一种小续命汤标准汤剂中指标成分的定量检测方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种中药成分检测技术领域，尤其涉及一种小续命汤标准汤剂中指标成分的定量检测方法及应用。本发明专利技术用超高效液相色谱/质谱联用分析方法检测小续命汤标准汤剂中的指标成分，具有较高的精密度、准确度、稳定性和重现性，人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、黄芩苷、甘草苷、甘草酸、次乌头碱、苯甲酰乌头原碱等各指标成分色谱峰之间能够有效分离，从而能够快速、准确地检测小续命汤标准汤剂中的多种指标成分。分。分。

【技术实现步骤摘要】
一种小续命汤标准汤剂中指标成分的定量检测方法及应用


[0001]本专利技术属于中药成分检测
，尤其涉及一种小续命汤标准汤剂中指标成分的定量检测方法及应用。

技术介绍

[0002]经典名方“小续命汤”出自唐
·
孙思邈的《备急千金要方》，其组成药味和用量为：人参14.0g、黄芩14.0g、甘草14.0g、肉桂14.0g、麻黄14.0g、附子7.0g、白芍14.0g、川芎14.0g、防风21.0g、苦杏仁14.0g、防己14.0g、生姜70.0g。小续命汤有效成分主要包括黄酮类(主要来自黄芩、甘草)、生物碱类(主要来自附子、麻黄、防己)、皂苷类(主要来自人参、甘草)、非皂苷萜类(主要来自芍药)及色原酮类(主要来自防风)，此外还含有脂肪酸类、脂肪醇类、氰苷类(主要来自苦杏仁)、苯酞类(主要来自川芎)等。小续命汤具有神经细胞保护、神经血管单元保护、线粒体功能保护、减轻脑水肿、预防脑血管疾病、改善记忆、降血脂及抗凝血等，常用于治疗中风及其后遗症、吉兰
‑
巴雷综合征、阿尔兹海默症、类风湿关节炎、颈椎病、周围神经病变等疾病。
[0003]小续命汤的临床疗效及药理作用已得到科学验证，其有效成分研究也取得进展，但小续命汤汤剂整体质量控制仍乏系统性研究。

