抗体以及阻断VISTA及其结合配偶体的相互作用制造技术

本文公开了与LRIG1特异性结合的抗体及其使用方法。在一些实施方案中，本文还描述了用与LRIG1特异性结合的抗体调节免疫系统活性或促进免疫细胞增殖的方法。促进免疫细胞增殖的方法。促进免疫细胞增殖的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗体以及阻断VISTA及其结合配偶体的相互作用
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2019年8月29日提交的美国临时专利申请号62/893,482的优先权的权益，其全部内容特此通过引用并入本文。
[0003]生物样品保藏声明
[0004]在一些实施方案中，与LRIG1结合并阻断VISTA结合的抗体，其于____以编号____根据《布达佩斯条约》保藏在美国类型培养物保藏中心(ATCC)。这些抗体的名称为：802.4H6.2D11、802.3D4.2D4、802.2F4.2A3和802.3G8.2A3。
[0005]这些保藏是根据《国际承认用于专利程序的微生物保存布达佩斯条约及其相关法规》(《布达佩斯条约》)的规定进行的。这确保了自保藏之日起30年的保藏维持期。ATCC将根据《布达佩斯条约》的条款，并根据申请人与ATCC之间的协议提供保藏，该协议确保在相关美国专利发布时或向公众开放任何美国或外国专利申请时(以先发生者为准)，向公众永久且无限制地提供保藏，并确保根据《美国法典》第35编第122节和其依据的《专利局长规则》(包括《联邦判例汇编》第37卷)向美国专利和商标专员确定有权获得保藏。保藏的生物材料的可用性不应被解释为违反任何政府根据其专利法授予的权利而许可实施本专利技术。
[0006]序列表的参考
[0007]本申请与电子格式的序列表一起提交。序列表以题目为SeqListingIMMUT014WO.TXT的文件提供，该文件创建并且最后修改于2020年8月27日，大小为129,585字节。电子序列表的信息的全部内容通过引用并入本文。


[0008]本公开的方面涉及与LRIG1特异性结合的抗体及其使用方法。在一些实施方案中，本文还描述了用与LRIG1特异性结合的抗体来调节免疫系统活性或促进免疫细胞增殖的方法。

技术介绍

[0009]LRIG1(富含亮氨酸的重复序列和免疫球蛋白样结构域蛋白1)是一种具有肿瘤抑制功能的跨膜蛋白，也与正常细胞的增殖和静止有关。VISTA(T细胞激活的V
‑
结构域Ig抑制因子)是跨膜免疫检查点蛋白，其在广泛的白血细胞中表达，是一种结合。VISTA活性与许多免疫相关疾病有关，包括自体免疫性障碍和炎性障碍以及癌症。

