α4β7整联蛋白硫醚肽拮抗剂制造技术

本发明专利技术涉及抑制α4β7与粘膜地址素细胞粘附分子(MAdCAM)在体内结合的硫醚单体和二聚体肽分子。聚体肽分子。聚体肽分子。

【技术实现步骤摘要】
α4β
7整联蛋白硫醚肽拮抗剂
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请是申请号为201580036263.0的中国专利申请的分案申请，并且要求于2014年5月16日提交的美国临时申请第61/994,699号，于2014年5月16日提交的美国临时申请第61/994,717号，于2014年10月1日提交的美国临时申请第62/058,499号，以及于2014年10月1日提交的美国临时申请第62/058,501号的优先权，上述所有申请通过引用整体并入本文。
[0003]序列表
[0004]以文本格式提供了与本申请相关的序列表代替纸质复印件，并由此通过引用并入本说明书。含有序列表的文本文件的名称为PRTH_010_02WO_ST25.txt。所述文本文件为163KB，创建于2015年5月15日，并通过EFS
‑
Web电子提交。
专利

[0005]本专利技术涉及工程化肽的领域，以及结合整联蛋白的肽的领域。特别地，本专利技术涉及抑制α4β7与粘膜地址素细胞粘附分子(MAdCAM)在体外结合，并显示出对α4β1结合的高选择性的硫醚肽(例如，硫醚肽单体和二聚体)。
[0006]专利技术背景
[0007]整联蛋白与α/β异二聚体细胞表面受体非共价结合，该细胞表面受体涉及从细胞粘附和细胞迁移到基因调控的许多细胞过程(Dubree等人，Selectiveα4β7Integrin Antagonist and Their Potential as anti
‑
>inflammatory agents，J.Med.Chem.2002,45,3451
‑
3457)。不同的整联蛋白表达可以调控细胞的粘附性能，允许不同的白细胞群应答于不同的炎症性信号而聚集在特定器官。如不加以抑制，整联蛋白介导的粘附过程可以导致慢性炎症和自身免疫疾病。
[0008]α4整联蛋白、α4β1和α4β7，对于淋巴细胞迁移通过胃肠道具有重要作用。整联蛋白在大部分白细胞上表达，包括B淋巴细胞和T淋巴细胞，其中所述整联蛋白通过结合其各自的主要配体(分别为血管细胞粘附分子(VCAM)和粘膜地址素细胞粘附分子(MAdCAM))来介导细胞粘附。所述蛋白的结合特异性差异在于，其中VCAM既与α4β1结合又以较低程度与α4β7结合，而MAdCAM对于α4β7是高度特异的。除了与α4亚基配对之外，β7亚基还与αE亚基形成异二聚体复合物，以形成αEβ7，所述αEβ7主要在肠、肺和泌尿生殖道的上皮内淋巴细胞(IEL)表达。αEβ7也在肠的树突细胞表达。所述αEβ7异二聚体与上皮细胞的E
‑
钙粘蛋白结合。据认为IEL细胞提供了上皮室内的免疫监视机制。因此，将αEβ7和α4β7同时阻断可以是治疗肠的炎症性病况的有用方法。
[0009]特异性整联蛋白
‑
配体相互作用的抑制剂，已显示出作为治疗各种自身免疫疾病的抗炎剂是有效的。例如，展现出对α4β7的高结合亲和力的单克隆抗体，展现出了对胃肠道的自身炎症性疾病/自身免疫疾病的治疗益处，如克罗恩氏病(Crohn
’
s disease)和溃疡性结肠炎(Id)。然而，这些受到α4β1整联蛋白
‑
配体相互作用干扰的治疗，因此导致了对患者的危险性副作用。利用小分子拮抗剂的治疗在动物模型中显示出了类似的副作用，从而阻碍了这些技术的进一步发展。
