【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物，具体涉及一株高裂解率空肠弯曲杆菌噬菌体rdp-cj-22002、其杀菌组合物及其应用。
技术介绍
1、空肠弯曲菌(campylobacter jejuni)是一种人兽共患的革兰氏阴性致病菌，生长条件极为苛刻，需要在微需氧(5％o2，10％co2，85％n2)的条件下生长。在自然界高氧压力环境下，该菌也能广泛传播。
2、家禽作为空肠弯曲菌最常见的宿主，被认为是空肠弯曲菌病最主要的来源。空肠弯曲菌可以在家禽肠道内大量定殖，并通过家禽生产过程进行传递，最终传播给人，对人类的生命健康造成威胁。对于养殖环节，空肠弯曲菌的水平传播是防控的主要侧重点。研究发现，鸡群通常在2-3周后开始出现空肠弯曲菌的感染，且一旦有一只鸡感染，空肠弯曲菌便会通过粪、口、食物和水源等途径在数天之内迅速感染整个鸡群。基于空肠弯曲菌的传播特点，养殖环节中，空肠弯曲菌的防控手段主要包括以下三类：①通过生物安全措施阻断空肠弯曲菌的传播；②使用抗菌物质降低鸡体内的空肠弯曲菌定殖水平；③通过免疫等方式增强鸡群对空肠弯曲菌的抵抗能力，抗菌物质可以有效降低鸡体内空肠弯曲菌的定殖水平，常用的抗菌物质主要包含有机酸，细菌素和抗生素等。对于以上空肠弯曲菌的防控手段，大多时候通过在家禽饲养过程中添加抗生素进行预防性治疗，由于养殖过程中抗生素的使用，空肠弯曲菌的耐药问题日趋严重，多重耐药菌的出现更是严重影响了人们的健康。噬菌体是一类细菌病毒，它可以特异性地吸附并感染宿主菌，并在宿主体内进行复制，最终导致宿主菌裂解死亡。噬菌体通常不具有生物毒性，相对安全，
3、但是，目前还未出现能有效预防和治疗空肠弯曲菌病的安全、高裂解率的噬菌体产品，因此，亟待开发一种耐酸碱、对温度有耐受性、稳定遗传且裂解率高的噬菌体产品用于防治空肠弯曲菌病。
技术实现思路
1、本专利技术旨在针对现有技术的不足，提供一株高裂解率空肠弯曲杆菌噬菌体rdp-cj-22002、其杀菌组合物及其应用。该噬菌体不仅可用于制备预防和治疗空肠弯曲菌病的药物，还可用于制备家禽养殖用的饲料添加剂以及家禽养殖和肉品加工过程中的消毒剂等。该噬菌体对引起空肠弯曲菌病的空肠弯曲菌有较强的裂解作用，裂解率达99.3％，对宿主有较好的裂解效果，适合在养殖过程中使用。
2、本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：
3、第一方面，本专利技术提供了一株高裂解率空肠弯曲杆菌噬菌体rdp-cj-22002，该噬菌体是从蛋鸡肠道内容物、粪便中分离得到的，于2023年1月6日被保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，其保藏编号为cgmcc no.45406，并被分类命名为空肠弯曲杆菌噬菌体。
4、通过电镜观察到：该噬菌体有一个多面体立体对称的头部，包裹着核酸，直径约40nm，有尾，尾长约100nm；根据病毒分类国际委员会(ictv)的定义，该噬菌体的形态符合有尾噬菌体科的特征，属于肌尾噬菌体科，并被命名为rdp-cj-22002。
5、进一步的，该噬菌体rdp-cj-22002在ph在6-8范围内能维持较好的活性，其效价在108pfu/ml之上，说明该噬菌体有较好的耐酸碱性能。
6、进一步地，该噬菌体rdp-cj-22002在30-50℃的温度范围内，效价稳定，尤其在50℃条件下处理30min和60min，效价仍然在108pfu/ml以上，说明该噬菌体对温度有较好的耐受性。
7、进一步地，该噬菌体rdp-cj-22002连续传30代后，其效价稳定在108pfu/ml以上，说明该噬菌体具有较好的遗传稳定性，适合工业化生产。
8、进一步地，该噬菌体rdp-cj-22002可有效感染空肠弯曲菌，其最佳感染复数为1：10。
9、进一步地，该噬菌体rdp-cj-22002裂解率达99.3％，对宿主有较好的裂解效果，适合在养殖过程中使用。
10、第二方面，基于同一个专利技术构思，本专利技术还提供了一种杀菌组合物，包括如上所述的空肠弯曲杆菌噬菌体rdp-cj-22002。
11、进一步地，如上所述的杀菌组合物，还包括用于抗空肠弯曲菌的抗生素。这种杀菌组合物可通过空肠弯曲杆菌噬菌体rdp-cj-22002与其他抗生素复配，用于制备防治空肠弯曲菌病的各类产品。优选的，所述抗生素包括β-内酰胺类、氨基糖类、四环素类、大环内酯类、林可胺类、多肽类、多磷类等。更优选的，所述抗生素包括阿莫西林、安普霉素、阿米卡星、新霉素、单硫酸卡那霉素、多西环素、氟苯尼考、金霉素、土霉素、泰乐菌素、替米考星、林可霉素、黏菌素、磷霉素钠等。
12、进一步地，该噬菌体rdp-cj-22002与抗生素有较好的协同作用，可以将其最小抑菌浓度(以下简称“mic”)降低至原来的1/4-1/8，这在禽类养殖过程中，可以大幅减少抗生素的使用量，提高养殖效益，保障食品健康。
