一株可同时裂解大肠杆菌的沙门氏菌噬菌体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株可同时裂解大肠杆菌的沙门氏菌噬菌体RDP

【技术实现步骤摘要】
一株可同时裂解大肠杆菌的沙门氏菌噬菌体及其应用


[0001]本专利技术涉及生物
，特别是涉及一株可同时裂解大肠杆菌的沙门氏菌噬菌体及其应用。

技术介绍

[0002]沙门氏菌(Salmonella pullorum)属于肠杆菌科，革兰氏阴性肠道杆菌，是沙门氏菌病的病原体。广泛存在于自然界中，迄今为止已经发现1000株左右。大多数脊椎动物体内均可分离到沙门氏菌，其主要寄生于人类和动物的肠道内。菌体大小为(0.6
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0.9)
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(1
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3)μm，一般无芽孢，也无荚膜，多数有鞭毛，抗原结构和生化特性相对复杂。
[0003]沙门氏菌种类繁多，根据细菌表面的抗原所定义的抗原特性，已经描述了超过2500个肠道沙门氏菌血清型。由鸡白痢沙门氏菌造成的家禽感染是家禽养殖危害最大的细菌性疾病之一，能够引起家禽高发病率和死亡率。除此之外，肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌等都是家禽易感的沙门氏菌。沙门氏菌极易在养殖场中进行水平传播和垂直传播，所以净化家禽特别是种禽养殖中的沙门氏菌病能极大地提高养殖效益。
[0004]沙门氏菌属中有人类致病菌、兽类致病菌以及人兽致病菌。感染沙门氏菌后，一般会出现胃肠炎症、发热、腹泻以及败血症等临床症状。当前，世界范围内的食物中毒问题中就有沙门氏菌引起的食物中毒。沙门氏菌可以不通过宿主以直接或间接的方式在动物之间、人与动物、人与人之间传播，而其主要的传播途径就是消化道。动物在感染了沙门氏菌后，繁殖力会受到影响，生长受阻，甚至会病状加重，死亡率升高。
[0005]由于抗生素的不合理使用，引起了细菌多重耐药性、药物残留、食品安全、环境菌群不平衡等问题，严重威胁人类及动物的健康。因此，寻找新型抗菌药物及治疗方案已成为当前的研究重点。
[0006]在畜牧养殖等方面，使用抗生素免疫造成免疫失败，兽药残留问题威胁着人类的身体健康。面对这样的挑战，噬菌体疗法已广泛应用于医学、畜牧兽医、食品卫生等各个领域中致病菌的防控。在农作物种植方面，研究者尝试将噬菌体用于马铃薯、柑橘，商业化的噬菌体制剂在农作物中大规模使用。在食品工业中，其表面细菌生物膜形成是食品工厂的主要问题之一，而形成生物膜的细菌对恶劣的环境条件、抗生素和消毒剂具有很高的抵抗力，噬菌体有着良好的治疗效果。
[0007]噬菌体具有特异性强、毒副作用小等特点，展现了良好的杀菌作用，同时具有良好的生物安全性，在防控细菌感染方面具有巨大的潜力。
[0008]特点优势：(1)特异性强。噬菌体具有独特的杀菌机制和高度的宿主专一性，是广谱抗生素无法比拟的优势，以致病菌为宿主筛选的噬菌体，不会对人及动物体内的其他正常菌群造成威胁。(2)相较于抗生素，噬菌体不易产生耐药性。噬菌体具有很强的降解生物被膜的能力，而生物被膜增强了细菌对抗生素的抗性，可使用噬菌体消除生物被膜来裂解多重耐药菌。(3)安全性高。噬菌体由核酸和蛋白质组成，降解为氨基酸和核酸，分布广且易分离筛选，与抗生素不同，噬菌体是人和动物正常的共生体，摄入噬菌体是一种自然过程。
大多数研究表明噬菌体治疗细菌性感染有很强的安全性。(4)噬菌体个体微小且增殖能力强。一个噬菌体感染一个细菌后，可产生100个左右的子代噬菌体，渗透药物无法穿透的区域，通过一种“自动给药”的现象来确定剂量，避免在治疗部位重复使用噬菌体，单次给药就可达到理想效果。(5)噬菌体分布广泛。噬菌体存在自然界的各个角落，包括土壤、河流、污水，凡是有细菌的场所就有相应噬菌体的存在。在健康人体和动物体内(胃肠道、口腔等)的正常菌群中也广泛存在。(6)易筛选易获得。筛选纯化新噬菌体周期短，几周或几个月。通过人工培养细菌，扩增并过滤除菌，纯化制备高价噬菌体即可获得。综上，噬菌体作为抗菌剂具有特异性强、安全性强、不易产生耐药性等优势。
[0009]噬菌体治疗细菌性疾病具有很多优势。例如起效快、2
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4h就能杀死病原菌，缓解症状，改善养殖动物的精神状态；对养殖动物安全，噬菌体特异性强，只能杀死相对应的病原菌，对动物肠道有益微生物不会有副作用，因此不会破坏肠道菌群，而抗生素在杀灭病原菌的同时，会导致微生态失衡，引起机会性感染甚至更严重的全身性感染；环境友好，噬菌体是宿主依赖性的，只有在宿主存在时才会发生作用，随着宿主的死亡而死亡，不会在体内残留；防止细菌耐药性，噬菌体作用机制与抗生素不同，治疗效果不受细菌耐药性的影响，基本没有副作用，长期以来，噬菌体在人体、动物、食品中的应用已经有了悠久历史，具有良好的治疗效果。
[0010]本专利技术在于相应国家全面禁抗的号令，解决细菌耐药性，抗生素滥用的问题，从禽粪便中分离纯化出一株裂性沙门氏菌噬菌体，为禽沙门氏菌的防治提供更多的可能性。