技术实现思路

[0004]针对以上技术问题，本专利技术提供了一种小续命汤标准汤剂中指标成分的定量检测方法和应用，该定量检测方法具有较高的精密度、准确度、稳定性和重现性，能够快速、准确地同时检测小续命汤标准汤剂中的多种指标成分。
[0005]为解决上述技术问题，本专利技术第一方面提供了一种小续命汤标准汤剂中指标成分的定量检测方法：用超高效液相色谱/质谱联用分析方法检测所述小续命汤标准汤剂中的指标成分，所述超高效液相色谱的色谱条件为：
[0006]色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶超高效液相色谱柱；
[0007]流动相A为含有0.2％v/v甲酸的0.002mol/L乙酸铵水溶液，流动相B为乙腈，进行线性梯度洗脱，所述线性梯度洗脱的程序如下：
[0008][0009]流速：0.18～0.22mL/min；
[0010]柱温：25～35℃；
[0011]PDA检测波长为275～285nm。
[0012]相对于现有技术而言，本专利技术采用超高效液相色谱/质谱联用的分析方法所采用的上述液相色谱条件具有较高的精密度、准确度、稳定性和重现性，各指标成分色谱峰之间能够有效分离，从而能够快速、准确地同时检测小续命汤标准汤剂中的以上各种指标成分。
[0013]其中小续命汤标准汤剂可按如下制备方法进行制备：
[0014]将去节寸斩后的麻黄14.0g用500mL水浸泡1.5h；同时，将人参、黄芩、甘草、肉桂、川芎、白芍、苦杏仁、防己各14.0g，“煻灰炮”附子7.0g，防风21.0g，共10味药用1000mL水浸泡1.5h；
[0015]将麻黄及其浸泡液敞盖单煎20min(待煎液沸腾后开始计时)，并在麻黄单煎期间去沫；麻黄单煎完毕后，加入除生姜外的其余10味药及其浸泡液，合盖共同煎煮90min(待煎液沸腾后开始计时)；
[0016]11味药共同煎煮完毕后，过滤，加入由生姜(70.0g)新鲜挤出的姜汁，合盖共同煎煮20min(待煎液沸腾后开始计时)，煎煮完成后过滤，将所得煎液冷却至室温，得小续命汤标准汤剂。
[0017]结合第一方面，所述指标成分包括人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、黄芩苷、甘草苷、甘草酸、次乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5
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O
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甲基维斯阿米醇苷、苦杏仁苷、粉防己碱、防己诺林碱和8
‑
姜酚。
[0018]结合第一方面，所述定量检测方法在检测前用甲醇稀释所述小续命汤标准汤剂，作为供试样品。
[0019]结合第一方面，所述色谱柱优选采用Shimadzu Shim
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pack XR
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ODSⅢUHPLC柱，规格为2.0
×
50mm，1.6μm。
[0020]结合第一方面，流速、柱温、检测波长可进一步优选，以获得更准确的检测结果，优选的范围值为：流速0.19～0.21mL/min，柱温27～32℃，检测波长277～282nm。更进一步优选的参数为：流速0.2mL/min，柱温30℃，检测波长280nm。
[0021]结合第一方面，所述超高效液相色谱/质谱联用分析方法中，所述质谱优选采用联三重四极杆质谱(QQQ
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MS)。
[0022]优选地，用所述质谱对除黄芩苷之外的其余所述指标成分定量分析，用PDA在280nm吸收波长下测定黄芩苷的色谱峰面积，并根据标准曲线计算黄芩苷含量。黄芩苷在小续命汤标准汤剂中的含量较高，质谱响应很强，容易出现过载的问题，为避免质谱过载对定量分析的影响，优选使用二极管阵列(PDA)检测器(检测波长280nm)单独对黄芩苷的含量进行定量分析。
[0023]本专利技术第二方面提供了上述定量检测方法在小续命汤标准汤剂质量控制中的应用，用所述定量检测方法检测小续命汤标准汤剂中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、黄芩苷、甘草苷、甘草酸、次乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5
‑
O
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甲基维斯阿米醇苷、苦杏仁苷、粉防己碱、防己诺林碱和8
‑
姜酚。
[0024]结合第二方面，小续命汤标准汤剂质量控制还包括用超高效液相色谱/质谱联用分析方法检测所述小续命汤标准汤剂中的肉桂酸，所述超高效液相色谱的色谱条件为：
[0025]色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶超高效液相色谱柱；
[0026]流动相A为0.005mol/L乙酸铵水溶液，流动相B为乙腈，进行线性梯度洗脱，所述线性梯度洗脱的程序如下：
[0027][0028]流速：0.18～0.22mL/min；
[0029]柱温：25～35℃；
[0030]不设置PDA检测波长。
[0031]结合第二方面，所述色谱柱优选采用Shimadzu Shim
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pack XR
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ODS
ꢀⅢꢀ
UHPLC柱，规格为2.0
×
50mm，1.6μm。
[0032]优选地，流速为0.19～0.21mL/min，柱温为27～32℃。更进一步优选的参数为：流速0.2mL/min，柱温30℃。
[0033]结合第二方面，小续命汤标准汤剂质量控制还包括用超高效液相色谱/质谱联用分析方法检测所述小续命汤标准汤剂中的麻黄碱和伪麻黄碱，所述超高效液相色谱的色谱条件为：
[0034]色谱柱：苯基柱；
[0035]流动相A为0.1％v/v甲酸水溶液，流动相B为乙腈，进行线性梯度洗脱，所述线性梯度洗脱的程序如下：<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种小续命汤标准汤剂中指标成分的定量检测方法，其特征在于，用超高效液相色谱/质谱联用分析方法检测所述小续命汤标准汤剂中的指标成分，所述超高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶超高效液相色谱柱；流动相A为含有0.2％v/v甲酸的0.002mol/L乙酸铵水溶液，流动相B为乙腈，进行线性梯度洗脱，所述线性梯度洗脱的程序如下：流速：0.18～0.22mL/min；柱温：25～35℃；PDA检测波长为275～285nm。2.根据权利要求1所述的小续命汤标准汤剂中指标成分的定量检测方法，其特征在于，所述指标成分包括人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、黄芩苷、甘草苷、甘草酸、次乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5
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O
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甲基维斯阿米醇苷、苦杏仁苷、粉防己碱、防己诺林碱和8
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姜酚；和/或所述定量检测方法还包括在检测前用甲醇稀释所述小续命汤标准汤剂，作为供试样品。3.根据权利要求1所述的小续命汤标准汤剂中指标成分的定量检测方法，其特征在于，所述色谱柱为Shimadzu Shim
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pack XR
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ODS
ꢀⅢꢀ
UHPLC柱，规格为2.0
×
50mm，1.6μm。4.根据权利要求1所述的小续命汤标准汤剂中指标成分的定量检测方法，其特征在于，所述流速为0.19～0.21mL/min；和/或柱温为27～32℃；和/或检测波长为277～282nm。5.根据权利要求4所述的小续命汤标准汤剂中指标成分的定量检测方法，其特征在于，所述流速为0.2mL/min；和/或柱温为30℃；和/或检测波长为280nm。6.根据权利要求1～5任一项所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄熙凯，刘广学，蔡少青，孙长清，侯金才，
申请(专利权)人：京津冀联创药物研究北京有限公司，
类型：发明
国别省市：