抗GAL3抗体及其用途制造技术

本文公开了特异性结合至Gal3的抗体及其使用方法。在一些实施方式中，本文还描述了用特异性结合至Gal3的抗体诱导免疫激活或促进T细胞或天然杀伤细胞增殖的方法。本文还公开了用特异性结合至Gal3的抗体减少组织中纤维化或其倾向的方法和组合物。在一些情况下，抗Gal3抗体还破坏Gal3和TIM

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗GAL3抗体及其用途
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2019年1月30日提交的美国临时申请系列号62/798945和2019年1月30日提交的美国临时申请系列号62/798949的权益，其中每个通过引用以其整体并入本文。
[0003]序列表的参考
[0004]本申请与电子格式的序列表一起提交。序列表以题目为Seq List IMMUT003.TXT的文件的提供，该文件创建并且最后在2020年1月29日保存，大小为146561字节。序列表的电子格式中的信息通过引用以其整体并入本文。


[0005]在一些实施方式中，本文公开了特异性结合至Gal3并且破坏Gal3和TIM
‑
3之间的相互作用且促进T细胞或天然杀伤(NK)细胞增殖的抗体(或“抗Gal3抗体”)。本文还公开了利用抗体以引起免疫应答的方法和治疗方法。本文还公开了通过使组织与特异性结合至Gal3的抗体接触来减少组织中纤维化或其倾向的方法。本文还描述了在减少组织中一种或多种纤维化生物标志物表达的条件下，通过特异性结合至Gal3的抗体来破坏Gal3
‑
TIM
‑
3相互作用的方法。

技术介绍

[0006]半乳糖凝集素
‑
3(Gal3)是凝集素或碳水化合物结合蛋白，对β
‑
半乳糖苷具有特异性。在人细胞中，Gal3在细胞核、细胞质、细胞表面中以及在细胞外空间中表达并且可以找到。T
‑
细胞免疫球蛋白和含有结构域的粘蛋白
‑
3(TIM
‑
3)是在免疫细胞比如T细胞、树突细胞、NK细胞和单核细胞上表达的蛋白质。