[0010]因此，本领域存在对于具有对α4β7整联蛋白的高亲和力和对α4β1整联蛋白的高选择性的整联蛋白拮抗剂分子的需求，以作为各种胃肠道自身免疫疾病的疗法。
[0011]本文公开了这类整联蛋白拮抗剂分子。
[0012]专利技术概述
[0013]响应于本领域的现状，且特别是响应于通过当前可用的对α4β7有选择性的整联蛋白拮抗剂还不能完全解决的本领域问题和需求，研发了本专利技术。因此，在某些方面，本专利技术提供了用作抗炎剂和/或免疫抑制剂的α4β7拮抗剂硫醚肽单体和二聚体。并且，本专利技术提供了用于治疗与α4β7的生物功能或表达MAdCAM的细胞或组织的生物功能有关的病况的α4β7拮抗剂硫醚肽(例如单体和二聚体)。
[0014]本专利技术的方面涉及一类新的表现出整联蛋白拮抗剂活性(即表现出对α4β7整联蛋白高特异性)的环化硫醚肽化合物。在某些实施方案中，本专利技术的各种肽包含能够桥接以通过硫醚键形成环化结构的下游的天然或非天然氨基酸以及上游的修饰的氨基酸或芳香基团。本专利技术的肽当作为治疗剂口服给药时，展示了增强的稳定性。相比通过硫醚键之外的键(例如，二硫键)环化的类似物，本专利技术的肽还提供了增强的特异性和效力。
[0015]在某些实施方案中，表现出整联蛋白拮抗剂活性的环化硫醚肽化合物是单体肽。在特定的实施方案中，本专利技术的化合物包含二聚化肽，所述二聚体的各个亚基通过硫醚键形成环化结构。相比通过硫醚键之外的键(例如，二硫键)环化的类似物，硫醚环化特征为本专利技术的肽提供了增强的稳定性、特异性和效力。在一些实施方案中，相比单体类似物，硫醚肽单体的二聚化还提供了增强的特异性和效力。
[0016]在一个实施方案中，本专利技术提供了包含式(V)的结构的肽分子或其药物可接受的盐：
[0017]Xaa1‑
Xaa2‑
Xaa3‑
Xaa4‑
Xaa5‑
Xaa6‑
Xaa7‑
Xaa8‑
Xaa9‑
Xaa
10
‑
Xaa
11
‑
Xaa
12
‑
Xaa
13
‑
Xaa
14
[0018](式(V)(SEQ ID NO:49)
[0019]其中所述肽包含Xaa4与Xaa
10
之间的硫醚键，并且其中：
[0020]Xaa1不存在，或Xaa1为任何氨基酸；
[0021]Xaa2不存在，或Xaa2为任何氨基酸；
[0022]Xaa3不存在，或Xaa3为任何氨基酸；
[0023]Xaa4为含有具有一个或两个碳的侧链并且能够与Xaa
10
形成硫醚键的氨基酸、脂肪酸、脂环酸或修饰的2
‑
甲基芳香酸；
[0024]Xaa5选自：N(α)
‑
Me
‑
Arg、Arg、高
‑
Arg、Dap、Dab、Arg
‑
Me
‑
对称(sym)、Arg
‑
Me
‑
不对称(asym)、4
‑
Guan、Cit、Cav、N
‑
Me
‑
Lys、Phe(4
‑
胍基)、Phe(4
‑
氨甲酰基氨基)、Phe(4
‑
NH2)、N
‑
Me
‑
高Arg、Tyr、His以及适合本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.包含式(V)的结构的肽分子或其药物可接受的盐：Xaa1‑
Xaa2‑
Xaa3‑
Xaa4‑
Xaa5‑
Xaa6‑
Xaa7‑
Xaa8‑
Xaa9‑
Xaa
10
‑
Xaa
11
‑
Xaa
12
‑
Xaa
13
‑
Xaa
14
(式(V))其中所述肽包含Xaa4与Xaa
10
之间的硫醚键，并且其中：Xaa1不存在，或Xaa1为任何氨基酸；Xaa2不存在，或Xaa2为任何氨基酸；Xaa3不存在，或Xaa3为任何氨基酸；Xaa4为含有具有一个或两个碳的侧链，并且能够与Xaa
