可以自组装形成PH响应载药水凝胶的多肽、水凝胶及其制备方法和用途技术

本发明专利技术公开了可以自组装形成PH响应载药水凝胶的多肽、水凝胶及其制备方法和用途，多肽序列为：FOVVVEF，其中，F＝苯丙氨酸，O＝鸟氨酸，V＝缬氨酸，E＝谷氨酸。通过固相合成法合成具有七个氨基酸的多肽，该多肽自组装形成包裹盐酸阿霉素的多肽水凝胶。本发明专利技术的多肽具有良好的生物相容性和生物可降解性，机械性能好，在包裹药物后可以达到缓释效果，对PH具有较高的敏感性，通过肿瘤部位原位注射方式将载药凝胶注射到肿瘤周围，该载药多肽水凝胶在酸性肿瘤微环境的刺激下，可以实现抗肿瘤药物的靶向缓释给药，提高化疗效果，提高抗肿瘤效果，降低毒副作用。毒副作用。毒副作用。

【技术实现步骤摘要】
可以自组装形成PH响应载药水凝胶的多肽、水凝胶及其制备方法和用途


[0001]本专利技术涉及生物医药材料及其制备方法和用途，特别涉及可以自组装形成PH响应载药水凝胶的多肽、水凝胶及其制备方法和用途。

技术介绍

[0002]目前治疗癌症主要有手术治疗、化疗、放疗等。其中传统的化学药物治疗存在许多的问题和不足，如代谢速度快、生物利用度差、药物吸收和分布不理想，选择性差、毒副作用大等，一直是癌症联合治疗的局限性。为了克服上述缺点，越来越多的新型载药材料被研发出来。多肽水凝胶作为一种特殊的药物载体，由于其优异的生物相容性、可控的降解性和缓控性，引起了人们的极大关注。可注射多肽水凝胶可以通过注射器或导管直接注射进入体内，作为局部和持续给药的载体，具有良好的注射性和延缓药物释放，提高治疗效果的作用。
[0003]随着研究探索的不断深入，智能响应型多肽水凝胶收到人们极大青睐。智能响应型多肽水凝胶是指在受到外界物理或化学刺激(如PH、温度、溶剂、压力、光照和离子强度)下，能够发生溶胶
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凝胶转变。因此，根据肿瘤微环境特性(例如PH较低，谷胱甘肽含量较高)，设计能够在肿瘤微环境中智能响应的多肽水凝胶载体，在抗癌化学药物控制释放方面有着广阔的应用前景。

