新型十六元大环内酯的制备方法及用途技术

本发明专利技术涉及新型大环内酯类化合物5

【技术实现步骤摘要】
ivermectins，得到新的、结构新颖的4个十六元大环内酯类活性化合物，其活性与前体化合物25
‑
methyl/25
‑
ethyl ivermectins相当，但是其结晶性要好于前体化合物，有利于后续产品的质量控制和降低生产成本。此外，化合物1
‑
4的结构与母体化合物相比，多了一个羟基，表明水溶性会增加，有利于开发为水基化杀虫剂。

技术实现思路

[0007]1、一种具有如下结构式的化合物：
[0008][0009]其中，R1＝CH3或CH2CH3；R2＝OCH3或OH；R3＝CH2OH或CH3。
[0010]其中，R1＝CH3,R2＝OCH3,R3＝CH2OH，其为如下结构式的化合物1：
[0011][0012]或者
[0013]R1＝CH3,R2＝OH,R3＝CH3，其为如下结构式的化合物2：
[0014][0015]或者
[0016]R1＝CH2CH3,R2＝OCH3,R3＝CH2OH，其为如下结构式的化合物3：
[0017][0018]或者
[0019]R1＝CH2CH3,R2＝OH,R3＝CH3，其为如下结构式的化合物4：
[0020][0021]本专利技术提供化合物1
‑
4的制备方法，包括如下步骤：
[0022]1)制备灰黄青霉种子液：取保藏号为CICC 40293的灰黄青霉菌株Penicilium griseofulvum，划线接种于PDA固体培养基上，在20
‑/>28℃的恒温培养箱中培养5
‑
7天，将活化后的菌种转接于豆粕液体培养基中，置于20
‑
28℃，250rpm的水平摇床中培养40小时，得到种子液；
[0023]2)制备化合物1
‑
4：将种子液以每瓶1ml转接于新鲜豆粕液体培养基中，在180rpm/min，28℃条件下培养24h后，分别向每瓶中加入1mL有机溶剂溶解的25
‑
methyl/25
‑
ethyl ivermectins(浓度10mg/mL)，在相同的条件下转化培养96小时后，得到发酵液；采用萃取剂
萃取发酵液并回收萃取剂后经过色谱分离得到化合物1
‑
4的纯品。
[0024]作为优选的技术方案，所述步骤1)的液体培养基的制备方法为：取葡萄糖30g、酵母抽提物5g、NaCl 5g和K2HPO
4 5g，蒸馏水定容至1000ml后，用1mol/l的NaOH调节pH至7.0
‑
7.2，采用250ml三角瓶每瓶分装50ml，并称量0.25
‑
0.30g豆粕放入三角瓶中，包扎，在121℃、0.15MPa条件下灭菌20min。
[0025]作为优选的技术方案，所述步骤2)的有机溶剂包括甲醇、乙醇、DMSO中的一种或几种。
[0026]作为优选的技术方案，所述步骤2)的萃取剂包括乙酸乙酯、正丁醇、醋酸异丁酯、乙醚、石油醚、二氯甲烷或三氯甲烷中的一种或几种。
[0027]作为优选的技术方案，所述步骤2)的纯化包括反相高效液相色谱层析。
[0028]作为优选的技术方案，所述步骤2)的纯化还包括硅胶柱层析。
[0029]本专利技术进一步提供了含有如前所述化合物1和/或化合物2和/或化合物3和/或化合物4的农药组合物，所述组合物还含有一种或者多种常规载体和/或稀释剂。所述农药组合物的剂型可以为水分散粒剂、乳油、水悬浮剂、油悬浮剂、微乳剂或片剂。
[0030]本专利技术进一步提供了如前所述的化合物1
‑
4在制备用于防治农作物病虫害药物中的用途。所述农作物病虫害包括线虫和红蜘蛛。
附图说明
[0031]图1实施例1所得化合物1的高分辨质谱；
[0032]图2实施例1所得化合物1的氢谱；
[0033]图3实施例1所得化合物1的碳谱；
[0034]图4实施例1所得化合物2的高分辨质谱；
[0035]图5实施例1所得化合物2的氢谱；
[0036]图6实施例1所得化合物2的碳谱；
[0037]图7实施例2所得化合物3的高分辨质谱；
[0038]图8实施例2所得化合物3的氢谱；
[0039]图9实施例2所得化合物3的碳谱；
[0040]图10实施例2所得化合物4的高分辨质谱；
[0041]图11实施例2所得化合物4的氢谱；