10
形成硫醚键的氨基酸、脂肪酸、脂环酸或修饰的2
‑
甲基芳香酸；Xaa5选自：N(α)
‑
Me
‑
Arg、Arg、高
‑
Arg、Dap、Dab、Arg
‑
Me
‑
对称、Arg
‑
Me
‑
不对称、4
‑
Guan、Cit、Cav、N
‑
Me
‑
Lys、Phe(4
‑
胍基)、Phe(4
‑
氨基甲酰基氨基)、Phe(4
‑
NH2)、N
‑
Me
‑
高
‑
Arg、Tyr、His以及适合的电子等排体替代物；Xaa6选自：Ser、Gly、Thr、Ile以及适合的电子等排体替代物；Xaa7选自：Asp、N
‑
Me
‑
Asp、Asp(OMe)、D
‑
Asp以及适合的电子等排体替代物；Xaa8选自：Thr、Gln、Ser、Asp、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、Met、高
‑
Leu、Nle以及N
‑
甲基氨基酸，包括N
‑
Me
‑
Thr；Xaa9选自：Gln、Asn、Asp、Pro、Gly、Ala、Phe、Leu、Glu、Ile、Val、H
‑
Leu、正丁基Ala、正戊基Ala、正己基Ala、Nle、环丁基
‑
Ala、Cpa、Aoc、N
‑
Me
‑
Leu以及适合的电子等排体替代物；Xaa
10
选自：Cys、N
‑
Me
‑
Cys、D
‑
Cys、H
‑
Cys、Pen、D
‑
Pen以及Pen(＝O)；Xaa
11
不存在或选自：Trp、Phe、2
‑
Nal、1
‑
Nal、Tyr、His、Phe(4
‑
F)、Phe(4
‑
CF3)、Phe(4
‑
CH3)、Phe(4
‑
tBu)、Bip、Phe(4
‑
COOH)、Gly、3,3
‑
二苯基Gly、3,3
‑
二苯基Ala、Tic、b
‑
高
‑
Trp、D
‑1‑
Nal、D
‑2‑
Nal、Phe(2,4
‑
二Cl)、Phe(3,4
‑
二Cl)、Phe(4
‑
氨甲酰基)、Phe(3
‑
氨甲酰基)、Phe(2
‑
氨甲酰基)、Tyr(Me)、高
‑
Phe、N
‑
Me
‑
Phe、N
‑
Me
‑
Tyr、Ser、Sar、二氢
‑
Trp、Ile、Leu、Ser、Arg、Thr、Sar和Ser、芳香氨基酸、取代的芳香氨基酸、Gly、Gln、Asn、Asp、Ala、Ile、Leu、Val、Met、Thr、Lys、Trp、Tyr、His、Glu、Ser、Arg、Pro、Phe、Sar、1
‑
Nal、2
‑
Nal、D
‑1‑
Nal、D
‑2‑
Nal、H
‑
Phe、D
‑
Phe、D
‑
Tyr、Phe(4
‑
F)、O
‑
Me
‑
Tyr、二氢
‑
Trp、Dap、Dab、Dab(Ac)、Orn、D
‑
Orn、N
‑
Me
‑
Orn、N
‑
Me
‑
Dap、D
‑
Dap、D
‑
Dab、Bip、Ala(3,3
‑
二苯基)、联苯基
‑
Ala、芳香环取代的Phe、芳香环取代的Trp、芳香环取代的His、杂芳香氨基酸、N
‑
Me
‑
Lys、N
‑
Me
‑
Lys(Ac)、4
‑
Me
‑
Phe、Phe(4
‑
tBu)、Phe(4
‑
OMe)、Phe(4
‑
COOH)、Phe(2
‑
氨甲酰基)、Phe(3
‑
氨甲酰基)、Phe(CF3)、Phe(2,4
‑
二Cl)、Phe(3,4
‑
二Cl)、Aic、N
‑
Me
‑
Tyr、N
‑
Me
‑
Phe、Tic、Phe(4CF3)、Bpa、Phe(3
