一种Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体公开一种Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法。所述Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法包括：a、大鼠进行高脂进食8周后，按照15mg/kg的剂量腹腔注射5wt％的STZ溶液；b、继续高脂进食5天后，按照20mg/kg的剂量腹腔注射5wt％的STZ溶液；c、继续高脂进食1天后，按照25mg/kg的剂量腹腔注射5wt％的STZ溶液；每次注射前，所述大鼠禁食不禁水16h；三次注射STZ后，在大鼠继续进行高脂进食的第三天、第七天和第十天的空腹血糖≥16.7mmol/L，则Ⅱ型糖尿病大鼠模型建立成功。本发明专利技术的Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法具有成功率和成活率高、稳定性好以及病理特征明显等优势。稳定性好以及病理特征明显等优势。稳定性好以及病理特征明显等优势。

【技术实现步骤摘要】
一种Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法。

技术介绍

[0002]糖尿病是世界范围内的公共卫生问题，预计到2045年将影响6.93亿成年人，严重威胁人类健康。目前全世界每11个成年人中就有1个患有糖尿病，其中90％为Ⅱ型糖尿病(T2D)。亚洲是Ⅱ型糖尿病全球流行的主要地区。T2D及其并发症的病因复杂，发病机制不明确，因此建立理想的动物模型对研究T2D及其并发症的发病机制和治疗具有重要意义。
[0003]目前，国内外有多种途径和方式来获取或构建T2D动物模型。其中高脂饮食(high
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fat diet，HFD)联合链脲佐菌素(streptozocin，STZ)构建的Ⅱ型糖尿病大鼠模型能够模拟人类Ⅱ型糖尿病发病过程，更加接近人类的T2D发病机制。然而传统构建的Ⅱ型糖尿病大鼠模型由于STZ的使用剂量把控难度极大，常会造成超高的动物死亡率。但如果采用低剂量STZ注射，则有会造成动物的成模率低，模型不稳定，模型的病理特征不明显等缺陷。

