用于流感疫苗接种的方法和组合物技术

描述了用于构建和产生含有多种流感抗原基因的基于重组腺病毒的载体疫苗的方法，该疫苗用于产生针对甲型和乙型流感病毒的广泛免疫应答，并且允许在对腺病毒具有预先存在的免疫力的个体中进行多次疫苗接种。特别地，该基于重组腺病毒的载体是在早期2b(E2b)基因中包含缺失的复制缺陷型腺病毒载体。

Methods and compositions for influenza vaccination

A method for constructing and producing recombinant adenovirus-based vector vaccine containing multiple influenza antigen genes is described. The vaccine is used to generate a broad immune response to influenza A and B viruses and allows multiple vaccinations in individuals with pre-existing immunity to adenovirus. In particular, the recombinant adenovirus-based vector contains deleted replication-deficient adenovirus vectors in the early 2B (E2b) gene.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于流感疫苗接种的方法和组合物交叉引用本申请要求于2016年1月15日提交的美国临时专利申请号62/279,267和于2016年2月12日提交的美国临时专利申请号62/294,840的权益，所述临时专利申请的全部内容通过引用而并入。政府利益声明本专利技术在国立卫生研究院(NIH)的国家变态反应和传染病研究所(NIAID)授予的研究基金RO1AI111364下由政府支持完成。政府可对本专利技术享有一定的权利。
技术介绍
疫苗通过训练免疫系统识别并破坏有害物质和病变细胞来帮助身体抵抗疾病。疫苗可大致分为预防疫苗和治疗疫苗两种类型。将预防疫苗给予健康的人，以防止特定疾病的发生，而将治疗疫苗(也称为免疫治疗)给予被诊断出患有疾病的人，以帮助阻止该疾病的发展和扩散或作为预防性的。目前正在开发病毒疫苗来帮助抵抗感染性疾病和癌症。这些病毒疫苗通过诱导与宿主细胞内的疾病相关联的基因的一小部分的表达而起作用，这继而强化宿主的免疫系统以鉴定并破坏病变细胞。因此，病毒疫苗的临床反应可取决于疫苗获得高水平免疫原性和具有持续长期的表达的能力。仍然存在开发用于增强对诸如感染性疾病等复杂疾病的治疗反应的方法和组合物的需求。
技术实现思路
在各个方面，本公开内容提供了一种组合物，其包含：在E2b基因区中包含缺失的复制缺陷型腺病毒载体；以及编码甲型流感靶抗原和乙型流感靶抗原的核酸序列。在一些方面，所述甲型流感靶抗原是甲型流感病毒的靶抗原。在进一步的方面，所述甲型流感靶抗原和所述乙型流感靶抗原是甲型流感病毒和乙型流感病毒共同的靶抗原。在一些方面，所述复制缺陷型腺病毒载体进一步在E1区中包含缺失。在进一步的方面，所述复制缺陷型腺病毒载体进一步在E3区中包含缺失。在更进一步的方面，所述复制缺陷型腺病毒载体进一步在E4区中包含缺失。在一些方面，所述复制缺陷型腺病毒载体进一步在E3和E4区中包含缺失。在一些方面，所述甲型流感靶抗原包括选自H3N2、H9N1、H1N1、H2N2、H7N7、H1N2、H9N2、H7N2、H7N3、H10N7及其组合的病毒的抗原。在其他方面，所述乙型流感靶抗原包括选自乙型流感/山形株(Yamagata)病毒和乙型流感/维多利亚株(Victoria)病毒的病毒的抗原。