一种荷叶生物碱及其提取纯化方法技术

本发明专利技术属于医药领域，具体提供一种荷叶生物碱及其提取纯化方法和用途。本发明专利技术的荷叶生物碱中包括荷叶碱、O-去甲基荷叶碱、N-去甲基荷叶碱、莲碱；其中荷叶碱含量为20.0～40.0％，O-去甲基荷叶碱含量为5.0～15.0％，N-去甲基荷叶碱含量为0.5～5.0％，莲碱含量为0.5～5.0％。本发明专利技术制备的荷叶生物碱中各生物碱含量高，本发明专利技术制备的荷叶生物碱可以用于制备减肥降脂的药物，对促进荷叶资源的合理利用，加强荷叶减肥降脂其相关产品的深度开发具有重要的意义，临床及市场前景优良。临床及市场前景优良。临床及市场前景优良。

【技术实现步骤摘要】
一种荷叶生物碱及其提取纯化方法


[0001]本专利技术属于医药领域，具体涉及一种荷叶生物碱及其提取纯化方法。

技术介绍

[0002]荷叶是睡莲科莲属植物莲Nelumbo nucifera Gaertn.的干燥叶。传统医学认为,荷叶性辛凉,味苦涩、微咸,具有清暑利湿、升发清阳、清心去热、止血利水的作用。荷叶已广泛应用于各种中成药制剂中,目前,荷叶入药的制剂主要有5类:(1)化湿降脂药:如血脂宁、脂脉康胶囊、通脉降脂片、荷丹片等；(2)健胃消食药:如醒脾开胃颗粒等；(3)止血药:如荷叶丸等；(4)清热消痤药:如通便消痤胶囊等；(5)祛暑清热药:如暑热感冒颗粒等。
[0003]现代科学研究显示,荷叶中具有生理活性的物质主要为生物碱和黄酮类物质。荷叶生物碱具有抑制高胆固醇血症和动脉粥样硬化、抗有丝分裂、抑菌和止痉挛等作用。
[0004]至今已从荷叶中分离出10余种生物碱类化合物。根据荷叶生物碱的结构特征大致可分为以下4类:(1)单苄基异喹啉类:亚美(杏黄)罂粟碱、衡州乌药碱、N-甲基异衡州乌药碱、N-甲基衡州乌药碱、O-去甲基衡州乌药碱等；(2)阿朴啡类:荷叶碱、N-去甲基荷叶碱、O-去甲基荷叶碱、莲碱、番荔枝碱、N-去甲基亚美罂粟碱、2-羧基-1-甲氧基阿朴啡等；(3)去氢阿朴啡类:去氢荷叶碱、去氢莲碱等；(4)氧化阿朴啡类:鹅掌楸碱等。
[0005]文献报道的荷叶生物碱一般采用乙醇提取，大孔树脂纯化。如文献(赵骏，等.利用大孔吸附树脂纯化荷叶生物碱，中药材，26(9)，669)荷叶采用95％乙醇回流提取，D101型树脂纯化，荷叶碱最易被40％左右乙醇洗脱，梯度洗脱可使荷叶碱收率达0.8％。文献(王玉霞等，荷叶生物碱提取纯化工艺研究，北京中医药大学学报，36(9),622)中报道，荷叶药材用90％乙醇提取，D001-CC型离子交换树脂纯化，得荷叶碱占生物碱部位的8.98-9.66％。CN 105726640 A公开了一种荷叶生物碱的提取纯化方法，稀盐酸溶液浸提3次。浸出液合并、过滤，过强酸型阳离子交换树脂。收集树脂，进行阴干处理，再用氨水润湿，以乙醇溶剂回流提取至生物碱提取完毕，提取液减压浓缩、干燥得总生物碱提取物，其中荷叶碱占该提取物重量的30.88～40.12％，N-去甲基荷叶碱占该提取物重量的20.94～28.35％，O-去甲基荷叶碱占该提取物重量的3.67～6.32％，杏黄罂粟碱占该提取物重量的2.81～5.16％，厚壳桂素占该提取物重量的0.81～1.88％，该荷叶提取物可以抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化和减小细胞内脂肪滴。CN102258578A也公开了一种荷叶生物总碱的提取纯化方法，荷叶经盐酸乙醇提取，再索氏提取，盐酸水溶液萃取，有机溶剂萃取，干燥浓缩，荷叶碱占总生物碱14-28％，所制得的荷叶总生物碱可以抑制乙酰胆碱、高钾等诱导的儿茶酚胺分泌。
[0006]综上所述，现有对于荷叶中总生物碱的纯化方法主要是液液萃取法、大孔吸附树脂柱色谱法和离子交换树脂柱色谱法。其中液液萃取法用到大量的盐酸、三氯甲烷等有机溶剂，存在操作不便及对环境污染较大的缺点，且操作较为繁琐，所得荷叶碱在总生物碱中占比并不是很高；而使用大孔吸附树脂等柱色谱法进行一次纯化所得的总生物碱的纯度不高。因此，研究新型环保、经济、高效的荷叶生物碱的提取分离方法，具有重要的意义。