[0042]图12实施例2所得化合物4的碳谱。
具体实施方式
[0043]下面用具体实施例予以说明本专利技术，应该理解的是，实施例是用于说明本专利技术而不是对本专利技术的限制，本专利技术的范围与核心内容依据权利要求书加以确定。
[0044]实施例1
[0045]1)取保藏号为CICC 40293的灰黄青霉菌株Penicilium griseofulvum，划线接种于PDA固体培养基上，在20
‑
28℃的恒温培养箱中培养5
‑
7天，将活化后的菌种转接于豆粕液体培养基中，置于20
‑
28℃，250rpm的水平摇床中培养40小时，得到种子液，将种子液以每瓶1ml转接于新鲜豆粕液体培养基中100mL中，在180rpm/min，28℃条件下培养24h后，分别向
每瓶中加入1mL有机溶剂溶解的25
‑
methyl ivermectin(浓度10mg/mL)，在相同的条件下转化培养96小时后，得到发酵液。
[0046]2)按上述方法发酵培养得到2L发酵液，将发酵液用等体积乙酸乙酯分别萃取三次得乙酸乙酯萃取液，萃取液在50℃减压条件下浓缩至干，得到4.5g油状物质。
[0047]将所得的油状物质上硅胶柱(粒径100
‑
200目)进行柱层析，用氯仿：甲醇＝100:0
‑
60:40(V/V)进行梯度洗脱，通过薄层鉴定(TLC)检测，得到3个组分。将组分2经凝胶(Sephadex LH
‑
20)柱层析得到组分2
‑
1，然后使用半制备柱色谱进行进一步纯化得到纯的5
”‑
hydroxymethyl
‑
25
‑
methyl ivermectin(1)、3
”‑
hydroxy
‑
25
‑
methyl ivermectin(2)。
[0048]其中薄层鉴定方法：转化后的样品和空白对照点于硅胶G薄层板上，在氯仿:甲醇(9:1)的展开剂条件展开，跑完后取出晾干，先紫外灯254nm下观察，再用浓硫酸显色，检视转化结果。
[0049]半制备柱色谱条件：流动相：甲醇
‑
水(92:8)；色谱柱C18，9.4*250mm；检测波长：244nm；流速：1.5mL/min；柱温：30℃；进样量本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.本发明涉及如下通式大环内酯化合物及其在制备用于防治农林害虫或害螨的农药组合物中的用途：其中，R1＝CH3或CH2CH3；R2＝OCH3或OH；R3＝CH2OH或CH3。2.根据权利要求1所述通式化合物包括5
”‑
hydroxymethyl
‑
25
‑
methyl ivermectin，其结构如下：3.根据权利要求1所述通式化合物包括3
”‑
hydroxy
‑
25
‑
methyl ivermectin，其结构如下：4.根据权利要求1所述通式化合物包括5
”‑
hydroxymethyl
‑
25
‑
ethyl ivermectin，其结构如下：
5.根据权利要求1所述通式化合物包括3
”‑
hydroxy
‑
25
‑
ethyl ivermectin，其结构如下：6.一种制备如权利要求1
‑
5所述化合物的方法，其特征在于，所述方法包括下列步骤：1)制备灰黄青霉种子液：取保藏号为CICC 40293的灰黄青霉菌株Penicilium griseofulvum，划线接种于PDA固体培养基上，在20
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28℃的恒温培养箱中培养5
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7天，将活化后的菌种转接于豆粕液体培养基中，置于20
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28℃，250rpm的水平摇床中培养40小时，得到种子液；2)制备化合物：将种子液以每瓶1ml转接于新鲜豆粕液体培养基中，在180rpm...

【专利技术属性】
技术研发人员：王继栋，葛海霞，张绍勇，齐欢，张立钦，
申请(专利权)人：湖州师范学院，
类型：发明
国别省市：