‑
Me)、Phe(2
‑
Me)、Phe(2
‑
CF3)、β
‑
Me
‑
Phe和相应的D
‑
氨基酸以及适合的电子等排体替代物；Xaa
12
不存在，或选自：芳香氨基酸、取代的芳香氨基酸、Glu、D
‑
Glu、高
‑
Glu、β
‑
高
‑
Glu、Asp、D
‑
高
‑
Glu、酰胺、Lys、COOH、CONH2、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Gla、Ser、Asn、D
‑
Glu、β
‑
H
‑
Glu、2
‑
Nal、1
‑
Nal、D
‑
Asp、Bip、β
‑
H
‑
Phe、β
‑
Glu、D
‑
Tyr、D
‑
Phe、D
‑
Lys、Dap、Dab、Orn、D
‑
Orn、N
‑
Me
‑
Orn、N
‑
Me
‑
Dap、N
‑
Me
‑
Dab、N
‑
Me
‑
Lys、D
‑
Dap、D
‑
Dab、D
‑
His、F(4
‑
COOH)、Tic、D
‑
Trp、D
‑
Leu、D
‑
Arg、D
‑
Thr、N
‑
Me
‑
Glu、N
‑
Me
‑
Asp、α
‑
H
‑
Glu、电子等排体以及相应的D
‑
氨基酸；Xaa
13
不存在或为任何氨基酸；并且Xaa
14
不存在或为任何氨基酸；
其中如果所述肽分子为肽二聚体或其亚基，则Xaa
14
不存在，或选自：任何具有胺侧链的氨基酸、Lys、D
‑
Lys、N
‑
Me
‑
Lys、D
‑
N
‑
Me
‑
Lys、Orn、N
‑
Me
‑
Orn、Dab、N
‑
Me
‑
Dab、Dap、N
‑
Me
‑
Dap、高
‑
Lys、D
‑
Dap、D
‑
Dab、D
‑
Orn、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Cys、高
‑
Cys、COOH、CONH2、适合的电子等排体、相应的D
‑
氨基酸以及相应的N
‑
甲基氨基酸，并且其中所述肽分子包含Xaa4与Xaa
10
之间的硫醚键。2.如权利要求1所述的肽分子，其中Xaa1不存在或为任何氨基酸；Xaa2不存在或为任何氨基酸；Xaa3不存在或为任何氨基酸；Xaa4为2
‑
甲基
‑
苯甲酰基部分或修饰的高
‑
Ser，任选地为高
‑
Ser
‑
Cl；Xaa5选自：N
‑
Me
‑
Arg、Arg、N
‑
Me
‑
Lys、Phe(4
‑
胍基)、Phe(4
‑
羰基氨基)、Cit、Phe(4
‑
NH2)、N
‑
Me
‑
高
‑
Arg、高
‑
Arg、Tyr以及His；Xaa6为Ser、Gly、Thr或Ile；Xaa7为Asp或D
‑
Asp；Xaa8选自：Thr、Val、Ile、Leu、H
‑
Leu、Nle以及Val；Xaa9选自：Leu、Nle、Cpa、Cba、高
‑
Leu、Aoc以及N
‑
Me
‑
Leu；Xaa
10
为Pen、Cys、D
‑
Cys或高
‑
Cys；并且Xaa
11
不存在，或选自：Trp、Phe、2
‑
Nal、1
‑
Nal、Tyr、His、Phe(4
‑
F)、Phe(4
‑
CF3)、Phe(4
‑
CH3)、Phe(4
‑
tBu)、Bip、Phe(4
‑
COOH)、Gly、3,3
‑
二苯基Gly、3,3
‑
二苯基Ala、Tic、b
‑
高
‑
Trp、D
‑1‑
Nal、D
‑2‑
Nal、Phe(2,4
‑
二Cl)、Phe(3,4
‑
二Cl)、Phe(4
‑
氨甲酰基)、Phe(3
‑
氨甲酰基)、Phe(2