在其他方面，所述甲型流感靶抗原是来自蛋白质的抗原，所述蛋白质选自基质蛋白M2、基质蛋白M2的M2e部分、血凝素、血凝素柄、神经氨酸酶、核蛋白、基质蛋白M1及其组合。在一些方面，所述乙型流感靶抗原是来自选自蛋白质的抗原，所述蛋白质BM2蛋白、血凝素、血凝素柄、神经氨酸酶、核蛋白及其组合。在一些方面，所述缺失包含碱基对。在进一步的方面，所述缺失包含至少20个、至少30个、至少40个、至少50个、至少60个、至少70个、至少80个、至少90个、至少100个、至少110个、至少120个、至少130个、至少140个或至少150个碱基对。在更进一步的方面，所述缺失包含多于150个、多于160个、多于170个、多于180个、多于190个、多于200个、多于250个或多于300个碱基对。在一些方面，所述腺病毒载体包含编码至少1种、至少2种、至少3种、至少4种、至少5种、至少6种、至少7种、至少8种、至少9种或至少10种甲型流感靶抗原的核酸。在一些方面，所述腺病毒载体包含编码多种甲型流感靶抗原的核酸。在其他方面，所述腺病毒载体包含编码至少1种、至少2种、至少3种、至少4种、至少5种、至少6种、至少7种、至少8种、至少9种或至少10种乙型流感靶抗原的核酸。在一些方面，所述腺病毒载体包含编码多种乙型流感靶抗原的核酸。在进一步的方面，所述腺病毒载体进一步包含增加所述甲型流感靶抗原、所述乙型流感靶抗原或两者的表达的元件。在一些方面，所述元件包括至少1种元件、至少2种元件、至少3种元件、至少4种元件或至少5种元件。在一些方面，所述元件包括内部核糖体结合位点。在一些方面，所述元件包括组成型启动子。在其他方面，所述元件包括诱导型启动子。在其他方面，所述元件包括转录增强子。在一些方面，所述转录增强子是劳斯肉瘤病毒(RSV)增强子。在一些方面，所述元件不含回文序列。在一些方面，所述腺病毒载体进一步包含编码增加所述甲型流感靶抗原、所述乙型流感靶抗原或两者的免疫原性的蛋白质的核酸序列。在一些方面，所述腺病毒载体不是无内容载体。在一些方面，所述组合物或所述复制缺陷型腺病毒载体进一步包含编码共刺激分子的核酸序列。在进一步的方面，所述共刺激分子包括B7、ICAM-1、LFA-3或其组合。在更进一步的方面，所述共刺激分子包括B7、ICAM-1和LFA-3的组合。在一些方面，所述腺病毒载体包含所述编码甲型流感靶抗原和乙型流感靶抗原的核酸序列。在一些实施方案中，所述组合物包含至少1x108个病毒颗粒(VP)但不超过5x1010个VP。在其他实施方案中，所述组合物包含至少1x108个病毒颗粒(VP)但不超过1x1012个VP。在各个方面，本公开内容提供了在有需要的个体中产生针对甲型流感靶抗原和乙型流感靶抗原的免疫应答的方法，包括向所述个体施用根据上述组合物中的任一种的组合物。在各个方面，本公开内容提供了在个体中产生针对甲型流感靶抗原和乙型流感靶抗原的免疫应答的方法，包括向所述个体施用第一腺病毒载体，所述第一腺病毒载体包含：复制缺陷型腺病毒载体和编码甲型流感靶抗原和乙型流感靶抗原的核酸，其中所述腺病毒载体在E2b区中具有缺失；向所述个体施用第二腺病毒载体，所述第二腺病毒载体包含：(a)复制缺陷型腺病毒载体，其中所述腺病毒载体在E2b区中具有缺失，和(b)编码甲型流感靶抗原和乙型流感靶抗原的核酸；从而产生针对一种或多种甲型和乙型流感靶抗原的免疫应答。在各个方面，本公开内容提供了在个体中产生针对甲型流感靶抗原和乙型流感靶抗原的免疫应答的方法，包括：(a)向所述个体施用第一载体，所述第一载体包含：(i)复制缺陷型腺病毒载体，其中所述腺病毒载体在E2b区中具有缺失，和(ii)编码第一甲型流感靶抗原和第一乙型流感靶抗原的核酸；以及(b)随后向所述个体施用第二载体，所述第二载体包含：(i)步骤(a)的所述复制缺陷型腺病毒载体，和(ii)编码第二甲型流感靶抗原和第二乙型流感靶抗原的核酸，其中所述第二载体的所述第二甲型流感靶抗原与所述第一载体的所述第一甲型流感靶抗原相同或不同，并且其中所述第二载体的所述第二乙型流感靶抗原与所述第一载体的所述第一乙型流感靶抗原相同或不同；从而产生针对所述第一靶抗原和所述第二靶抗原的免疫应答。