增强血脑屏障转运的人源化和稳定化的FC5变体制造技术

技术编号：30348934 阅读：19 留言：0更新日期：2021-10-16 16:44

特征是包含抗体可变结构域(例如FC5)的人源化和工程化变体的组合物、包含所述抗体可变结构域的嵌合分子、包含所述嵌合分子的组合物以及它们的用途。以及它们的用途。以及它们的用途。

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【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】增强血脑屏障转运的人源化和稳定化的FC5变体
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2018年10月29日提交的美国临时专利申请号62/751,962的优先权权益，其内容通过引用整体并入本文。

[0003]本公开总体上涉及用于跨血脑屏障递送期望的剂(例如治疗剂、诊断剂)的组合物和使用所述化合物治疗和/或预防神经系统病症的方法。

技术介绍

[0004]药物向中枢神经系统(CNS)的递送一直是治疗神经系统疾病(例如阿尔茨海默病(Alzheimer
’
s disease)和帕金森病(Parkinson
’
s disease))的挑战。为了使药物到达神经系统，它们首先必须穿透血脑屏障(BBB)，这是由BBB的选择性引起的主要挑战。BBB充当半透膜，可防止大多数分子从血液进入神经系统，并且仅允许低分子量(<400Da)和亲脂性化合物通过。大多数小分子和大分子，例如单克隆抗体和反义寡核苷酸，都无法穿过这个屏障。由于药物穿过BBB的过程具有挑战性，因此只有一小部分神经系统疾病的治疗剂可以进入临床试验。
[0005]本领域需要用于将治疗剂递送至CNS的改良的组合物和方法。