‑
氨甲酰基)、Tyr(Me)、高
‑
Phe、N
‑
Me
‑
Phe、N
‑
Me
‑
Tyr、Ser、Sar、二氢
‑
Trp、Ile、Leu、Arg、Thr、Sar、Bpa、Phe(3
‑
Me)、Phe(2
‑
Me)、Phe(2
‑
CF3)、β
‑
Me
‑
Phe以及Ser；Xaa
12
不存在，或选自：任何芳香氨基酸、Glu、D
‑
Glu、高
‑
Glu、Asp、D
‑
Asp、D
‑
高
‑
Glu、D
‑
Asp、Gla、β
‑
高
‑
Glu、N
‑
Me
‑
Glu、N
‑
Me
‑
Asp、α
‑
H
‑
Glu、相应的D
‑
氨基酸和电子等排体；Xaa
13
不存在或为任何氨基酸；并且Xaa
14
为任何氨基酸。3.如权利要求1所述的肽分子，其中Xaa1不存在或为任何氨基酸；Xaa2不存在或为任何氨基酸；Xaa3不存在或为任何氨基酸；Xaa4为2
‑
甲基苯甲酰基部分或修饰的高
‑
Ser，任选地为高
‑
Ser
‑
Cl；Xaa5为N
‑
Me
‑
Arg；Xaa6为Ser、Gly、Thr或Ile；Xaa7为Asp或D
‑
Asp；Xaa8选自：Thr、Val、Ile、Leu、H
‑
Leu以及Nle；Xaa9选自：Leu、Nle、Cpa、Cba、高
‑
Leu、Aoc以及N
‑
Me
‑
Leu；Xaa
10
为Pen、Cys、D
‑
Cys或高
‑
Cys；Xaa
11
选自：Trp、Phe、2
‑
Nal、1
‑
Nal、Tyr、His、Phe(4
‑
F)、Phe(4
‑
CF3)、Phe(4
‑
CH3)、Phe
(4
‑
tBu)、Bip、Phe(4
‑
COOH)、Gly、3,3
‑
二苯基Gly、3,3
‑
二苯基Ala、Tic、b
‑
高
‑
Trp、D
‑1‑
Nal、D
‑2‑
Nal、Phe(2,4
‑
二Cl)、Phe(3,4
‑
二Cl)、Pge(4
‑
氨甲酰基)、Phe(3
‑
氨甲酰基)、Tyr(Me)、高
‑
Phe、N
‑
Me
‑
Phe、N
‑
Me
‑
Tyr、Ser、Sar、二氢
‑
Trp、Ile、Leu、Ser、Arg、Thr、Sar、Bpa、Phe(3
‑
Me)、Phe(2
‑
Me)、Phe(2
‑
CF3)、β
‑
Me
‑
Phe、Ser和任何取代的芳香氨基酸以及相应的D
‑
氨基酸；Xaa
12
选自：任何芳香氨基酸、Glu、D
‑
Glu、高
‑
Glu、Asp、D
‑
Asp、D
‑
高
‑
Glu、Gla、β
‑
高
‑
Glu、N
‑
Me
‑
Glu、N
‑
Me
‑
Asp、α
‑
H
‑
Glu、相应的D
‑
氨基酸和电子等排体；Xaa
13
不存在；并且Xaa
14
为任何氨基酸。4.如权利要求1所述的肽分子，其中Xaa1不存在或为任何氨基酸；Xaa2不存在或为任何氨基酸；Xaa3不存在或为任何氨基酸；Xaa4为2
‑
甲基苯甲酰基部分或修饰的高
‑
Ser，任选地为高
‑
Ser
‑
Cl；Xaa5为N
‑
Me
‑
Arg；Xaa6为Ser、Gly、Thr或Ile；Xaa7为Asp或D
‑
Asp；Xaa8选自：Thr、Val、Ile、Leu、H
‑
Leu以及Nle；Xaa9选自：Leu、Nle、Cpa、Cba、高
‑
Leu、Aoc以及N
‑
Me
‑
Leu；Xaa
10
为Pen、Cys、D
‑
Cys或高
‑
Cys；Xaa
11

【专利技术属性】
技术研发人员：艾少克，
申请(专利权)人：领导医疗有限公司，
类型：发明
国别省市：