GDF捕获物和促红细胞生成素受体激活剂联合应用以增加红细胞水平制造技术

提供了用于提高红细胞水平或治疗贫血的组合物，其包括促红细胞生成素受体激活剂和变体激活素RIIB(ActRIIB)多肽，所述多肽具有被酸性氨基酸残基替换的亮氨酸残基，其中所述变体ActRIIB多肽对激活素B具有降低的亲和力并且可称为GDF捕获物。提供了应用这些组合物的方法。方法。方法。

【技术实现步骤摘要】
Dial Transplant 15，43
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50)。50%以上的癌症患者对EPO的反应不足，大约10%的末期肾疾病患者具有低反应性(Glaspy等人 (1997) J Clin Oncol 15，1218
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1234；Demetri等人 (1998) J Clin Oncol 16，3412
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3425)，以及不到10%的骨髓异常增生综合征患者有利地反应(Estey (2003) Curr Opin Hematol 10，60
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67)。一些因素，包括炎症、铁和维生素缺乏、透析不充分、铝毒性以及甲状旁腺功能亢进可预测较差的治疗反应。对EPO抵抗的分子机制仍然不清楚。近来的证据提出，较高剂量的EPO可与心血管发病率的增加风险、肿瘤生长和某些患者群中的死亡率有关 (Krapf等人, 2009, Clin J Am Soc Nephrol 4:470
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480; Glaspy, 2009, Annu Rev Med 60:181
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192)。因此已建议，基于EPO的治疗化合物(促红细胞生成素
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刺激剂，ESAs)以足以避免对红细胞输注的需求的最低剂量施用(Jelkmann等人, 2008, Crit Rev Oncol. Hematol 67:39
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61)。
[0008]因此，本公开内容的一个目的是提供提高患者红细胞水平的替代性方法，其将允许应用降低剂量的促红细胞生成素受体激活剂。
[0009]专利技术概述本公开内容部分地说明，GDF捕获物(GDF Traps)可与EPO受体激活剂联合施用(例如，在相同时间或不同时间施用，但通常以实现重叠药物效果的方式)以在需要的患者中增加红细胞水平(红细胞生成)或治疗贫血。本公开内容部分地说明，GDF捕获物可与EPO受体激活剂联合施用，以协同增加患者中的红细胞形成。因此，该联合治疗的效果可以显著高于GDF捕获物和EPO受体激活剂以其各自量单独施用时的效果总和。在某些实施方案中，该协同作用可为有利的，因为其能够以较低剂量的EPO受体激活剂获得红细胞靶水平，由此避免潜在的副作用或与较高水平的EPO受体激活相关的其它问题。
[0010]EPO受体激活剂可通过直接接触和激活EPO受体刺激红细胞生成。在某些实施方案中，EPO受体激活剂是基于天然EPO的165个氨基酸序列的一类化合物中的一个，并且通常称为红细胞生成
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刺激剂(ESAs)，其例子是依伯汀α、依伯汀β、依伯汀δ和依伯汀ω。在其它实施方案中，ESAs包括合成EPO蛋白质(SEPs)和EPO衍生物，其具有赋予期望的药动学特性(延长的循环半衰期)的非肽修饰，其例子是达贝泊汀α(darbepoetin alfa)和甲氧基
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聚乙二醇依伯汀β。在某些实施方案中，EPO受体激活剂可为不结合EPO多肽骨架或通常不归类为ESA的EPO受体激动剂。这种EPO受体激动剂可包括但不限于EPO的肽和非肽模拟物、靶向EPO受体的激动抗体、包含EPO模拟结构域的融合蛋白质、和促红细胞生成素受体延长期限制激动剂(erythropoietin receptor extended
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duration limited agonists，EREDLA)。
[0011]在某些实施方案中，EPO受体激活剂可通过增强内源性EPO产生间接刺激红细胞生成，不接触EPO受体本身。例如，低氧诱导的转录因子(HIFs)是EPO基因表达的内源性刺激剂，所述表达在常氧条件下通过细胞调节机制而抑制(去稳定)。本公开内容通过应用GDF捕获物和具有HIF稳定特性的间接EPO受体激活剂如脯氨酰羟化酶抑制剂联合治疗部分地提供患者中增加的红细胞生成。
