸185
‑
254的指环病毒5
’
UTR保守结构域核苷酸序列，或与其至少95％相同的核酸序列。4.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，其中所述ORF1分子由SEQ ID NO:878的核苷酸512
‑
2545编码。5.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，其中所述ORF1分子由SEQ ID NO:886的核苷酸501
‑
2489编码。6.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，其中所述遗传元件包含以下的核酸序列：(i)SEQ ID NO:878的核苷酸3141
‑
3264，或(ii)SEQ ID NO:886的核苷酸3076
‑
3176；或与其具有至少90％序列同一性的核酸序列。7.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，其中所述ORF1分子包含氨基酸序列，所述氨基酸序列包含以下中的一种或多种：如表D2或D4中所列的精氨酸富集区、胶冻卷结构域、高变结构域、N22结构域和/或C末端结构域的氨基酸序列，或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列。8.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，其中所述ORF1分子包含以下的氨基酸序列：(i)SEQ ID NO:883，或(ii)SEQ ID NO:891；或与其具有至少85％序列同一性的氨基酸序列。9.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，所述合成的指环体进一步包含包含如表C1或C2中所列的ORF2、ORF2/2、ORF2/3、TAIP、ORF1/1或ORF1/2的氨基酸序列或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列的多肽。10.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，其中所述遗传元件编码如表C1或C2中所列的ORF1、ORF2、ORF2/2、ORF2/3、TAIP、ORF1/1或ORF1/2的氨基酸序列，或与其具有
至少85％同一性的氨基酸序列。11.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，其中所述合成的指环体不包括包含如表C1或C2中所列的ORF2、ORF2/2、ORF2/3、TAIP、ORF1/1或ORF1/2的氨基酸序列或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列的多肽。12.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，其中所述遗传元件不编码如表C1或C2中所列的ORF1、ORF2、ORF2/2、ORF2/3、TAIP、ORF1/1或ORF1/2的氨基酸序列，或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列。13.一种合成的指环体，所述合成的指环体包含：(i)遗传元件，其包含：(a)启动子元件，(b)编码外源性效应子的核酸序列，其中所述核酸序列与所述启动子元件可操作地连接，和(c)与SEQ ID NO:894的核苷酸178
‑
248的核酸序列具有至少90％序列同一性的核酸序列；和(ii)蛋白质外部，所述蛋白质外部包含ORF1分子，所述ORF1分子包含SEQ ID NO:933的氨基酸序列，或与其具有至少90％同一性的氨基酸序列；其中所述遗传元件被封闭在所述蛋白质外部内；并且其中所述合成的指环体能够将所述遗传元件递送到真核细胞中。14.一种合成的指环体，所述合成的指环体包含：(i)遗传元件，其包含：(a)启动子元件，(b)编码外源性效应子的核酸序列，其中所述核酸序列与所述启动子元件可操作地连接，和(c)与SEQ ID NO:903的核苷酸176
‑
246的核酸序列具有至少90％序列同一性的核酸序列；和(ii)蛋白质外部，所述蛋白质外部包含ORF1分子，所述ORF1分子包含SEQ ID NO:939的氨基酸序列，或与其具有至少90％同一性的氨基酸序列；其中所述遗传元件被封闭在所述蛋白质外部内；并且其中所述合成的指环体能够将所述遗传元件递送到真核细胞中。15.一种合成的指环体，所述合成的指环体包含：(i)遗传元件，其包含：(a)启动子元件，(b)编码外源性效应子的核酸序列，其中所述核酸序列与所述启动子元件可操作地连接，和(c)与SEQ ID NO:911的核苷酸170
‑
240的核酸序列具有至少90％序列同一性的核酸序列；和(ii)蛋白质外部，所述蛋白质外部包含ORF1分子，所述ORF1分子包含SEQ ID NO:945的氨基酸序列，或与其具有至少90％同一性的氨基酸序列；其中所述遗传元件被封闭在所述蛋白质外部内；并且
其中所述合成的指环体能够将所述遗传元件递送到真核细胞中。16.如权利要求13所述的合成的指环体，其中所述ORF1分子由SEQ ID NO:894的核苷酸572
‑
2758编码。17.如权利要求14所述的合成的指环体，其中所述ORF1分子由SEQ ID NO:903的核苷酸581
‑
2884编码。18.如权利要求15所述的合成的指环体，其中所述ORF1分子由SEQ ID NO:911的核苷酸614
‑
2911编码。19.如权利要求13
‑
18中任一项所述的合成的指环体，其中所述遗传元件包含以下的核酸序列：(i)SEQ ID NO:894的核苷酸3555
‑
3696，(ii)SEQ ID NO:903的核苷酸3720
‑
3828；或(iii)SEQ ID NO:911的核苷酸3716
‑
3815；或与其具有至少90％序列同一性的核酸序列。20.如权利要求13所述的合成的指环体，其中所述ORF1分子包含氨基酸序列，所述氨基酸序列包含以下中的一种或多种：如表D6中所列的精氨酸富集区、胶冻卷结构域、高变结构域、N22结构域和/或C末端结构域的氨基酸序列，或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列。21.如权利要求14所述的合成的指环体，其中所述ORF1分子包含氨基酸序列，所述氨基酸序列包含以下中的一种或多种：如表D8中所列的精氨酸富集区、胶冻卷结构域、高变结构域、N22结构域和/或C末端结构域的氨基酸序列，或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列。22.如权利要求15所述的合成的指环体，其中所述ORF1分子包含氨基酸序列，所述氨基酸序列包含以下中的一种或多种：如表D10中所列的精氨酸富集区、胶冻卷结构域、高变结构域、N22结构域和/或C末端结构域的氨基酸序列，或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列。23.如权利要求13所述的合成的指环体，其中所述ORF1分子包含SEQ ID NO:900的氨基酸序列，或与其具有至少85％序列同一性的氨基酸序列。24.如权利要求14所述的合成的指环体，所述ORF1分子包含SEQ ID NO:908的氨基酸序列，或与其具有至少85％序列同一性的氨基酸序列。