在各个方面，本公开内容提供了在个体中产生针对甲型流感靶抗原和乙型流感靶抗原的免疫应答的方法，包括：向所述个体施用包含复制缺陷型腺病毒载体和编码甲型流感靶抗原和乙型流感靶抗原的核酸的腺病毒载体，其中所述腺病毒载体在E2b区中具有缺失；以及向所述个体重新施用所述腺病毒载体至少一次；从而产生针对所述甲型和乙型流感靶抗原的免疫应答。在各个方面，本公开内容提供了构建通用流感疫苗载体的方法，包括将编码甲型流感靶抗原和乙型流感靶抗原的核酸插入复制缺陷型腺病毒载体中，其中所述腺病毒载体在E2b区中具有缺失。在一些方面，所述甲型流感靶抗原包括选自H3N2、H9N1、H1N1、H2N2、H7N7、H1N2、H9N2、H7N2、H7N本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种组合物，其包含：在E2b基因区中包含缺失的复制缺陷型腺病毒载体；以及编码甲型流感靶抗原和乙型流感靶抗原的核酸序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.01.15 US 62/279,267;2016.02.12 US 62/294,8401.一种组合物，其包含：在E2b基因区中包含缺失的复制缺陷型腺病毒载体；以及编码甲型流感靶抗原和乙型流感靶抗原的核酸序列。2.如权利要求1所述的组合物，其中所述甲型流感靶抗原是甲型流感病毒的靶抗原。3.如权利要求1所述的组合物，其中所述甲型流感靶抗原和所述乙型流感靶抗原是甲型流感病毒和乙型流感病毒共同的靶抗原。4.如权利要求1-3中任一项所述的组合物，其中所述复制缺陷型腺病毒载体进一步在E1区中包含缺失。5.如权利要求4所述的组合物，其中所述复制缺陷型腺病毒载体进一步在E3区中包含缺失。6.如权利要求4所述的组合物，其中所述复制缺陷型腺病毒载体进一步在E4区中包含缺失。7.如权利要求4所述的组合物，其中所述复制缺陷型腺病毒载体进一步在E3和E4区中包含缺失。8.如权利要求1-7中任一项所述的组合物，其中所述甲型流感靶抗原包括选自H3N2、H9N1、H1N1、H2N2、H7N7、H1N2、H9N2、H7N2、H7N3、H10N7及其组合的病毒的抗原。9.如权利要求1-8中任一项所述的组合物，其中所述乙型流感靶抗原包括选自乙型流感/山形株病毒和乙型流感/维多利亚株病毒的病毒的抗原。10.如权利要求1-9中任一项所述的组合物，其中所述甲型流感靶抗原是来自蛋白质的抗原，所述蛋白质选自基质蛋白M2、基质蛋白M2的M2e部分、血凝素、血凝素柄、神经氨酸酶、核蛋白、基质蛋白M1及其组合。11.如权利要求1-10中任一项所述的组合物，其中所述乙型流感靶抗原是来自蛋白质的抗原，所述蛋白质选自BM2蛋白、血凝素、血凝素柄、神经氨酸酶、核蛋白及其组合。12.如权利要求1-11中任一项所述的组合物，其中所述缺失包含碱基对。13.如权利要求12所述的组合物，其中所述缺失包含至少20个、至少30个、至少40个、至少50个、至少60个、至少70个、至少80个、至少90个、至少100个、至少110个、至少120个、至少130个、至少140个或至少150个碱基对。14.如权利要求13所述的组合物，其中所述缺失包含多于150个、多于160个、多于170个、多于180个、多于190个、多于200个、多于250个或多于300个碱基对。15.如权利要求1-14中任一项所述的组合物，其中所述腺病毒载体包含编码至少1种、至少2种、至少3种、至少4种、至少5种、至少6种、至少7种、至少8种、至少9种或至少10种甲型流感靶抗原的核酸。16.如权利要求1-15中任一项所述的组合物，其中所述腺病毒载体包含编码多种甲型流感靶抗原的核酸。17.如权利要求1-16中任一项所述的组合物，其中所述腺病毒载体包含编码至少1种、至少2种、至少3种、至少4种、至少5种、至少6种、至少7种、至少8种、至少9种或至少10种乙型流感靶抗原的核酸。18.