技术实现思路

[0007]在一些实施方式中，本文公开了特异性结合至Gal3并且破坏Gal3和TIM
‑
3之间的相互作用的抗体(或“抗Gal3抗体”)。在一些实施方式中，本文公开了特异性结合至Gal3并且促进T细胞或天然杀伤细胞增殖的抗体。在一些实施方式中，本文还公开了利用抗体引起免疫应答的方法和治疗方法。
[0008]本文提供的本专利技术的实施方式通过以下编号的替代方式进行描述：
[0009]1.一种诱导免疫激活的方法，其包括：
[0010]在破坏Gal3和TIM
‑
3之间的相互作用的条件下，使包括Gal3
‑
表达细胞和TIM
‑
3表达细胞的多种细胞与抗体接触，其中抗体特异性结合至Gal3，其中Gal3
‑
表达细胞在结合至抗体时表达诱导免疫激活的细胞因子，并且其中抗体不是IMT001。
[0011]2.根据替代方式1所述的方法，其中细胞因子是干扰素。
[0012]3.根据替代方式2所述的方法，其中干扰素是IFNγ。
[0013]4.根据替代方式3所述的方法，其中IFNγ产生是通过同种型抗体的150％、160％、170％、180％、190％、200％或更多的IFNγ产生。
[0014]5.根据替代方式1所述的方法，其中细胞因子是白细胞介素。
[0015]6.根据替代方式5所述的方法，其中白细胞介素是IL
‑
2。
[0016]7.根据替代方式1
‑
6的任一项所述的方法，其中免疫激活包括CD3+T淋巴细胞、CD4+T辅助细胞、CD8+细胞毒素T细胞、天然杀伤细胞或其组合的增殖。
[0017]8.根据替代方式1
‑
7的任一项所述的方法，其中免疫激活包括多种细胞内M1巨噬细胞群的增加。
[0018]9.根据替代方式1
‑
8的任一项所述的方法，其中免疫激活包括多种细胞内M2巨噬细胞群的减少。
[0019]10.一种促进T细胞或天然杀伤(NK)细胞增殖的方法，其包括：
[0020]在实现多种细胞中T细胞和/或NK细胞增殖的条件下，使包括T细胞、NK细胞和Gal3
‑
表达细胞的多种细胞与抗体接触，其中抗体特异性结合至Gal3，并且其中抗体不是IMT001。
[0021]11.根据替代方式10所述的方法，其中多种细胞进一步包括TIM
‑
3表达细胞。
[0022]12.根据替代方式11所述的方法，其中抗体进一步破坏Gal3和TIM
‑
3的相互作用。
[0023]13.一种诱导免疫激活的方法，其包括：
[0024]在破坏Gal3和TIM
‑
3之间的相互作用的条件下，将包括Gal3
‑
表达细胞和TIM
‑
3表达细胞的多种细胞与抗体接触，其中抗体特异性结合至Gal3，并且其中Gal3
‑
TIM
‑
3相互作用被减少至小于70％、小于60％、小于59％、小于50％、小于40％、小于34％、小于30％、小于20％、小于14％、小于10％、小于7％、小于5％、小于4％或小于1％。
[0025]14.根据替代方式13所述的方法，其中相互作用发生在选自区域145
‑
168、160
‑
177或165
‑
184的Gal3的一个或多个残基处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:1的位置145
‑
168、160
‑
177或165
‑
184。
[0026]15.根据替代方式13所述的方法，其中相互作用发生在选自区域149
‑
156、152
‑
168、163
‑
169、163
‑
177或163
‑
171的Gal3的一个或多个残基处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:1的位置149
‑
156、152
‑
168、163
‑
169、163
‑
177或163
‑
171。
[0027]16.根据替代方式13
‑
15的任一项所述的方法，其中相互作用发生在选自区域91
‑
111或82
‑
111的TIM
‑
3的一个或多个残基处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置91
‑
111或82
‑
111。
[0028]17.根据替代方式13
‑
15的任一项所述的方法，其中相互作用发生在选自区域91
‑
111、107
‑
117、96
‑
102、100
‑
106或92
‑
119的TIM
‑
3的一个或多个残基处，本文残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置91
‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种诱导免疫激活的方法，包括：在破坏Gal3和TIM
‑
3之间的相互作用的条件下，使包括Gal3表达细胞和TIM
‑
3表达细胞的多种细胞与抗体接触，其中抗体特异性结合至Gal3，其中Gal3表达细胞在结合至抗体时表达诱导免疫激活的细胞因子，并且其中抗体不是IMT001。2.根据权利要求1所述的方法，其中细胞因子是干扰素。3.根据权利要求2所述的方法，其中干扰素是IFNγ。4.根据权利要求3所述的方法，其中IFNγ产生是通过同种型抗体的IFNγ产生的150％、160％、170％、180％、190％、200％或更多。5.根据权利要求1所述的方法，其中细胞因子是白细胞介素。6.根据权利要求5所述的方法，其中白细胞介素是IL