技术实现思路

[0006]本申请涉及包含抗体可变结构域(例如FC5变体)的分子，其可用于跨血脑屏障转运治疗剂。
[0007]一方面，本公开特征在于一种跨血脑屏障迁移的抗体可变结构域。所述抗体可变结构包含与SEQ ID NO:1中所示的序列至少85％同一...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种跨血脑屏障迁移的抗体可变结构域，其中所述抗体可变结构域包含与SEQ ID NO：1至少85％同一的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列包含互补决定区CDR1、CDR2和CDR3，其中CDR2包含SEQ ID NO：50中所示的序列，并且其中：(i)CDR1包含SEQ ID NO：47中所示的序列，CDR3包含SEQ ID NO：51中所示的序列，并且所述氨基酸序列在与SEQ ID NO：1的位置49和70对应的位置处包含半胱氨酸；(ii)CDR1包含SEQ ID NO：48中所示的序列，CDR3包含SEQ ID NO：51中所示的序列，并且所述氨基酸序列在与SEQ ID NO：1的位置79对应的位置处包含半胱氨酸；(iii)CDR1包含SEQ ID NO：49中所示的序列，并且CDR3包含SEQ ID NO：52中所示的序列；(iv)CDR1包含SEQ ID NO：58中所示的序列，并且CDR3包含SEQ ID NO：52中所示的序列；(v)CDR1包含SEQ ID NO：49中所示的序列，并且CDR3包含SEQ ID NO：53中所示的序列；(vi)CDR1包含SEQ ID NO：58中所示的序列，并且CDR3包含SEQ ID NO：53中所示的序列；(vii)CDR1包含SEQ ID NO：49中所示的序列，并且CDR3包含SEQ ID NO：54中所示的序列；(viii)CDR1包含SEQ ID NO：58中所示的序列，并且CDR3包含SEQ ID NO：54中所示的序列；(ix)CDR1包含SEQ ID NO：49中所示的序列，并且CDR3包含SEQ ID NO：55中所示的序列；或(x)CDR1包含SEQ ID NO：58中所示的序列，并且CDR3包含SEQ ID NO：55中所示的序列。2.如权利要求1所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置1、5、6、14、37、44、45、47、75、87、88、93、114或117对应的位置中的一个或多个处的取代。3.如权利要求2所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含以下中的一个或多个：在与SEQ ID NO：1的位置1对应的位置处的谷氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置5对应的位置处的缬氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置6对应的位置处的谷氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置14对应的位置处的脯氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置37对应的位置处的缬氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置44对应的位置处的甘氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置45对应的位置处的亮氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置47对应的位置处的色氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置75对应的位置处的丝氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置87对应的位置处的精氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置88对应的位置处的丙氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置93对应的位置处的缬氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置114对应的位置处的谷氨酰胺；或
在与SEQ ID NO：1的位置117对应的位置处的亮氨酸。4.如权利要求1所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置5、6、14、75、87、88、93、114或117对应的位置中的一个或多个处的取代。5.如权利要求4所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含以下中的一个或多个：在与SEQ ID NO：1的位置5对应的位置处的缬氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置6对应的位置处的谷氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置14对应的位置处的脯氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置75对应的位置处的丝氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置87对应的位置处的精氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置88对应的位置处的丙氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置93对应的位置处的缬氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置114对应的位置处的谷氨酰胺；或在与SEQ ID NO：1的位置117对应的位置处的亮氨酸。6.如权利要求1所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置44和45对应的位置处的取代。7.如权利要求6所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含：在与SEQ ID NO：1的位置44对应的位置处的甘氨酸；以及在与SEQ ID NO：1的位置45对应的位置处的亮氨酸。8.如权利要求1所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置1、44和45对应的位置处的取代。9.如权利要求8所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含：在与SEQ ID NO：1的位置1对应的位置处的谷氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置44对应的位置处的甘氨酸；以及在与SEQ ID NO：1的位置45对应的位置处的亮氨酸。10.如权利要求1所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置44、45和47对应的位置处的取代。11.如权利要求10所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含：在与SEQ ID NO：1的位置44对应的位置处的甘氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置45对应的位置处的亮氨酸；以及在与SEQ ID NO：1的位置47对应的位置处的色氨酸。12.如权利要求1所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置1、44、45和47对应的位置处的取代。13.如权利要求12所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含：在与SEQ ID NO：1的位置1对应的位置处的谷氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置44对应的位置处的甘氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置45对应的位置处的亮氨酸；以及在与SEQ ID NO：1的位置47对应的位置处的色氨酸。
14.如权利要求1所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置37、44、45和47对应的位置处的取代。15.如权利要求14所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含：在与SEQ ID NO：1的位置37对应的位置处的缬氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置44对应的位置处的甘氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置45对应的位置处的亮氨酸；以及在与SEQ ID NO：1的位置47对应的位置处的色氨酸。16.如权利要求1所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置1、37、44、45和47对应的位置处的取代。17.如权利要求16所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含：在与SEQ ID NO：1的位置1对应的位置处的谷氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置37对应的位置处的缬氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置44对应的位置处的甘氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置45对应的位置处的亮氨酸；以及在与SEQ ID NO：1的位置47对应的位置处的色氨酸。18.如权利要求1所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置37、44、45、47和79对应的位置处的取代。19.如权利要求18所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含：在与SEQ ID NO：1的位置37对应的位置处的缬氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置44对应的位置处的甘氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置45对应的位置处的亮氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置47对应的位置处的色氨酸；以及在与SEQ ID NO：1的位置79对应的位置处的亮氨酸。20.如权利要求1所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置1、37、44、45、47和79对应的位置处的取代。21.如权利要求20所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含：在与SEQ ID NO：1的位置1对应的位置处的谷氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置37对应的位置处的缬氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置44对应的位置处的甘氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置45对应的位置处的亮氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置47对应的位置处的色氨酸；以及在与SEQ ID NO：1的位置79对应的位置处的亮氨酸。22.如权利要求1所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列为SEQ ID NO：20至28中的任一个中所示的序列。23.一种跨血脑屏障迁移的抗体可变结构域，其中所述抗体可变结构域包含与SEQ ID NO：1中所示的序列至少85％同一的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列包含：(i)与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置5、6、14、75、87、88、93、114和117对应的位置中的一个或多个处的氨基酸取代；以及(ii)包含SEQ ID NO：47或57中所示的序列的互补决定区(CDR)1、包含SEQ ID NO：50中
