一种重组CHO细胞发酵培养生产重组EGFR抗体活性分子的方法技术

本发明专利技术提供了一种重组CHO细胞发酵培养生产重组EGFR抗体活性分子的方法。所述方法包括下述步骤：(1)接种培养：将用于生产重组EGFR抗体活性分子的CHO细胞株种子液接种于第一培养基中，得初始发酵液，并发酵培养；(2)补料发酵：接种培养发酵48

【技术实现步骤摘要】
一种重组CHO细胞发酵培养生产重组EGFR抗体活性分子的方法


[0001]本专利技术涉及生物医药发酵
，具体而言，涉及一种重组CHO细胞发酵培养生产重组EGFR抗体活性分子的方法。

技术介绍

[0002]表皮生长因子受体，即EGFR(epidermal growth factor receptor，简称为EGFR)是原癌基因c
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erbB1的表达产物，是一个170kDa的跨膜糖蛋白受体酪氨酸激酶，在细胞生理过程中发挥重要的调节作用。EGFR广泛分布于哺乳动物上皮细胞、成纤维细胞、胶质细胞、角质细胞等细胞表面，EGFR信号通路对细胞的生长、增殖和分化等生理过程发挥重要的作用。EGFR功能缺失或其相关信号通路中关键因子的活性或细胞定位异常，会引起肿瘤、糖尿病、免疫缺陷及心血管疾病的发生。EGFR的单克隆抗体西妥昔单抗和帕尼单抗的问世大大拓宽了转移性结直肠肿瘤疗效。
[0003]糖基化作为抗体最重要的翻译后修饰对抗体的生物活性具有重要的作用，不同糖基化修饰对单抗药物的药化药代特性及药效的发挥有着重要的作用，因此糖基化水本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种重组CHO细胞发酵生产重组EGFR抗体活性分子的方法，包括下述步骤：(1)接种培养：将用于生产重组EGFR抗体活性分子的CHO细胞株种子液接种于第一培养基中，得初始发酵液，并发酵培养；(2)补料发酵：接种培养发酵48
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96h后，每天或每隔1天或每隔2天补加1
‑
8％初始发酵液体积的第二培养基，继续发酵；(3)当细胞活率≤50％或培养14
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20天后，终止培养，收获发酵液；其中，所述第一培养基以CDM4PERMab为基质，且还添加有：4
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8mM/LL
‑
Gln(L
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谷氨酰胺)和2
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5g/L Sheff
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CHO PF ACF；所述第二培养基以高效补料培养基为基质，且还添加有：20
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80g/LSheff
‑
CHO PF ACF；且补料发酵时，添加L
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胱氨酸二盐酸盐，使得发酵液中含有40
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80mg/L的L
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胱氨酸二盐酸盐；且发酵时，发酵液葡萄糖浓度为3
‑
6g/L，pH为7.2
±
0.3。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效补料培养基为2*103A高效补料培养基。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一培养基还包括0.01
‑
1wt％泊洛沙姆188，较佳地，0.02
‑
0.3wt％。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述发酵具有一个或多个选自下组的技术特征：(i)发酵培养的温度37
±
1℃；(ii)pH为7.0
‑
7.3；(iii)DO:40
±
2％；(iv)搅拌：75
±
10rpm；(v)表通空气：2.0
±
0.2LPM；或(vi)底通空气：1.5
±
0.2LPM。5.如权利要求1所述的方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭红卫，周小辛，
申请(专利权)人：上海景泽生物技术有限公司江苏璟泽生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：