‑
2。7.根据权利要求1
‑
6的任一项所述的方法，其中免疫激活包括CD3+T淋巴细胞、CD4+T辅助细胞、CD8+细胞毒素T细胞、天然杀伤细胞或其组合的增殖。8.根据权利要求1
‑
7的任一项所述的方法，其中免疫激活包括多种细胞内M1巨噬细胞群的增加。9.根据权利要求1
‑
8的任一项所述的方法，其中免疫激活包括多种细胞内M2巨噬细胞群的减少。10.一种促进T细胞或天然杀伤(NK)细胞增殖的方法，其包括：在影响多种细胞中T细胞和/或NK细胞增殖的条件下，使包括T细胞、NK细胞和Gal3表达细胞的多种细胞与抗体接触，其中抗体特异性结合至Gal3，并且其中抗体不是IMT001。11.根据权利要求10所述的方法，其中多种细胞进一步包括TIM
‑
3表达细胞。12.根据权利要求11所述的方法，其中抗体进一步破坏Gal3和TIM
‑
3的相互作用。13.一种诱导免疫激活的方法，其包括：在破坏Gal3和TIM
‑
3之间的相互作用的条件下，使包括Gal3表达细胞和TIM
‑
3表达细胞的多种细胞与抗体接触，其中抗体特异性结合至Gal3，并且其中Gal3
‑
TIM
‑
3相互作用被减少至小于70％、小于60％、小于59％、小于50％、小于40％、小于34％、小于30％、小于20％、小于14％、小于10％、小于7％、小于5％、小于4％或小于1％。14.根据权利要求13所述的方法，其中相互作用发生在选自区域145
‑
168、160
‑
177或165
‑
184的Gal3的一个或多个残基处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:1的位置145
‑
168、160
‑
177或165
‑
184。15.根据权利要求13所述的方法，其中相互作用发生在选自区域149
‑
156、152
‑
168、163
‑
169、163
‑
177或163
‑
171的Gal3的一个或多个残基处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:1的位置149
‑
156、152
‑
168、163
‑
169、163
‑
177或163
‑
171。16.根据权利要求13
‑
15的任一项所述的方法，其中相互作用发生在选自区域91
‑
111或82
‑
111的TIM
‑
3的一个或多个残基处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置91
‑
111或82
‑
111。17.根据权利要求13
‑
15的任一项所述的方法，其中相互作用发生在选自区域91
‑
111、107
‑
117、96
‑
102、100
‑
106或92
‑
119的TIM
‑
3的一个或多个残基处，此处残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置91
‑
111、107
‑
117、96
‑
102、100
‑
106或92
‑
119。18.根据权利要求13
‑
17的任一项所述的方法，其中TIM
‑
3是人TIM
‑
3。
19.根据权利要求1
‑
18的任一项所述的方法，其中Gal3表达细胞是肿瘤细胞。20.根据权利要求1
‑
19的任一项所述的方法，其中多个细胞位于肿瘤微环境(TME)内。21.根据权利要求1
‑
20的任一项所述的方法，其中抗体诱导TME内肿瘤细胞的减少。22.根据权利要求1
‑
21的任一项所述的方法，其中多种细胞进一步包括肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)。23.根据权利要求1
‑
22的任一项所述的方法，其中多种细胞进一步包括CD3+T淋巴细胞、CD4+T辅助细胞、CD8+细胞毒素T细胞或其组合。24.根据权利要求1、10、13或22的任一项所述的方法，其中接触进一步诱导TIL增殖。25.根据权利要求1、10、13或23的任一项所述的方法，其中接触进一步诱导CD3+T淋巴细胞、CD4+T辅助细胞、CD8+细胞毒素T细胞或其组合的增殖。26.根据权利要求1、10、13或22
‑
25的任一项所述的方法，其中接触进一步包括M1巨噬细胞增殖的增加。27.根据权利要求1、10、13或22
‑
26的任一项所述的方法，其中接触进一步包括TME内M2巨噬细胞群的减少。28.根据权利要求1
‑
27的任一项所述的方法，其中抗体结合至对应于SEQ ID NO:1的残基1
‑
20的Gal3区域内的至少一个氨基酸残基。29.根据权利要求1
‑
27的任一项所述的方法，其中抗体结合至对应于SEQ ID NO:1的残基41
‑
91的Gal3区域内的至少一个氨基酸残基。30.根据权利要求1
‑
27或29的任一项所述的方法，其中抗体结合至对应于SEQ ID NO:1的残基41
‑
71的Gal3区域内的至少一个氨基酸残基。31.根据权利要求1
‑