所示的序列的CDR2和包含SEQ ID NO：51中所示的序列的CDR3。24.如权利要求23所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置5、6、14、75、87、88、93、114和117对应的位置中的至少四个处的氨基酸取代。25.如权利要求23所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置5、6、14、75、87、88、93、114和117对应的位置中的至少五个处的氨基酸取代。26.如权利要求23所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置5、6、14、75、87、88、93、114和117对应的位置中的至少六个处的氨基酸取代。27.如权利要求23所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置5、6、14、75、87、88、93、114和117对应的位置中的每一个处的氨基酸取代。28.如权利要求23所述的抗体可变结构域，其中CDR1包含SEQ ID NO：47中所示的序列。29.如权利要求23所述的抗体可变结构域，其中CDR1包含SEQ ID NO：57中所示的序列。30.如权利要求23至29中任一项所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含以下中的一个或多个：在与SEQ ID NO：1的位置5对应的位置处的缬氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置6对应的位置处的谷氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置14对应的位置处的脯氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置75对应的位置处的丝氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置87对应的位置处的精氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置88对应的位置处的丙氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置93对应的位置处的缬氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置114对应的位置处的谷氨酰胺；或在与SEQ ID NO：1的位置117对应的位置处的亮氨酸。31.如权利要求23至29中任一项所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含：在与SEQ ID NO：1的位置5对应的位置处的缬氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置6对应的位置处的谷氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置14对应的位置处的脯氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置75对应的位置处的丝氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置87对应的位置处的精氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置88对应的位置处的丙氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置93对应的位置处的缬氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置114对应的位置处的谷氨酰胺；以及在与SEQ ID NO：1的位置117对应的位置处的亮氨酸。32.如权利要求23至31中任一项所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置1、37、44、45、47或79对应的位置中的一个或多个处的取代。
33.如权利要求32所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含以下中的一个或多个：在与SEQ ID NO：1的位置1对应的位置处的谷氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置37对应的位置处的缬氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置44对应的位置处的甘氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置45对应的位置处的亮氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置47对应的位置处的色氨酸；或在与SEQ ID NO：1的位置79对应的位置处的亮氨酸。34.如权利要求23至31中任一项所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置44和45对应的位置处的取代。35.如权利要求34所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含：在与SEQ ID NO：1的位置44对应的位置处的甘氨酸；以及在与SEQ ID NO：1的位置45对应的位置处的亮氨酸。36.如权利要求23至31中任一项所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置1、44和45对应的位置处的取代。37.如权利要求36所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含：在与SEQ ID NO：1的位置1对应的位置处的谷氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置44对应的位置处的甘氨酸；以及在与SEQ ID NO：1的位置45对应的位置处的亮氨酸。38.如权利要求23至31中任一项所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置44、45和47对应的位置处的取代。39.如权利要求38所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含：在与SEQ ID NO：1的位置44对应的位置处的甘氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置45对应的位置处的亮氨酸；以及在与SEQ ID NO：1的位置47对应的位置处的色氨酸。40.如权利要求23至31中任一项所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置1、44、45和47对应的位置处的取代。41.如权利要求40所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含：在与SEQ ID NO：1的位置1对应的位置处的谷氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置44对应的位置处的甘氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置45对应的位置处的亮氨酸；以及在与SEQ ID NO：1的位置47对应的位置处的色氨酸。42.如权利要求23至31中任一项所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置37、44、45和47对应的位置处的取代。43.如权利要求42所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含：在与SEQ ID NO：1的位置37对应的位置处的缬氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置44对应的位置处的甘氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置45对应的位置处的亮氨酸；以及在与SEQ ID NO：1的位置47对应的位置处的色氨酸。
44.如权利要求23至31中任一项所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置1、37、44、45和47对应的位置处的取代。45.如权利要求44所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含：在与SEQ ID NO：1的位置1对应的位置处的谷氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置37对应的位置处的缬氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置44对应的位置处的甘氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置45对应的位置处的亮氨酸；以及在与SEQ ID NO：1的位置47对应的位置处的色氨酸。46.如权利要求23至31中任一项所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1相比在与SEQ ID NO：1的位置37、44、45、47和79对应的位置处的取代。47.如权利要求46所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列包含：在与SEQ ID NO：1的位置37对应的位置处的缬氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置44对应的位置处的甘氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置45对应的位置处的亮氨酸；在与SEQ ID NO：1的位置47对应的位置处的色氨酸；以及在与SEQ ID NO：1的位置79对应的位置处的亮氨酸。48.如权利要求23所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列为SEQ ID NO：10至17中的任一个中所示的序列。49.如权利要求40所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列为SEQ ID NO：20中所示的序列。50.如权利要求40所述的抗体可变结构域，其中所述氨基酸序列为SEQ ID NO：26中所示的序列。51.一种嵌合分子，所述嵌合分子包含如权利要求1至50中任一项所述的抗体可变结构域。52.如权利要求51所述的嵌合分子，所述嵌合分子包含抗体Fc区。53.如权利要求51或52所述的嵌合分子，所述嵌合分子包含抗体、抗体的抗原结合片段、肽、酶、寡核苷酸、小分子药物或者包封核酸、小分子药物或肽的脂质体或脂质纳米粒子。54.如权利要求51所述的嵌合分子，其中所述抗体可变结构域(i)直接连接，或(ii)经由间插氨基酸序列连接至抗体的铰链区的N端，并且其中所述铰链区与Fc部分融合。55.如权利要求54所述的嵌合分子，其中所述铰链区包含序列AEPKSCD(SEQ ID NO：56)、AEPKSSD(SEQ ID NO：59)或KTHTCPPCP(SEQ ID NO：19)。56.如权利要求54所述的嵌合分子，其中所述间插氨基酸序列包含以下中的一种：抗体的重链可变区；抗体的轻链可变区；酶；肽或包含氨基酸序列3X(G4S)(S...

【专利技术属性】
技术研发人员：BA史密斯，A莱曼，TO卡梅隆，RB佩平斯基，D温，GK法林顿，G拉古纳坦，NE佩德森，D斯塔尼米罗维奇，T苏莱亚，AS哈卡尼，
申请(专利权)人：加拿大国立研究院，
类型：发明
国别省市：

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