技术实现思路

[0004]专利技术目的：本专利技术目的是提供具有较好生物相容性、降解性、机械性能等的可以自组装形成PH响应载药水凝胶的多肽和水凝胶。
[0005]本专利技术的另一目的是提供所述具有较好生物相容性、降解性、机械性能等的可以自组装形成PH响应载药水凝胶的多肽和水凝胶的制备方法和用途。
[0006]技术方案：本专利技术提供一种可以自组装形成PH响应载药水凝胶的多肽，多肽序列为：FOVVVEF，其中，F＝苯丙氨酸，O＝鸟氨酸，V＝缬氨酸，E＝谷氨酸。
[0007]一种PH响应自组装载药多肽水凝胶的制备方法，将权利要求1所述多肽溶于去离子水中，涡旋至充分溶解，调节PH，于室温下静置成胶。
[0008]进一步地，所述成胶浓度为15
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20mg/ml。所述装载药为盐酸阿霉素。所述在室温下静置时间为20min
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1day。
[0009]所述的可以自组装形成PH响应载药水凝胶的多肽的制备方法，包括如下步骤：
[0010](1)将第一个氨基酸共价连接到树脂上：
[0011]称取C端第一个氨基酸(4mmol)于50mL的离心管中，加入20mL DMF将其溶解，然后加入2mL DIEA(12mmol)振荡摇匀1min，待溶液澄清后加入反应器中，将反应器置于30℃的摇床中反应。然后用3倍树脂体积的DMF洗涤四次，抽干待用。
[0012](2)去保护：
[0013]将上述合成的连有首个氨基酸的树脂置于反应器中，并加入30mL 20％的哌啶/DMF溶液浸没树脂，放在脱色摇床上摇晃20min，以此脱去树脂上的Fmoc保护基团。脱完保护后用DMF洗涤四次，抽干。取少量树脂用茚三酮法检测，树脂显色(蓝色或蓝紫色)，说明脱保护成功。
[0014](3)激活和交联：
[0015]称取第二个氨基酸(4mmol)和0.541g(4mmol)HOBt于50mL的离心管中，加入25mL的DMF将其溶解，然后加入0.622mL(4mmol)DIC振荡摇匀1min，待溶液澄清后加入反应器中，将反应器置于30℃的摇床中反应。1h后，取少量树脂用茚三酮法检测，若树脂为无色，说明反应完全；若树脂显色，说明缩合不完全，继续反应。采用活化剂HBTU和HOBt活化下一个氨基上的羧基，与树脂上的氨基交联，形成肽键；
[0016](4)重复(2)和(3)，反复循环添加单体氨基酸，按照FOVVVEF序列的顺序从右到左合成，直到合成完成；
[0017](5)乙酰化：
[0018]采用碱性溶剂20％哌啶去除氨基上的Fmoc，暴露出氨基，加入2ml20％乙酸酐和200微升DIEA，反应30min。
[0019](6)洗脱和脱保护：
[0020]将上述合成的多肽树脂于反应器中加入95切割液(TFA/TIS/EDT/H2O＝95/2/2/1)(每1g树脂加10mL切割液)，于0℃振荡反应0.5h，逐渐升温至室温，在室温下反应2h，抽滤除去树脂，用少量裂解液洗涤树脂，将冲洗液与裂解液合并，倒入装有冰乙醚的离心管中，待沉淀析出后用冷冻离心机于4℃，7000rmp下离心5min，除去上清液，重复上述步骤，离心沉降四次，得到多肽粗品。将所得粗品用HPLC分析纯化，冻干保存。
[0021]所述的可以自组装形成PH响应载药水凝胶在制备载抗癌药水凝胶中的用途。
[0022]有益效果：本专利技术与现有技术相比，具有如下优势：
[0023]1、本专利技术的多肽，多肽序列长度短，合成简单，多肽水凝胶制备方便。
[0024]2、本专利技术的多肽具有良好的生物相容性和生物可降解性，机械性能好，在包裹药物后可以达到缓释效果，是具有潜力的药物递送载体。
[0025]3、本专利技术提供的PH响应多肽水凝胶，对PH具有较高的敏感性，通过肿瘤部位原位注射方式将载药凝胶注射到肿瘤周围，该载药多肽水凝胶在酸性肿瘤微环境的刺激下，可以实现抗肿瘤药物的靶向缓释给药，提高化疗效果，延长治疗时间，减少抗肿瘤药物对正常组织的毒副作用。
附图说明
[0026]图1为载药水凝胶不同载药浓度不同PH下的累积释放图；
[0027]图2为FOVVVEF序列肽水凝胶CD光谱图；
[0028]图3为PH＝5.8FOVVVEF透射电镜图；
[0029]图4为PH＝7.4FOVVVEF透射电镜图。
具体实施方式
[0030]实施例1(请将下列原辅料的具体用量补充上)
[0031]本专利技术所述的多肽合成方法为常规的固相合成法，即以不溶性树脂作为固相载体，将多肽链的C末端固定在树脂上，从C端到N端依次缩合氨基酸延长多肽链的方法。
[0032]1.多肽合成步骤
[0033]第一步，将第一个氨基酸共价连接到树脂上
[0034]称取2g 2
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CTC树脂(取代度0.9mmol/g)至150mL的反应器中，用50mLDCM浸泡2h使其溶胀，然后用3倍树脂体积的DMF洗涤树脂，抽干，如此重复四次，将树脂抽干备用。称取C端第一个氨基酸(4mmol)于50mL的离心管中，加入20mL DMF将其溶解，然后加入2mL DIEA(12mmol)振荡摇匀1min，待溶液澄清后加入反应器中，将反应器置于30℃的摇床中反应。2h后加入2mL甲醇继续反应0.5h进行封端，抽掉反应液后，用3倍树脂体积的DMF洗涤四次，抽干待用
[0035]加入缩合剂HBTU和HOBt，使被保护氨基酸羧基端与树脂形成共脂以完成氨基酸的固定；
[0036]第二步，去保护
[0037]采用碱性溶剂20％哌啶去除氨基上的Fmoc，暴露出氨基；
[0038]第三步本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种可以自组装形成PH响应载药水凝胶的多肽，其特征在于：多肽序列为：FOVVVEF，其中，F＝苯丙氨酸，O＝鸟氨酸，V＝缬氨酸，E＝谷氨酸。2.一种PH响应自组装载药多肽水凝胶的制备方法，其特征在于：将权利要求1所述多肽溶于去离子水中，涡旋至充分溶解，调节PH，于室温下静置成胶。3.根据权利要求2所述的PH响应自组装载药多肽水凝胶的制备方法，其特征在于：所述成胶浓度为15
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20mg/ml。4.根据权利要求2所述的PH响应自组装载药多肽水凝胶的制备方法，其特征在于：所述装载药为盐酸阿霉素。5.根据权利要求2所述的PH响应自组装载药多肽水凝胶的制备方法，其特征在于：所述在室温下静置时间为20min
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1day。6.权利要求1所述的可以自组装形成PH响应载药水凝胶的多肽的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)将第...

【专利技术属性】
技术研发人员：葛亮，朱颖，沈娟，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：