SFV-helper质粒、pSFVCs-LacZ病毒样颗粒及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种SFV

【技术实现步骤摘要】
SFV
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helper质粒、pSFVCs
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LacZ病毒样颗粒及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物工程领域，尤其涉及一种SFV
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helper质粒、pSFVCs
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LacZ 病毒样颗粒及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]糖香酶，亦称糖香水解酶，是一大类可水解糖香键的酶类的总称，可用于寡糖的合成，还可用于炫基糖香以及芳香基糖香的合成，在催化氨基酸、多肽、生物碱和抗生素等物质的糖基化方面也起到重要的作用，在医药和食品领域具有广泛的应用。β
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半乳糖香酶是一类重要的糖香酶，由Lacz基因编码的β
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半乳糖苷酶广泛存在于微生物、动物和植物中。
[0003]RNA复制子是衍生于RNA病毒基因组并能自主复制的RNA。最常用于开发复制子的病毒是披膜病毒科中的甲病毒(Alphavirus),如辛德比斯病毒 (Sindbis virus,SIN)、塞姆利基森林病毒(Semliki forest virus,SFV)以及委内瑞拉本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种pSFVCs
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LacZ病毒样颗粒的制备方法，其特征在于，包括：(1)构建SFV
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helper质粒；(2)将pSFVCs
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Lacz、SFV
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helper质粒体外转录成mRNA，然后将mRNA共电转入BHK细胞中，得到pSFVCs
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Lacz病毒样颗粒；其中，所述SFV
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helper质粒是通过构建如SEQ ID NO.1所示的重组载体，并合成如SEQ ID NO.2所示的插入片段基因，然后将所述插入片段基因克隆入所述重组载体而得。2.如权利要求1所述的pSFVCs
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LacZ病毒样颗粒的制备方法，其特征在于，步骤(1)包括：(1.1)构建重组载体，构建得到的重组载体的序列为SEQ ID NO.1；(1.2)合成插入片段基因，所述插入片段的序列为SEQ ID NO.2；(1.3)将重组载体与插入片段进行同源重组，重组的产物转化DH5α感受态细菌，涂布平板，倒置培养，提取质粒，得到SFV
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helper质粒，其中，所述SFV
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helper质粒的序列为SEQ ID NO.3。3.如权利要求2所述的pSFVCs
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LacZ病毒样颗粒的制备方法，其特征在于，步骤(1.3)包括：将重组载体与插入片段进行同源重组，重组的产物转化DH5α感受态细菌，涂布氨苄抗性的LB平板，35
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38℃倒置培养10
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20小时，将菌落PCR阳性的菌落进行小摇，保菌，提取质粒；然后将提取的质粒酶切鉴定及测序。4.如权利要求2所述的pSFVCs
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LacZ病毒样颗粒的制备方法，其特征在于，步骤(1.1)包括：设计与合成引物，所述引物包括第一段
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F、第一段
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R、及第二段
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F、第二段
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R：以pSFVCs
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lacz为模板，分别以第一段
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F、第一段
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R为引物扩增片段1，以第二段
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F、第二段
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R为引物扩增片段2进行扩增，得到载体片段1和载体片段2；将所述载体片段1和载体片段2同源重组，得到重组产物；将重组产物加入到感受态细胞DH5α细胞，进行重...

【专利技术属性】
技术研发人员：方倪冉，杨斌，郑航辉，杨小云，董楠，
申请(专利权)人：华农肇庆生物产业技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：