27或29的任一项所述的方法，其中抗体结合至对应于SEQ ID NO:1的残基71
‑
91的Gal3区域内的至少一个氨基酸残基。32.根据权利要求1
‑
31的任一项所述的方法，其中抗体结合至肽_1、肽_4、肽_5、肽_6、肽_7或肽8内的至少一个氨基酸残基。33.根据权利要求1
‑
32的任一项所述的方法，其中抗体包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的K
D
。34.根据权利要求1
‑
33的任一项所述的方法，其中抗体包括人源化抗体。35.根据权利要求1
‑
34的任一项所述的方法，其中抗体包括全长抗体或其结合片段。36.根据权利要求1
‑
35的任一项所述的方法，其中抗体包括双特异性抗体或其结合片段。37.根据权利要求1
‑
36的任一项所述的方法，其中抗体包括单价Fab
’
、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。38.根据权利要求1
‑
37的任一项所述的方法，其中抗体包括IgG框架。39.根据权利要求1
‑
38的任一项所述的方法，其中抗体包括IgG1、IgG2或IgG4框架。40.根据权利要求1
‑
39的任一项所述的方法，其中抗体进一步包括Fc突变。41.根据权利要求1
‑
33或35
‑
40的任一项所述的方法，其中抗体包括嵌合抗体。42.根据权利要求1、10或13的任一项所述的方法，其进一步包括在接触步骤之前向受试者施用抗体。
43.根据权利要求42所述的方法，其中受试者被诊断具有癌症。44.根据权利要求43所述的方法，其中癌症是实体瘤。45.根据权利要求44所述的方法，其中癌症是乳腺癌、结肠直肠癌、肾癌、肝癌或肺癌。46.根据权利要求43所述的方法，其中癌症是血液系统恶性肿瘤。47.根据权利要求43
‑
46的任一项所述的方法，其中癌症是转移性癌症。48.根据权利要求43
‑
46的任一项所述的方法，其中癌症是复发或难治癌症。49.根据权利要求42
‑
48的任一项所述的方法，其中抗体被配制用于全身施用。50.根据权利要求42
‑
49的任一项所述的方法，其中抗体被配制用于肠胃外施用。51.根据权利要求42
‑
50的任一项所述的方法，其中抗体与另外治疗剂组合施用。52.根据权利要求51所述的方法，其中抗体和另外治疗剂同时施用。53.根据权利要求51所述的方法，其中抗体和另外治疗剂依次施用。54.根据权利要求53所述的方法，其中抗体在施用另外治疗剂之前施用。55.根据权利要求53所述的方法，其中抗体在施用另外治疗剂之后施用。56.根据权利要求51
‑
55的任一项所述的方法，其中另外治疗剂包括免疫检查点调节剂。57.根据权利要求51
‑
55的任一项所述的方法，其中另外治疗剂包括化疗剂、靶向治疗剂、激素治疗剂或基于干细胞的治疗剂。58.根据前述权利要求任一项所述的方法，其中受试者是人。59.根据权利要求58所述的方法，其中抗体在手术之前或之后施用。60.根据权利要求58所述的方法，其中抗体以与辐射疗法结合、在辐射疗法之前或在辐射疗法之后施用。61.根据前述权利要求任一项所述的方法，其中抗体的K
D
高于抗体IMT001的K
D
。62.一种减少组织中纤维化或其倾向的方法，其包括：在使得组织中纤维化生物标志物的表达水平降低的条件下，使组织与特异性结合Gal3抗体的抗体接触。63.根据权利要求62所述的方法，其中组织进一步包括TIM
‑
3表达细胞。64.根据权利要求63所述的方法，其中抗体进一步破坏Gal3和TIM
‑
3的相互作用。65.根据权利要求63所述的方法，其中抗体不破坏Gal3和TIM
‑
3的相互作用。66.根据权利要求62
‑
65的任一项所述的方法，其中至少一种纤维化生物标志物包括α
‑
平滑肌肌动蛋白(α
‑
SMA)。67.根据权利要求62
‑
65的任一项所述的方法，其中至少一种纤维化生物标志物包括纤连蛋白。68.根据权利要求62
‑
65的任一项所述的方法，其中至少一种纤维化生物标志物包括α
‑
平滑肌肌动蛋白(α
‑
SMA)和纤连蛋白。69.根据权利要求62
‑
68的任一项所述的方法，其中组织是肾组织或肝组织。70.根据权利要求62
‑
68的任一项所述的方法，其中组织选自由以下组成的组：肝组织、肾组织、皮肤组织、肺组织、心脏组织、脑组织、肠组织、骨髓组织和软组织。71.根据权利要求62
‑
70的任一项所述的方法，其中用抗体治疗的组织中至少一种纤维化生物标志物的表达小于用mIgG2b抗体治疗的对照组织中至少一种纤维化生物标志物的
表达。72.根据权利要求62
‑
71的任一项所述的方法，其中抗体导致降低组织中细胞外基质蛋白的积累。73.根据权利要求72所述的方法，其中细胞外基质蛋白包括胶原。74.根据权利要求73所述的方法，其中组织包括产生胶原的细胞。75.根据权利要求74所述的方法，其中产生胶原的细胞是成纤维细胞。76.根据权利要求75所述的方法，其中成纤维细胞由纤维发生细胞因子激活。77.根据权利要求76所述的方法，其中纤维发生细胞因子是TGF

【专利技术属性】
技术研发人员：孙东旭，王岩，吴奕楠，C，
申请(专利权)人：真和制药有限公司，
类型：发明
国别省市：