技术实现思路

[0004]针对现有Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法存在的上述问题，本专利技术提供一种Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法，该Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法具有成活率高、稳定性好、病理特征明显以及构建效率高的优势。
[0005]为达到上述专利技术目的，本专利技术实施例采用了如下的技术方案：
[0006]一种Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法，包括以下步骤：
[0007]a、选取健康6周龄雄性SD大鼠，进行高脂自由进食8周后，按照15mg/kg的剂量腹腔注射5wt％的STZ溶液一次，得到初次注射STZ大鼠；
[0008]b、使所述初次注射STZ大鼠继续进行高脂自由进食5天后，按照20mg/kg的剂量腹腔注射5wt％的STZ溶液一次，得到二次注射STZ大鼠；
[0009]c、使所述二次注射STZ大鼠继续进行高脂自由进食1天后，按照25mg/kg的剂量腹腔注射5wt％的STZ溶液一次，得到三次注射STZ大鼠；
[0010]每次进行所述腹腔注射前，所述大鼠禁食不禁水12
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16h；
[0011]所述三次注射STZ大鼠继续进行高脂自由进食的第三天、第七天和第十天的空腹血糖≥16.7mmol/L，则Ⅱ型糖尿病大鼠模型建立成功。
[0012]相对于现有技术，本专利技术提供的通过高脂饮食联合上述不同剂量、不等时间间隔3次腹腔注射STZ，可成功构建得到Ⅱ型糖尿病大鼠模型。且采用该方法构建的Ⅱ型糖尿病大鼠模型的动物死亡率为0(排出其他环境因素的影响)，建模成功率为100％，构建的Ⅱ型糖尿病大鼠模型的病理特征典型，模型可长期维持Ⅱ型糖尿病的典型病理特征(构建的Ⅱ型糖尿病大鼠模型在实验观察的第3
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24天其血糖浓度均维持在16.7mmol/L以上)，具有极高的模型稳定性。
[0013]优选的，步骤a中，所述健康6周龄雄性SD大鼠的体重为180
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220g。
[0014]优选的，所述高脂自由进食的方法为：给予大鼠充足的高脂饲料，使所述大鼠进行自由进食。
[0015]优选的，所述高脂饲料为45kcal％脂肪热量高脂鼠粮，具体可选用Dyets的45kcal％脂肪热量高脂鼠粮，货号为HF45。
[0016]优选的，所述5wt％的STZ溶液的配置方法为：将0.1mol/L的柠檬酸和0.1mol/L的柠檬酸钠按1:1的体积比混合均匀，得到柠檬酸
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柠檬酸钠缓冲溶液；按比例将STZ粉末溶于所述柠檬酸
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柠檬酸钠缓冲溶液中，得到所述5wt％的STZ溶液。STZ溶液需现配现用。
[0017]优选的，所述柠檬酸
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柠檬酸钠缓冲溶液的pH为4.2
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4.5。
[0018]优选的，所述5wt％的STZ溶液为pH为4.2的无菌溶液。
附图说明
[0019]图1是本专利技术实施例1中三次注射完成后试验组大鼠和对照组大鼠的日饮水量柱形图；
[0020]图2是本专利技术实施例1中三次注射完成后试验组大鼠和对照组大鼠的日摄食量柱形图；
[0021]图3是本专利技术实施例1中三次注射完成后试验组大鼠和对照组大鼠的相对体重变化曲线图；
[0022]图4是本专利技术实施例2中三次注射完成后试验组大鼠和对照组大鼠10天内的空腹血糖变化曲线图；
[0023]图5是本专利技术实施例2中试验组大鼠和对照组大鼠胰岛素抵抗试验中胰岛素敏感指数对比柱形图；
[0024]图6是本专利技术实施例2中试验组大鼠和对照组大鼠胰岛素抵抗试验中胰岛素抵抗指数对比柱形图；
[0025]图7是本专利技术实施例2中试验组大鼠和对照组大鼠耐糖量试验中血糖变化曲线图；
[0026]图8是本专利技术实施例2中试验组大鼠和对照组大鼠耐糖量试验中血糖曲线下面积对比柱形图；
[0027]图9是本专利技术实施例2中试验组大鼠和对照组大鼠的胰腺组织切片图，其中，a、对照组大鼠，b、试验组大鼠。
[0028]图10是本专利技术实施例2中三次注射完成后试验组大鼠和对照组大鼠24天内的空腹血糖变化曲线图；
具体实施方式
[0029]为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0030]实施例1
[0031]1、材料
[0032]选用16只体重在180
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220g的健康雄性SD大鼠，分为两组(试验组和对照组)，每组8只。
[0033]高脂饲料：Dyets的45kcal％脂肪热量高脂鼠粮，货号为HF45。
[0034]普通饲料：购自协同生物的实验鼠饲料，产品编号：SFC9111，实验用鼠生长繁殖饲料。
[0035]柠檬酸
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柠檬酸钠缓冲溶液(无菌)的配置方法：将0.1mol/L的柠檬酸和0.1mol/L的柠檬酸钠按1:1的体积比混合均匀，用0.22μm微孔滤膜过滤，置于4℃冰箱备用，pH为4.2。
[0036]5wt％的STZ溶液(无菌)的配置方法：按比例将STZ粉末溶于所述柠檬酸
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柠檬酸钠缓冲溶液中，得到5wt％的STZ溶液，pH为4.2(5wt％的STZ溶液需现用现配)。
[0037]2、Ⅱ型糖尿病大鼠模型的构建方法
[0038]a、试验组大鼠进行高脂饲料自由进食8周后，按照15mg/kg的注射剂量进行腹腔注射5wt％的STZ溶液一次，注射前大鼠禁食不禁水16h，得到初次注射STZ大鼠；
[0039]对照组大鼠进行普通饲料自由进食8周后，按照与试验组相同注射体积的注射剂量进行腹腔注射柠檬酸
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柠檬酸钠缓冲溶液一次，注射前大鼠禁食不禁水16h，得到初次注射对照大鼠；
[0040]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法，其特征在于：包括以下步骤：a、选取健康6周龄雄性SD大鼠，进行高脂自由进食8周后，按照15mg/kg的剂量腹腔注射5wt％的STZ溶液一次，得到初次注射STZ大鼠；b、使所述初次注射STZ大鼠继续进行高脂自由进食5天后，按照20mg/kg的剂量腹腔注射5wt％的STZ溶液一次，得到二次注射STZ大鼠；c、使所述二次注射STZ大鼠继续进行高脂自由进食1天后，按照25mg/kg的剂量腹腔注射5wt％的STZ溶液一次，得到三次注射STZ大鼠；每次进行所述腹腔注射前，所述大鼠禁食不禁水12
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16h；所述三次注射STZ大鼠继续进行高脂自由进食的第三天、第七天和第十天的空腹血糖≥16.7mmol/L，则Ⅱ型糖尿病大鼠模型建立成功。2.如权利要求1所述的Ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立方法，其特征在于：步骤a中，所述健康6周龄雄性SD大鼠的体重为180
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220g。3.如权利要求1所述的Ⅱ型糖...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨建，马奎，高超，王红然，狄晓松，
申请(专利权)人：河北生命原点生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：