13、第三方面，基于同一个专利技术构思，本专利技术还提供了如上所述的空肠弯曲杆菌噬菌体rdp-cj-22002或者所述的杀菌组合物在制备预防和治疗空肠弯曲菌感染的疾病的药物中的应用。本文中术语“预防”是指包括通过给予所述噬菌体或者杀菌组合物来抑制或延迟所述疾病的所有行为。本文中术语“治疗”是指包括通过给予所述噬菌体或者杀菌组合物而使所述疾病好转或有所改善的所有行为。优选的，所述空肠弯曲菌选自鸡源空肠弯曲菌。
14、第四方面，基于同一个专利技术构思，本专利技术还提供了如上所述的空肠弯曲杆菌噬菌体rdp-cj-22002或者所述的杀菌组合物在制备预防和治疗空肠弯曲菌感染的疾病的饲料中的应用。
15、第五方面，基于同一个专利技术构思，本专利技术还提供了一种噬菌体制剂，所述噬菌体制剂的有效成分包括如上所述的空肠弯曲杆菌噬菌体rdp-cj-22002。优选的，所述噬菌体制剂中还包含药学上可接受的载体，其剂型为溶液剂、粉剂、凝胶剂、颗粒剂或冻干剂。
16、第六方面，基于同一个专利技术构思，本专利技术还提供了一种饲料添加剂，所述饲料添加剂的有效成分包括如上所述的空肠弯曲杆菌噬菌体rdp-cj-22002或者所述的杀菌组合物。
17、第七方面，基于同一个专利技术构思，本专利技术还提供了一种饲料，包括如上所述的饲料添加剂。饲料添加剂通过与家禽饲料进行混拌后，进行饲喂，从而达到预防或者治疗空肠弯曲菌病的作用。优选的，饲料中噬菌体的效价至少为103pfu/g。
18、第八方面，基于同一个专利技术构思，本专利技术还提供了一种消毒剂，所述消毒剂的有效成分包括如上所述的空肠弯曲杆菌噬菌体rdp-cj-22002。优选的，消毒剂中噬菌体的效价至少104pfu/ml。上述消毒剂还包含其他用于环境中细菌抑制或者消灭的活性成分或其他助剂等。本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一株高裂解率空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002，其特征在于，其保藏编号为CGMCCNO.45406。
2.一种杀菌组合物，其特征在于，包括如权利要求1所述的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002。
3.根据权利要求2所述的杀菌组合物，其特征在于，还包括用于抗空肠弯曲菌的抗生素。
4.根据权利要求3所述的杀菌组合物，其特征在于，所述抗生素包括β-内酰胺类、氨基糖类、四环素类、大环内酯类、林可胺类、多肽类、多磷类中的任意一种；优选的，所述抗生素包括阿莫西林、安普霉素、阿米卡星、新霉素、单硫酸卡那霉素、多西环素、氟苯尼考、金霉素、土霉素、泰乐菌素、替米考星、林可霉素、黏菌素、磷霉素钠中的任意一种。
5.根据权利要求1所述的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002或者权利要求3所述的杀菌组合物在制备预防和治疗空肠弯曲菌感染的疾病的药物中的用途。
6.根据权利要求1所述的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002或者权利要求3所述的杀菌组合物在制备预防和治疗空肠弯曲菌感染的疾病的饲料中的用途。
7.一
8.一种饲料添加剂，其特征在于，所述饲料添加剂的有效成分包括如权利要求1所述的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002或者权利要求3所述的杀菌组合物。
9.一种饲料，其特征在于，所述饲料包含权利要求8所述的饲料添加剂。
10.一种消毒剂，其特征在于，所述消毒剂的有效成分包括如权利要求1所述的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002。
...【技术特征摘要】
1.一株高裂解率空肠弯曲杆菌噬菌体rdp-cj-22002，其特征在于，其保藏编号为cgmccno.45406。
2.一种杀菌组合物，其特征在于，包括如权利要求1所述的空肠弯曲杆菌噬菌体rdp-cj-22002。
3.根据权利要求2所述的杀菌组合物，其特征在于，还包括用于抗空肠弯曲菌的抗生素。
4.根据权利要求3所述的杀菌组合物，其特征在于，所述抗生素包括β-内酰胺类、氨基糖类、四环素类、大环内酯类、林可胺类、多肽类、多磷类中的任意一种；优选的，所述抗生素包括阿莫西林、安普霉素、阿米卡星、新霉素、单硫酸卡那霉素、多西环素、氟苯尼考、金霉素、土霉素、泰乐菌素、替米考星、林可霉素、黏菌素、磷霉素钠中的任意一种。
5.根据权利要求1所述的空肠弯曲杆菌噬菌体rdp-cj-22002或者权利要求3...
【专利技术属性】
技术研发人员：杜新永，刘长太，李先胜，张朝壮，王卿君，
申请(专利权)人：瑞科盟青岛生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：
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