利用内生土霉菌生产7-(3-丁烯酰胺基)-八氢苯并喹啉乙酸酯的培养基及其应用制造技术

本发明专利技术公开了利用内生土霉菌生产7

【技术实现步骤摘要】
利用内生土霉菌生产7
‑
(3
‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯的培养基及其应用


[0001]本专利技术涉及培养基
，涉及利用内生土霉菌生产7
‑
(3
‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯的培养基及其应用，具体涉及利用红海榄内生土霉菌生产7
‑
(3
‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯的培养基，及使用上述培养基发酵生产生物碱类候选保肝药物7
‑
(2
‑
二甲基
‑3‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯的方法。

技术介绍

[0002]药用植物生长周期长，易受到气候变化影响，其中的内生菌与植物具有“互惠共生”的关系，内生菌有着与药用植物本体相似的生物代谢途径，被认为是快速富集药源分子的重要手段和方式，对其相关次生代谢产物进行深入研究，可以为人类新药的发现、筛选和研发提供广阔的前景。
[0003]红海榄内生土霉菌(Aspergillus terreus，YWG
‑
179)是半知菌类、丝孢目、丛梗孢科、土霉属真菌，是从药用植物红海榄气生根中分离纯化获得的内生菌。红海榄是红树林科植物的一种，多分布生长于亚热带海岸滩涂地区，具有海洋和陆生植物的双重特质。红海榄内生土霉菌经过发酵培养可以获得多种次生代谢产物，主要包括生物碱类、多烯类、倍半萜类、鞘氨酸类化合物等天然物质。
[0004]肝脏是人体中重要的代谢器官、解毒器官、消化器官和免疫防御器官，具有复杂多样的生理生化功能，是人体新陈代谢的枢纽。肝病是在肝脏中发生的急、慢性病变，是一种对机体危害性很大的疾病。常见的肝病包括：酒精肝、脂肪肝、病毒性肝炎、肝硬化、肝脓肿等，各类肝病是肝癌发生发展的使动因素。近年来各种肝脏疾病发病率呈逐年递增的趋势，保护肝脏健康备受大众关注。临床常见的肝病多数属于慢性疾病，治疗周期长，存在反复性，需要长期服药。随着现代科学技术的不断发展，缩减了治疗肝脏疾病的化学合成药物的研发和上市周期，但由于肝病临床多样性和病理机制复杂性，化学合成药物易产生耐药性、药物失效及毒副作用等负面影响。中药天然化合物疗效确切，来源丰富，无明显毒副作用，疗程短见效快不易产生药物耐受性。目前，由中药天然单体化合物制备而成的保肝护肝药物较少，寻找开发一种保肝中药化合物，具有广阔的应用前景。现已有相关的研究，例如中国专利申请号CN201810793903.8公开了7
‑
(2,2
‑
二甲基
‑3‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯喹啉乙酸酯在制备治疗肝病药物的应用，其中的7
‑
(2,2
‑
二甲基
‑3‑
丁烯酰胺基)
‑
2,4
‑
二甲基
‑5‑
氧代
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯是一种生物碱类候选保肝药物，即7
‑
(2,2
‑
二甲基
‑3‑
丁烯酰胺基)
‑
2,4
‑
二甲基
‑5‑
氧代
‑
1,2,3,4,4a,5,6,10b
‑
八氢苯并[f]‑1‑
喹啉基
‑
乙酸酯[7
‑
(2,2
‑
dimethylbut
‑3‑
enamido)
‑
2,4
‑
dimethyl
‑5‑
oxo
‑
1,2,3,4,4a,5,6,10b
‑
octahydrobenzo[f]quinolin
‑1‑
yl acetate,DQA]，分子式为C
23
H
30
N2O4，相对分子量为398，涉及7
‑
(2,2
‑
二甲基
‑3‑
丁烯酰胺基))
‑
八氢苯喹啉乙酸酯在制备治疗或预防肝脏损伤的药物中的用途，研究发现，7
‑
(2,2
‑
二甲基
‑3‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯喹啉乙酸酯对体外肝细胞损伤具有显著的保护作用，可用于制备保肝护肝的药物，还可用于制备肝细胞损伤保护的药物；对体内肝脏
组织器官损伤具有显著的修复作用，可用于制备治疗或预防肝脏疾病的药物，适于大规模推广，具有广阔的开发应用前景。
[0005]但是，7
‑
(2
‑
二甲基
‑3‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯在初始发酵培养的条件下，产率和产量相当低，已经成为制约其用于候选保肝药物临床前研发的瓶颈。因此，改善和优化土霉菌的发酵培养方法，提升7
‑
(2
‑
二甲基
‑3‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯的产量是重中之重。

