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一种分子信标探针、试剂盒及其体外转录荧光定量实时示踪检测方法和应用技术

技术编号:30543363 阅读:27 留言:0更新日期:2021-10-30 13:21
本发明专利技术提供一种分子信标探针、试剂盒及其体外转录荧光定量实时示踪检测方法和应用,属于分子生物学和核酸检测技术领域。本发明专利技术通过设计一种新型分子信标探针,分子信标探针至少包括两条分子信标探针,分子信标探针均为单链DNA且均能与体外转录产物RNA互补配对结合;其中第一分子信标探针近5

【技术实现步骤摘要】
一种分子信标探针、试剂盒及其体外转录荧光定量实时示踪检测方法和应用


[0001]本专利技术属于分子生物学和核酸检测
,具体涉及一种分子信标探针、试剂盒及其体外转录荧光定量实时示踪检测方法和应用。

技术介绍

[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解,而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]体外转录是指在体外无细胞体系中,以包含启动子区域的线性DNA为模板,添加RNA聚合酶和NTP等条件,模仿体内转录生成RNA的过程。体外转录系统可以方便准确的检测目的基因启动子的转录活性,特异性检测转录调控蛋白、配体分子或金属离子对启动子转录的影响,广泛应用于分子生物学领域中转录机制、转录元件及转录因子的研究。
[0004]体外转录活性的检测聚焦于转录体系中产物RNA的定量。由于微体积体外转录系统中RNA的产量极低,如何特异且灵敏地检测生成的转录产物是分子生物学的一个重要问题。目前检测产物RNA的方法有Northern印迹杂交法、荧光实时逆转录P本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分子信标探针,其特征在于,所述分子信标探针至少包括两条分子信标探针,所述分子信标探针均为单链DNA且均能与体外转录产物RNA互补配对结合;其中第一分子信标探针近5

端或5

端标记有荧光基团,第二分子信标探针的近3

端或3

端标记有猝灭基团。2.如权利要求1所述的分子信标探针,其特征在于,所述分子信标探针的序列长度均控制为15~50bp;所述分子信标探针中的G和C碱基含量控制为30~80%;分子信标探针的Tm值控制为30~90℃。3.如权利要求1所述的分子信标探针,其特征在于,第一分子信标探针与体外转录产物RNA互补区域的3

端,与第二分子信标探针与体外转录产物RNA互补区域的5

端相临。4.如权利要求1所述的分子信标探针,其特征在于,所述荧光基团包括但不限于FAM、ROX或VIC;所述猝灭基团包括但不限于BHQ1、BHQ2或TAMRA。5.一种体外转录检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1

4任一项所述分子信...

【专利技术属性】
技术研发人员:谷立川张冯瑜王晓萌张坤迪王宏伟许素娟
申请(专利权)人:山东大学
类型:发明
国别省市:

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