[0012]相对于其它ActRIIB配体如GDF11和/或筒箭毒碱具有对激活素(例如，激活素A和/或激活素B)显著降低的亲和力的变体ActRIIB多肽被称为GDF捕获物。本文描述的ActRIIB变体是GDF捕获物，除非另外指定。特别地，本公开内容说明为在SEQ ID NO:1的位置79具有酸性残基的可溶形式ActRIIB多肽的GDF捕获物在体内施用时增加血中红细胞水平。因此，在某些实施方案中，本公开内容提供应用GDF捕获物增加患者中红细胞和血红蛋白水平和
治疗与需要的患者中低红细胞或血红蛋白水平有关的病症的方法。如并入本文作为参考的美国专利申请号12/012,652所述，GDF捕获物可以用于增加肌肉量和降低脂肪量。
[0013]在某些方面，本公开内容提供为变体ActRIIB多肽的GDF捕获物，包括具有氨基和羧基端截短和序列变化的ActRIIB多肽。任选地，本专利技术的GDF捕获物可设计为优先拮抗ActRIIB受体的一个或多个配体，如GDF8(也称为筒箭毒碱)、GDF11、Nodal和BMP7(也称为OP
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1)。GDF捕获物的例子包括衍生自ActRIIB的一组变体，其具有大大减少的对激活素的亲和力。这些变体展示对红细胞的期望的效果，同时降低对其它组织的效果。这种变体的例子包括在相应于SEQ ID NO.1的位置79的位置具有酸性氨基酸(例如，天冬氨酸D或谷氨酸E)的那些。在某些实施方案中，GDF捕获物多肽包含下列氨基酸序列，其包含SEQ ID NO:7、26、28、29、32、37或38的氨基酸序列和与前述任一具有至少80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%同一性的多肽，由SEQ ID NO:7、26、28、29、32、37或38的氨基酸序列和与前述任一具有至少80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%同一性的多肽组成，或基本上由SEQ ID NO:7、26、28、29、32、37或38的氨基酸序列和与前述任一具有至少80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%同一性的多肽组成。
[0014]在某些方面，本公开内容提供药物制剂，其包含与ActRIIB配体如GDF8、GDF11、激活素(例如激活素B)、BMP7或nodal结合的GDF捕获物，和药学上可接受的载体。任选地，GDF捕获物与ActRIIB配体以低于10微摩尔、低于1微摩尔、低于100纳摩尔、低于10纳摩尔或低于1纳摩尔的Kd结合。任选地，GDF捕获物抑制ActRIIB信号传导，如ActRIIB配体触发的细胞内信号转导事件。用于这种制剂的GDF捕获物可为本文公开的那些中的任一，包括例如，具有选自SEQ ID NOs:2、3、7、11、26、28、29、32、37、38或40的氨基酸序列的GDF捕获物，或具有与选自SEQ ID NOs:2、3、7、11、26、28、29、32、37、38或40的氨基酸序列有至少80%、85%、90%、95%、97%或99%同一性的氨基酸序列的GDF捕获物，或具有与选自SEQ ID NOs:2、3、7、11、26、28、29、32、37、38或40的氨基酸序列有至少80%、85%、90%、95%、97%或99%同一性的氨基酸序列的GD本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于在患者中增加红细胞水平或治疗贫血的方法，所述方法包含对需要其的患者施用：(a) 促红细胞生成素受体激活剂；和(b) 包含与SEQ ID NO: 1的氨基酸29
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109的序列具有至少90%同一性的氨基酸序列的多肽，并且其中所述多肽在相应于SEQ ID NO: 1的位置79的位置包含酸性氨基酸；其中所述促红细胞生成素受体激活剂和所述多肽以有效量施用。2.权利要求1所述的方法，其中所述促红细胞生成素受体激活剂的施用量本身在增加红细胞水平方面是无效的。3.权利要求1所述的方法，其中所述多肽的施用量本身在增加患者中红细胞水平方面是无效的，尽管联合治疗是有效的。4.权利要求1所述的方法，其中所述促红细胞生成素受体激活剂是红细胞生成
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刺激剂。5.权利要求4所述的方法，其中所述红细胞生成
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刺激剂是选自下列的基于EPO的衍生物：a. 依伯汀αb. 依伯汀β(NeoRecormon)c. 依伯汀δ(Dynepo)d. 依伯汀ωe. 达贝泊汀α(Aranesp)f. 甲氧基
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聚乙二醇依伯汀β(Micera).g. 合成...

【专利技术属性】
技术研发人员：J西拉，RS皮尔萨尔，R库马，
申请(专利权)人：阿塞勒隆制药公司，
类型：发明
国别省市：