技术实现思路

[0011]本专利技术的目的在于提供一株可同时裂解大肠杆菌的沙门氏菌噬菌体及其应用，旨在解决养殖场禽类因感染沙门氏菌，发病急而治疗不及时，且因致病菌耐药性而导致用药无效等问题。
[0012]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0013]一株可同时裂解大肠杆菌的沙门氏菌噬菌体，透过电镜观察，该沙门氏菌噬菌体RDP
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21003头部为多面体立体对称，包裹着核酸，直径65
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40nm，有一个长30nm的尾，颈部连着头部和尾部，为有尾病毒目短尾病毒科。经基因测序发现，不具有毒力基因和溶原基因，该噬菌体于2021年06月03日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号CGMCC No.22494。
[0014]进一步地，该噬菌体具有较广谱的杀灭沙门氏菌的能力，同时对大肠杆菌也有一定的裂解能力。
[0015]进一步地，该噬菌体对引起鸡气囊炎、腹膜炎的大肠杆菌具有裂解能力。
[0016]本专利技术的第二个目的是提供该沙门氏菌噬菌体RDP
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21003在制备预防和或治疗大肠杆菌引起的疾病的药物中的用途。
[0017]本专利技术的第三个目的是提供沙门氏菌噬菌体RDP
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SA
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21003在制备预防和或治疗沙门氏菌引起的疾病的药物中的用途。
[0018]本专利技术的第四个目的是提供沙门氏菌噬菌体RDP
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21003在制备预防和或治疗沙门氏菌引起的疾病的饲料中的用途。
[0019]本专利技术的第五个目的是提供一种用于防治沙门氏菌的杀菌组合物，包括有效量的
沙门氏菌噬菌体RDP
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21003。
[0020]本专利技术的第六个目的是提供一种用于防治沙门氏菌的杀菌组合物，还包括用于抗沙门氏菌的抗生素。
[0021]本专利技术的第七个目的是提供一种预防和或治疗沙门氏菌引起的疾病的添加剂，其有效成分包括沙门氏菌噬菌体RDP
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株可同时裂解大肠杆菌的沙门氏菌噬菌体，其特征在于，透过电镜观察，该沙门氏菌噬菌体RDP
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21003头部为多面体立体对称，包裹着核酸，直径65
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40nm，有一个长30nm的尾，颈部连着头部和尾部，为有尾病毒目短尾病毒科，不具有毒力基因和溶原基因，保藏编号CGMCC No.22494。2.如权利要求1所述的沙门氏菌噬菌体RDP
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21003，其特征在于，该噬菌体具有较广谱的杀灭沙门氏菌的能力，同时对大肠杆菌也有一定的裂解能力。3.如权利要求1所述的沙门氏菌噬菌体RDP
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21003，其特征在于，该噬菌体对引起鸡气囊炎、腹膜炎的大肠杆菌具有裂解能力。4.如权利要求1所述的沙门氏菌噬菌体RDP
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21003在制备预防和或治疗大肠杆菌引起的疾病的药物中的用途。5.如权...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜新永，张得彦，李先胜，马如霞，王立坤，
申请(专利权)人：瑞科盟青岛生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：