技术实现思路

[0010]对免疫疾病和癌症(包括由LRIG1和/或VISTA调控的那些免疫疾病和癌症)的治疗干预存在持久的需求。
[0011]在一些实施方案中，本文公开了抗LRIG1抗体和使用其调节免疫功能(例如诱导或抑制免疫激活)的方法。在一些实施方案中，本文进一步公开了使用抗LRIG1抗体促进免疫细胞(例如树突细胞、B细胞、细胞毒性T细胞、调节性T细胞和/或天然杀伤细胞)增殖的方
法。在一些实施方案中，本文公开的抗LRIG1抗体对免疫功能的调节包括激活或抑制免疫功能。在一些实施方案中，免疫功能的激活包括上调免疫细胞(诸如B细胞和/或细胞毒性T细胞)的活性。在一些实施方案中，免疫功能的抑制包括下调免疫细胞的活性，或上调免疫抑制细胞(诸如调节性T细胞)的增殖和/或功能。
[0012]在一些实施方案中，本文公开了一种抗原结合多肽，其中所述多肽表现出与LRIG1蛋白(SEQ ID NO:2)的特异性结合，并且其中所述多肽与存在于选自由下述组成的组的LRIG1的一个或多个区域上的表位结合：从LRIG1蛋白的N末端到C末端的位置1
‑
564或位置655
‑
1093的氨基酸残基的任何氨基酸序列。在一些实施方案中，所述多肽与存在于从LRIG1蛋白的N末端到C末端的位置674
‑
714的氨基酸残基的氨基酸序列内的表位结合。在一些实施方案中，所述多肽与存在于从LRIG1蛋白的N末端到C末端的位置704
‑
744的氨基酸残基的氨基酸序列内的表位结合。在一些实施方案中，所述多肽与从N末端到C末端的在位置1
‑
564或位置655
‑
1093之间的LRIG1的未确定表位结合。在一些实施方案中，所述抗体包括全长抗体或其片段。在一些实施方案中，所述抗体包括双特异性抗体或其结合片段。在一些实施方案中，所述抗体包括单价Fab
’
、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。在一些实施方案中，所述多肽包括选自SEQ ID NO:84
‑
145、149
‑
187或242
‑
254的至少一个互补决定区(CDR)。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:84、87、90、93、96、99、102、105、108、111、114、117、120、123、126、129、134、138、143和242的至少一个重链CDR1。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:85、88、91、94、97、100、103、106、109、112、115、118、121、124、127、130、132、136、139、141、142、144和243的至少一个重链CDR2。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:86、89、92、95、98、101、104、107、110、113、116、119、122、125、128、131、133、135、137、140、145和244的至少一个重链CDR3。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:149、152、154、157、163、166、168、171、172、173、175、178、181、183、187、246、251和253的至少一个轻链CDR1。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:150、155、158、160、164、169、176、179、185、247和249的至少一个轻链CDR2。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:151、153、156、159、161、162、165、167、170、174、177、180、182、184、186、248、250和252的至少一个轻链CDR3。在一些实施方案中，所述抗体或多肽包括至少一个选自SEQ ID NO:84
‑
145或242
‑
245的重链CDR。在一些实施方案中，所述抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:147
‑
187或246
‑
254的至少一个轻链CDR。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括根据图9的3个重链CDR和3个轻链CDR。在一些实施方案中，所述抗体包括IgG框架。在一些实施方案中，所述抗体包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。在一些实施方案中，所述抗体包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种抗原结合多肽，其中所述多肽表现出与LRIG1蛋白(SEQ ID NO:2)的特异性结合，并且其中所述多肽与存在于LRIG1的一个或多个区域上的表位结合，所述表位选自LRIG1蛋白的N末端到C末端的位置1至564或位置655至1093的氨基酸残基的任何氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于LRIG1蛋白的N末端至C末端的位置674至714的氨基酸残基的氨基酸序列内的表位结合。3.根据权利要求1或2所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于LRIG1蛋白的N末端至C末端的位置704至744的氨基酸残基的氨基酸序列内的表位结合。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与LRIG1在从N末端到C末端的位置1至564或位置655至1093之间的未确定表位结合。5.根据权利要求1
‑
4中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括全长抗体或其片段。6.根据权利要求1
‑
5中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括双特异性抗体或其结合片段。7.根据权利要求1
‑
6中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括单价Fab
’
、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。8.根据权利要求1
‑
7中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽包括选自SEQ ID NO:84
‑
145、149
‑
187或242
‑
254的至少一个互补决定区。9.根据权利要求1
‑
8中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG框架。10.根据权利要求1
‑
9中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。11.根据权利要求1
‑
10中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k
D
。12.根据权利要求1
‑
11中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括人源化抗体。13.根据权利要求1
‑
12中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。14.一种抗原结合多肽，其中所述多肽破坏LRIG1
‑
VISTA相互作用，并且其中所述多肽与来自SEQ ID NO:69至75的区域中的LRIG1的表位结合。15.根据权利要求14所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽65(SEQ ID NO:69)定义的LRIG1的区域内的表位结合。16.根据权利要求14或15所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽66(SEQ ID NO:70)定义的LRIG1的区域内的表位结合。
17.根据权利要求14
‑
16中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽67(SEQ ID NO:71)定义的LRIG1的区域内的表位结合。18.根据权利要求14
‑
17中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽68(SEQ ID NO:72)定义的LRIG1的区域内的表位结合。19.根据权利要求14
‑
18中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽69(SEQ ID NO:73)定义的LRIG1的区域内的表位结合。20.根据权利要求14
‑
19中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽70(SEQ ID NO:74)定义的LRIG1的区域内的表位结合。21.根据权利要求14
‑
20中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽71(SEQ ID NO:75)定义的LRIG1的区域内的表位结合。22.根据权利要求14
‑
21中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括全长抗体或其片段。23.根据权利要求14
‑
22中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括双特异性抗体或其结合片段。24.根据权利要求14
‑
23中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括单价Fab
’
、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。25.根据权利要求14
‑
24中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽包括选自SEQ ID NO:84
‑
145、149
‑
187或242
‑
254的至少一个互补决定区。26.根据权利要求14
‑
25中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG框架。27.根据权利要求14
‑
26中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。28.根据权利要求14
‑
27中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k
D
。29.根据权利要求14
‑
28中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括人源化抗体。30.根据权利要求14
‑
29中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。31.一种抗原结合多肽，其中所述多肽表现出与LRIG1蛋白的特异性结合，其中所述多肽与LRIG1的结合将LRIG1
‑
VISTA之间的相互作用减弱至不含所述抗原结合多肽的LRIG1
‑
VISTA之间的相互作用的小于21％。32.根据权利要求31所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与LRIG1的结合将LRIG1
‑
VISTA之间的相互作用减弱至不含所述抗原结合多肽的LRIG1
‑
VISTA之间的相互作用的小于20％、小于15％、小于10％、小于5％或小于1％。
33.根据权利要求31或32所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与SEQ ID NO:69至75的区域中的LRIG1的表位结合。34.根据权利要求31
‑
33中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括全长抗体或其片段。35.根据权利要求31
‑
34中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括双特异性抗体或其结合片段。36.根据权利要求31
‑
35中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括单价Fab
’
、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。37.根据权利要求31
‑
36中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽包括选自SEQ ID NO:84
‑
145、149
‑
187或242
‑
254的至少一个互补决定区。38.根据权利要求31
‑
37中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG框架。39.根据权利要求31
‑
38中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。40.根据权利要求31
‑
39中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k
D
。41.根据权利要求31
‑
40中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括人源化抗体。42.根据权利要求31
‑
41中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。43.一种抗原结合多肽，其中所述多肽包括选自SEQ ID NO:84
‑
145、149
‑
187或242
‑
254的至少一个互补决定区，并且其中所述多肽能够结合存在于LRIG1蛋白的一个或多个区域中的表位。44.根据权利要求43所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括全长抗体或其片段。45.根据权利要求43或44所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括双特异性抗体或其结合片段。46.根据权利要求43
‑
45中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括单价Fab
’
、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。47.根据权利要求43
‑
46中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽包括选自SEQ ID NO:84
‑
145、149
‑
187或242
‑
254的一个以上的互补决定区。48.根据权利要求43
‑
47中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG框架。
49.根据权利要求43
‑
48中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。50.根据权利要求43
‑
49中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k
D
。51.根据权利要求43
‑
50中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括人源化抗体。52.根据权利要求43
‑
51中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙东旭，C，
申请(专利权)人：真和制药有限公司，
类型：发明
国别省市：