技术实现思路

[0006]针对现有技术中7
‑
(2
‑
二甲基
‑3‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯在初始发酵培养的条件下，产率和产量相当低的问题，本专利技术提供了利用内生土霉菌生产7
‑
(3
‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯的培养基及其应用，具体是利用红海榄内生土霉菌生产7
‑
(3
‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯的培养基，及使用上述培养基发酵生产生物碱类候选保肝药物7
‑
(2
‑
二甲基
‑3‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯的方法。本专利技术所述的培养基成分简单，价格低廉，无需特殊设备，配制方便，可用于发酵培养红海榄内生土霉菌生产7
‑
(2
‑
二甲基
‑3‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯，并能显著提高其产量。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术所采用以下技术方案：
[0008]利用内生土霉菌生产7
‑
(3
‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯的培养基，具体是利用红海榄内生土霉菌生产7
‑
(3
‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯的培养基，由以下浓度的成分制成：
[0009]甘蔗糖蜜70
‑
150g/L、蔗糖40
‑
80g/L、磷酸氢二钠0.25
‑
1.本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.利用内生土霉菌生产7
‑
(3
‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯的培养基，其特征在于：具体是利用红海榄内生土霉菌生产7
‑
(3
‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯的培养基，由以下浓度的成分制成：甘蔗糖蜜70
‑
150g/L、蔗糖40
‑
80g/L、磷酸氢二钠0.25
‑
1.25g/L、氯化钠0.50
‑
1.50g/L、硝酸钾2.0
‑
5.0g/L、硫酸镁0.25
‑
1.0g/L、硫酸亚铁0.005
‑
0.02g/L、硫酸锌0.005
‑
0.02g/L，用蒸馏水定容至1L，调节pH至4.0
‑
4.5，121℃灭菌20
‑
30分钟得到。2.根据权利要求1所述的利用内生土霉菌生产7
‑
(3
‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯的培养基，其特征在于：由以下浓度的成分制成：甘蔗糖蜜100
‑
125g/L、蔗糖56.0
‑
71.1g/L、磷酸氢二钠1.0
‑
1.25g/L、氯化钠0.5
‑
0.625g/L、硝酸钾3.5
‑
4.375g/L、硫酸镁0.5
‑
0.625g/L、硫酸亚铁0.01
‑
0.0125g/L、硫酸锌0.01
‑
0.0125g/L，用蒸馏水定容至1L，调节pH至4.1
‑
4.4，121℃灭菌24
‑
27分钟得到。3.根据权利要求2所述的利用内生土霉菌生产7
‑
(3
‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯的培养基，其特征在于：由以下浓度的成分制成：甘蔗糖蜜125g/L、蔗糖56.0g/L、磷酸氢二钠1.0g/L、氯化钠0.50g/L、硝酸钾3.5g/L、硫酸镁0.625g/L、硫酸亚铁0.0125g/L、硫酸锌0.0125g/L，用蒸馏水定容至1L，调节pH至4.3，121℃灭菌25分钟得到。4.权利要求1
‑
3任一项所述的利用内生土霉菌生产7
‑
(3
‑
丁烯酰胺基)
‑
八氢苯并喹啉乙酸酯的培养基的应用，其特征在于：具体是采用权利要求1
‑
3任一项所述的培养基...

【专利技术属性】
技术研发人员：玉万国，龚杨轩，
申请(专利权)人：广西科技大学，
类型：发明
国别省市：