用于联合免疫治疗的方法和组合物技术

本申请涉及用于联合免疫治疗的方法和组合物。本发明专利技术提供了用于使用腺病毒载体产生免疫应答的方法，该方法允许使用相同腺病毒载体进行多次疫苗接种以及在具有预先存在的对腺病毒的免疫力的个体中进行疫苗接种。病毒的免疫力的个体中进行疫苗接种。

【技术实现步骤摘要】
用于联合免疫治疗的方法和组合物
[0001]本申请是申请日为2016年01月07日，申请号为201680014846.8，专利技术名称为“用于联合免疫治疗的方法和组合物”的申请的分案申请。交叉引用
[0002]本申请要求于2015年1月9日提交的美国临时申请号62/101,969和于2015年4月20日提交的美国临时申请号62/150,236的优先权，这些申请通过引用而整体并入本文。相关申请
[0003]本申请涉及于2013年3月15日提交的PCT申请号PCT/US2013/032688，该申请的内容通过引用而整体并入于此。

技术介绍

[0004]疫苗通过训练免疫系统识别并破坏有害物质和病变细胞来帮助身体抵抗疾病。疫苗可大致分为预防疫苗和治疗疫苗两种类型。将预防疫苗给予健康的人，以防止特定疾病的发展，而将治疗疫苗(也称为免疫治疗)给予被诊断出患有疾病的人，以帮助阻止该疾病的发展和扩散或作为预防性的。目前正在开发病毒疫苗以帮助抵抗感染性疾病和癌症。这些病毒疫苗通过诱导与宿主细胞内的疾病相关联的基因的一小部分的表达而起作用，这继而强化宿主的免疫系统以鉴定并破坏病变细胞。因此，病毒疫苗的临床反应可取决于疫苗获得高水平免疫原性和具有持续长期的表达的能力。免疫检查点如免疫抑制途径可在调节潜在免疫原性的生理学免疫应答的持续时间和幅度方面发挥关键作用。通过将疫苗的施用与抑制免疫检查点免疫抑制途径的药物相组合，可以能够增强疫苗在患者中的功效和有效性。
[0005]通过递送肿瘤相关抗原(TAA)实现的癌症免疫治疗可具有存活期益处；然而，存在对这些策略的限制，并且需要更多的免疫有效的疫苗。已经采用了包括佐剂和免疫刺激细胞因子共同施用在内的多种疫苗接种策略来解决自身肿瘤抗原的低免疫原性。替代方案包括使用内在地提供先天性促炎信号并表达感兴趣的抗原的重组病毒载体。基于腺病毒血清型
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5(Ad5)的免疫治疗剂已被反复用于人类中，以诱导稳定的T细胞介导的免疫(CMI)应答，同时保持安全。尽管Ad5载体已经大量生产，并且对于门诊施用的储存和递送是稳定的，但使用第一代(E1缺失型)基于Ad5的载体的主要障碍在于高频率的预先存在的抗Ad5中和抗体(NAb，其可存在于来自先前野生型腺病毒感染的宿主中)，或者通过重复注射基于Ad5的疫苗而对Ad5 NAb的诱导，每种均导致对靶TAA的免疫刺激不充足。
[0006]采用腺病毒(Ad)载体的主要问题在于它们无法维持长期的转基因表达，这主要是由于宿主免疫应答消除了有免疫能力的受试者中的Ad载体和病毒转导细胞。第一代Ad载体疫苗的使用受到预先存在的或诱导的疫苗对Ad的免疫力的严重限制。大多数人具有Ad5 NAb，并且三分之二具有针对Ad的淋巴增殖反应。携带HIV
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1包膜基因的Ad载体疫苗不能在没有佐剂的情况下使用DNA再次免疫初次免疫应答。非人灵长类动物的单次免疫不能生成针对HIV蛋白的转基因特异性抗体，或改变总体T细胞应答。
[0007]存在预先存在的免疫力干扰Ad载体疫苗的许多机制，但一个主要关注的问题是，
在Ad感染的携带抗原的细胞的CMI消除之前存在NAb。这两种应答都可针对数种Ad蛋白。尽管增加疫苗剂量可使Ad免疫动物中对期望的CMI应答的诱导增加，但在动物和人类中产生通常不能接受的不良反应。使用第一代Ad5载体(使用裸(非载体的)DNA作为引发疫苗接种的异源初次
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加强方案)，然后进行Ad5载体免疫可导致针对Ad5的后续免疫应答，从而使得不能用使用了相同病毒骨架的相同(或不同)Ad载体疫苗施用进一步的再免疫(增强)。因此，使用采用了当前第一代Ad5载体的这种方法可取消Ad5载体免疫的进一步使用。
[0008]第一代(E1缺失型)Ad载体疫苗表达Ad晚期基因，尽管是以比野生型Ad病毒更低的水平且在更长的时间段内进行表达，并且疫苗抗原与高度免疫原性的Ad衣壳蛋白同时呈递给免疫系统。由于抗原竞争，产生的免疫应答不太可能针对期望的疫苗表位，而是更可能针对Ad衍生的抗原。基于Ad5的载体面临的主要问题之一是人类群体中预先存在的对Ad的免疫力的高倾向，以及对于任何其他疫苗应用，这种高倾向如何可阻碍常规Ad5[E1
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]缺失型(第一代Ad)在大多数人类群体中的使用。使用第一代(E1缺失型)基于Ad5的载体的主要障碍在于高频率的预先存在的抗5型腺病毒中和抗体。这些抗体可由于先前的野生型腺病毒感染和/或通过重复注射基于Ad5的疫苗而导致的对腺病毒中和抗体的诱导(每种均导致针对靶TAA的免疫刺激不充足)而存在于潜在疫苗中。
[0009]因此，仍然需要更多有效的癌症疫苗载体候选物。需要允许进行多次疫苗接种和在具有预先存在的对Ad的免疫力的个体中进行疫苗接种的靶向癌症的Ad疫苗载体。虽然通过递送肿瘤相关抗原(TAA)实现的癌症免疫治疗提供了存活期益处，但存在对这些策略的限制，并且需要更多的免疫有效的疫苗。