技术实现思路

[0007]为了解决上述问题，本专利技术提供一种荷叶生物碱及其提取方法。本专利技术制备的荷叶生物碱中荷叶碱含量高，制备方法环保经济。
[0008]本专利技术提供一种荷叶生物碱，包括荷叶碱、O-去甲基荷叶碱、N-去甲基荷叶碱、莲碱；其中荷叶碱含量为20.0～40.0％，O-去甲基荷叶碱含量为5.0～15.0％，N-去甲基荷叶碱含量为0.5～5.0％，莲碱含量为0.5～5.0％。
[0009]进一步地，其中荷叶碱含量为27.66～30.12％，O-去甲基荷叶碱含量为9.93～11.36％，N-去甲基荷叶碱含量为1.96～2.99％，莲碱含量为2.17～2.67％。
[0010]本专利技术提供一种上述荷叶生物碱的提取纯化方法，包括以下步骤：
[0011]S1:取荷叶，粉碎，乙醇回流提取，浓缩，得荷叶生物碱粗提取物；
[0012]S2:取荷叶生物碱粗提取物，使用大孔吸附树脂纯化，得荷叶生物碱大孔吸附树脂纯化物；
[0013]S3:取荷叶生物碱大孔树脂纯化物，使用PCX分散固相萃取纯化，得所述荷叶生物碱。
[0014]进一步地，步骤S1中乙醇的浓度为50～95％，优选为75～90％，更优选为85％；乙醇与荷叶的液料比为1:10～1:100，优选为1:20～1:60，更优选为1:50；提取时间为1～2.5h，优选为1.5h；提取次数为1～4次，优选为2～3次，更优选为2次。
[0015]进一步地，步骤S2中大孔吸附树脂纯化方法包括以下步骤：A)装柱：取大孔吸附树脂，湿法装柱，用乙醇洗至流出液与水混合液不产生白色浑浊，再用蒸馏水洗至流出液无醇味即可，放置12h；B)上样：荷叶生物碱粗提取物上样，吸附；C)洗脱：先用蒸馏水、乙醇洗脱除杂，再用乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥得荷叶生物碱大孔吸附树脂纯化物。
[0016]进一步地，步骤S2中，A)中流出液与水混合液体积比为1:5；B)中荷叶生物碱粗提取物的上样浓度为相当于原药材0.1～0.3g/ml，优选为0.15g/ml；上样体积为0.5～2BV，优选为1BV；吸附时间为1～3h，优选为2h；C)中蒸馏水用量为2BV～6BV，优选为4BV；洗脱除杂乙醇浓度为30％，用量为4BV；
[0017]或步骤S2中，大孔吸附树脂的型号为AB8、D101、X-5型，优选为D101；C)中梯度洗脱乙醇浓度为50％、60％和70％，每个浓度的洗脱体积为4BV，洗脱液收集60％和70％乙醇的洗脱液；每个浓度的洗脱液收集体积为1～3BV。
[0018]进一步地，步骤S3中，PCX分散固相萃取的方法包括以下步骤：D)配制荷叶生物碱大孔吸附树脂纯化物甲醇溶液，加入PCX，搅拌，抽滤，收集滤饼1；E)滤饼1中加入甲醇，搅拌，抽滤，收集滤饼2；F)滤饼2中加入氨-甲醇溶液，搅拌，抽滤，收集滤液，浓缩，干燥得所述荷叶生物碱。
[0019]进一步地，步骤S3中，D)中荷叶生物碱大孔吸附树脂纯化物甲醇溶液的浓度为1.5～3.0g/L,优选为2.0g/L，PCX的用量为每20mg荷叶生物碱大孔吸附树脂纯化物使用250～500mg，优选为300mg，搅拌时间为2～20min,优选为5min；E)中甲醇体积为每20mg荷叶生物碱大孔吸附树脂纯化物使用20～60ml，优选为40ml，搅拌时间为2～20min，优选为5min；F)中氨-甲醇溶液的使用量为每20mg荷叶生物碱大孔吸附树脂纯化物使用20～50ml,优选为30ml，氨-甲醇溶液中氨浓度为4％～10％，优选为5％。
[0020]本专利技术还提供所述的荷叶生物碱在制备减肥降脂药物中的用途。
[0021]本发本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种荷叶生物碱，其特征在于，包括荷叶碱、O-去甲基荷叶碱、N-去甲基荷叶碱、莲碱；其中荷叶碱含量为20.0～40.0％，O-去甲基荷叶碱含量为5.0～15.0％，N-去甲基荷叶碱含量为0.5～5.0％，莲碱含量为0.5～5.0％。2.根据权利要求1所述的荷叶生物碱，其特征在于，其中荷叶碱含量为27.66～30.12％，O-去甲基荷叶碱含量为9.93～11.36％，N-去甲基荷叶碱含量为1.96～2.99％，莲碱含量为2.17～2.67％。3.一种如权利要求1或2所述的荷叶生物碱的提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：S1:取荷叶，粉碎，乙醇回流提取，浓缩，得荷叶生物碱粗提取物；S2:取荷叶生物碱粗提取物，使用大孔吸附树脂纯化，得荷叶生物碱大孔吸附树脂纯化物；S3:取荷叶生物碱大孔树脂纯化物，使用PCX分散固相萃取纯化，得所述荷叶生物碱。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤S1中乙醇的浓度为50～95％，优选为75～90％，更优选为85％；乙醇与荷叶的液料比为1:10～1:100，优选为1:20～1:60，更优选为1:50；提取时间为1～2.5h，优选为1.5h；提取次数为1～4次，优选为2～3次，更优选为2次。5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤S2中大孔吸附树脂纯化方法包括以下步骤为：A)装柱：取大孔吸附树脂，湿法装柱，用乙醇洗至流出液与水混合液不产生白色浑浊，再用蒸馏水洗至流出液无醇味即可，放置12h；B)上样：荷叶生物碱粗提取物上样，吸附；C)洗脱：先用蒸馏水、乙醇洗脱除杂，再用乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥得荷叶生物碱大孔吸附树脂纯化物。6.根据权利要求3或5所述的方法，其特征在于，步骤S2中，A)中流出液与水混合液体积比为1:5；B)中荷叶生物碱粗提取物的上...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘永静，陈强，
申请(专利权)人：福建中医药大学，
类型：发明
国别省市：