25.如权利要求15所述的合成的指环体，其中所述ORF1分子包含SEQ ID NO:916的氨基酸序列，或与其具有至少85％序列同一性的氨基酸序列。26.如权利要求13所述的合成的指环体，所述合成的指环体进一步包含包含如表C3中所列的ORF2、ORF2/2、ORF2/3、TAIP、ORF1/1或ORF1/2的氨基酸序列或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列的多肽。27.如权利要求14所述的合成的指环体，所述合成的指环体进一步包含包含如表C4中所列的ORF2、ORF2/2、ORF2/3、TAIP、ORF1/1或ORF1/2的氨基酸序列或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列的多肽。28.如权利要求15所述的合成的指环体，所述合成的指环体进一步包含包含如表C5中所列的ORF2、ORF2/2、ORF2/3、TAIP、ORF1/1或ORF1/2的氨基酸序列或与其具有至少85％同
一性的氨基酸序列的多肽。29.如权利要求13所述的合成的指环体，其中所述遗传元件编码如表C3中所列的ORF1、ORF2、ORF2/2、ORF2/3、TAIP、ORF1/1或ORF1/2的氨基酸序列，或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列。30.如权利要求14所述的合成的指环体，其中所述遗传元件编码如表C4中所列的ORF1、ORF2、ORF2/2、ORF2/3、TAIP、ORF1/1或ORF1/2的氨基酸序列，或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列。31.如权利要求15所述的合成的指环体，其中所述遗传元件编码如表C5中所列的ORF1、ORF2、ORF2/2、ORF2/3、TAIP、ORF1/1或ORF1/2的氨基酸序列，或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列。32.如权利要求13所述的合成的指环体，其中所述遗传元件编码如表C3中所列的ORF1、ORF2、ORF2/2、ORF2/3、TAIP、ORF1/1或ORF1/2的氨基酸序列，或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列。33.如权利要求14所述的合成的指环体，其中所述遗传元件编码如表C4中所列的ORF1、ORF2、ORF2/2、ORF2/3、TAIP、ORF1/1或ORF1/2的氨基酸序列，或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列。34.如权利要求15所述的合成的指环体，其中所述遗传元件编码如表C5中所列的ORF1、ORF2、ORF2/2、ORF2/3、TAIP、ORF1/1或ORF1/2的氨基酸序列，或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列。35.如权利要求13所述的合成的指环体，其中所述遗传元件编码如表C3中所列的ORF1、ORF2、ORF2/2、ORF2/3、TAIP、ORF1/1或ORF1/2的氨基酸序列，或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列。36.如权利要求14所述的合成的指环体，其中所述遗传元件编码如表C4中所列的ORF1、ORF2、ORF2/2、ORF2/3、TAIP、ORF1/1或ORF1/2的氨基酸序列，或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列。37.如权利要求15所述的合成的指环体，其中所述遗传元件编码如表C5中所列的ORF1、ORF2、ORF2/2、ORF2/3、TAIP、ORF1/1或ORF1/2的氨基酸序列，或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列。38.如权利要求13
‑
37中任一项所述的合成的指环体，其中所述合成的指环体不包括包含如表C3
‑
C5中任一个中所列的ORF1、ORF2、ORF2/2、ORF2/3、TAIP、ORF1/1或ORF1/2的氨基酸序列或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列的多肽。39.如权利要求13
‑
38中任一项所述的合成的指环体，其中所述遗传元件不编码如表C3
‑
C5中任一个中所列的ORF1、ORF2、ORF2/2、ORF2/3、TAIP、ORF1/1或ORF1/2的氨基酸序列，或与其具有至少85％同一性的氨基酸序列。40.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，其中所述ORF1分子包含氨基酸序列YNPX2DXGX2N，其中X
n
各自独立地是任何n个氨基酸的连续序列。41.如权利要求40所述的合成的指环体，其中所述ORF1分子进一步包含位于氨基酸序列YNPX2DXGX2N侧翼的第一β链和第二β链，例如，其中所述第一β链包含氨基酸序列YNPX2DXGX2N的酪氨酸(Y)残基和/或其中所述第二β链包含氨基酸序列YNPX2DXGX2N的第二
个天冬酰胺(N)残基(从N到C)。42.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，其中所述ORF1分子按从N末端到C末端的方向依次包含第一β链、第二β链、第一α螺旋、第三β链、第四β链、第五β链、第二α螺旋、第六β链、第七β链、第八β链和第九β链。43.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，其中所述遗传元件能够通过滚环复制在宿主细胞中扩增，例如产生至少8个拷贝。44.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，其中所述遗传元件是单链的。45.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，其中所述遗传元件是环状的。46.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，其中所述遗传元件是DNA。47.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，其中所述遗传元件是负链DNA。48.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，其中所述遗传元件以少于进入所述细胞的所述指环体的10％、8％、6％、4％、3％、2％、1％、0.5％、0.2％、0.1％的频率整合，例如，其中所述合成的指环体是非整合的。49.如前述权利要求中任一项所述的合成的指环体，其中所述遗传元件包含表16
‑...
【专利技术属性】
技术研发人员：EG韦因斯坦，A卡韦吉安，S德拉格雷夫，NL尤兹维亚克，KJ莱博，FM迪亚兹，DM纳万达，RD泰德斯通，JD皮茨，
申请(专利权)人：旗舰先锋创新V股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。