技术实现思路

[0010]为了克服这些挑战，本专利技术提供了用于增强对复杂疾病如感染性疾病和癌症的治疗反应的组合多靶向疫苗、免疫治疗和方法。本公开内容涉及用于在个体中产生免疫应答以抵抗感染性疾病和癌症的组合物、方法和试剂盒。本公开内容提供了用于产生针对靶抗原或者表达或呈递靶抗原或包含至少一种靶抗原的靶抗原标记(signature)的细胞的免疫应答的组合物、方法和试剂盒。
[0011]已经发现，Ad5[E1
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,E2b
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]载体不仅比Ad5[E1
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]载体更安全，而且在诱导抗原特异性免疫应答方面似乎更优越，从而使得它们更适合作为递送可导致临床反应的MUC1、T和/或CEA疫苗的平台。在其他情况下，免疫诱导可能需要数月的时间。Ad5[E1
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,E2b
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]载体不仅比Ad5[E1
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]载体更安全，而且在诱导抗原特异性免疫应答方面似乎更优越，从而使得它们更适合作为递送可导致临床反应的MUC1c、T和/或CEA疫苗的平台。
[0012]本专利技术的各个实施方案通过利用新型Ad5[E1
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,E2b
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]载体系统为开发针对MUC1、T和/或CEA的治疗疫苗提供长期受欢迎的需要的优势，克服了采用其他Ad5系统所发现的障碍，并允许对先前已经暴露于Ad5的人进行免疫。在本专利技术的其他实施方案中，通过利用新型Ad5[E1
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,E2b
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]载体系统为开发针对MUC1c、T和/或CEA的治疗疫苗提供长期受欢迎的需要的优势，克服了采用其他Ad5系统所发现的障碍，并允许对先前已经暴露于Ad5的人进行免疫。在本专利技术的其他实施方案中，通过利用新型Ad5[E1
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,E2b
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]载体系统为开发针对MUC1n、T或CEA的治疗疫苗提供长期受欢迎的需要的优势，克服了采用其他Ad5系统所发现的障碍，并允许对先前已经暴露于Ad5的人进行免疫。
[本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.组合：(a)复制缺陷型5型腺病毒载体，其含有E2b基因区的缺失、E1基因区的缺失以及编码CEA抗原的核苷酸序列；(b)抗PDL1单克隆抗体；和(c)化疗；其中所述组合用于治疗表达CEA的癌症的方法。2.根据权利要求1所述的组合，其中所述CEA抗原的核苷酸序列与SEQ ID NO:1或其片段具有至少90％序列同一性。3.根据权利要求1
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2中任一项所述的组合，其中所述核苷酸序列编码包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列。4.根据权利要求1
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3中任一项所述的组合，其中所述复制缺陷型载体还含有E3基因区的缺失、E4基因区的缺失或其任何组合。5.根据权利要求1
‑
4中任一项所述的组合，其中所述化疗包括甲酰四氢叶酸、氟尿嘧啶和奥沙利铂。6.根据权利要求1
‑
5中任一项所述的组合，还包含抗VEGF抗体，其中任选地，所述抗VEGF抗体是贝伐单抗。7.根据权利要求1
‑
6中任一项所述的组合，其中当所述组合被使用时，所述组合被施用于受试者。8.根据权利要求7所述的组合，其中所述组合的施用包括施用5x10
11
个含有编码CEA抗原的所述核苷酸序列的复制缺陷型5型腺病毒载体的病毒颗粒(VP)。9.根据权利要求7
‑
8中任一项所述的组合，其中所述组合的施用包括每两周、每四周或每12周施用含有编码CEA抗原的所述核苷酸序列的所述重组复制缺陷型5型腺病毒病毒载体。10.根据权利要求7
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9中任一项所述的组合，其中所述组合的施用包括静脉内、皮下、肌内或皮内施用含有编码CEA抗原的所述核苷酸序列的所述重组复制缺陷型5型腺病毒病毒载体。11.根据权利要求7
‑
10中任一项所述的组合，其中所述受试者具有结肠癌、直肠癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、胃肠道癌、卵巢癌或其组合。12.根据权利要求7
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11中任一项所述的组合，其中所述受试者是人。13.根据权利要求7
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12中任一项所述的组合，其中所述受试者具有预先存在的对腺病毒的免疫力。14.组合：(a)复制缺陷型5型腺病毒载体，其含有E2b...

【专利技术属性】
技术研发人员：弗兰克，
申请(专利权)人：埃图比克斯公司，
类型：发明
国别省市：