如权利要求1-17中任一项所述的组合物，其中所述腺病毒载体包含编码多种乙型流感靶抗原的核酸。19.如权利要求1-18中任一项所述的组合物，其中所述腺病毒载体进一步包含增加所述甲型流感靶抗原、所述乙型流感靶抗原或两者的表达的元件。20.如权利要求19所述的组合物，其中所述元件包括至少1种元件、至少2种元件、至少3种元件、至少4种元件或至少5种元件。21.如权利要求19或20所述的组合物，其中所述元件包括内部核糖体结合位点。22.如权利要求19或20所述的组合物，其中所述元件包括组成型启动子。23.如权利要求19或20所述的组合物，其中所述元件包括诱导型启动子。24.如权利要求19或20所述的组合物，其中所述元件包括转录增强子。25.如权利要求24所述的组合物，其中所述转录增强子是劳斯肉瘤病毒(RSV)增强子。26.如权利要求19-25中任一项所述的组合物，其中所述元件不含回文序列。27.如权利要求1-26中任一项所述的组合物，其中所述腺病毒载体进一步包含编码增加所述甲型流感靶抗原、所述乙型流感靶抗原或两者的免疫原性的蛋白质的核酸序列。28.如权利要求1-27中任一项所述的组合物，其中所述腺病毒载体不是无内容载体。29.如权利要求1-28中任一项所述的组合物，其中所述组合物或所述复制缺陷型腺病毒载体进一步包含编码共刺激分子的核酸序列。30.如权利要求29所述的组合物，其中所述共刺激分子包括B7、ICAM-1、LFA-3或其组合。31.如权利要求30或31所述的组合物，其中所述共刺激分子包括B7、ICAM-1和LFA-3的组合。32.如权利要求1-31中任一项所述的组合物，其中所述腺病毒载体包含所述编码甲型流感靶抗原和乙型流感靶抗原的核酸序列。33.如权利要求1-32中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含至少1x108个病毒颗粒(VP)但不超过5x1011个VP。34.如权利要求1-32中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含至少1x108个病毒颗粒(VP)但不超过1x1012个病毒颗粒VP。35.一种在有需要的个体中产生针对甲型流感靶抗原和乙型流感靶抗原的免疫应答的方法，包括向所述个体施用根据权利要求1-34中任一项所述的组合物。36.一种在个体中产生针对甲型流感靶抗原和乙型流感靶抗原的免疫应答的方法，包括向所述个体施用第一腺病毒载体，所述第一腺病毒载体包含：复制缺陷型腺病毒载体，其中所述腺病毒载体在E2b区中具有缺失，和编码甲型流感靶抗原和乙型流感靶抗原的核酸；向所述个体施用第二腺病毒载体，所述第二腺病毒载体包含：(a)复制缺陷型腺病毒载体，其中所述腺病毒载体在E2b区中具有缺失，和(b)编码甲型流感靶抗原和乙型流感靶抗原的核酸；从而产生针对一种或多种甲型和乙型流感靶抗原的免疫应答。37.一种在个体中产生针对甲型流感靶抗原和乙型流感靶抗原的免疫应答的方法，其包括：(a)向所述个体施用第一载体，所述第一载体包含：(i)复制缺陷型腺病毒载体，其中所述腺病毒载体在E2b区中具有缺失，和(ii)编码第一甲型流感靶抗原和第一乙型流感靶抗原的核酸；以及(b)随后向所述个体施用第二载体，所述第二载体包含：(i)步骤(a)的所述复制缺陷型腺病毒载体，和(ii)编码第二甲型流感靶抗原和第二乙型流感靶抗原的核酸，其中所述第二载体的所述第二甲型流感靶抗原与所述第一载体的所述第一甲型流感靶抗原相同或不同，并且其中所述第二载体的所述第二乙型流感靶抗原与所述第一载体的所述第一乙型流感靶抗原相同或不同；从而产生针对所述第一靶抗原和所述第二靶抗原的免疫应答。38.一种在个体中产生针对甲型流感靶抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：弗兰克·R·琼斯，约瑟夫·巴林特，伊丽莎白·加比茨施，伊薇特·拉驰曼，阿德里安·赖斯，
申请(专利权)人：埃图比克斯公司，
类型：发明
国别省市：美国,US