一种封片新方法技术

一种封片新方法。本发明专利技术属于生物技术领域，公开了一种水性UV固化树脂在封片中的应用，本发明专利技术水性UV固化树脂经紫外光照射10秒

【技术实现步骤摘要】
一种封片新方法


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种载玻片表面封固新方法。

技术介绍

[0002]在医学检测领域，将细胞成分或组织切片转移至载玻片上，经染色等处理后，进行显微镜观察，是重要的检测手段之一，应用十分广泛。为防止样本暴露在空气中氧化变色，或防止外来污染，使样本片子能够长久保存，需要将载玻片有样本的区域，用合适的方法封固起来，此过程称为封片。
[0003]目前常用的封片方法，是使用有机溶剂如乙醇、二甲苯等对载玻片的样本区域进行脱水、脱乙醇等步骤，然后滴加中性树胶或封片胶，再贴附盖玻片来进行封片。待胶固化后，即形成了两面为玻璃中间为透明封固层的三明治结构，最终将样本封固在了固化的胶内。上述传统方法虽然应用广泛，但不足之处十分明显。首先，操作步骤繁琐，需消耗大量时间；“脱水”需要至少2次或更多次才能完成，将片子浸泡在二甲苯中进行脱醇，时间很长。其次，在封片过程中需要使用乙醇、二甲苯等有机溶剂进行脱水、脱醇处理，污染环境；最后，固化时间较长，至少几个小时甚至几天。中性树胶自然干透固化，至少36小时，即使用烤箱烘干，也至少2小时。
[0004]而使用乙醇、二甲苯这样的危险品和高度类似试剂，完全是为了迎合中性树胶的使用，而不是为了染色本身。由于细胞内部75％都是水，因此，染色液必然是水溶性的，才能够进入细胞进行染色。这就决定了染色液的基质必然是水或可与水互溶的溶剂，通常使用甲醇或乙醇等。中性树胶是由加拿大树胶用二甲苯稀释而配制成的，与水不互溶。因此，要想使用中性树胶进行最后的封固，必须要将染色后的细胞内部液体，全部置换成二甲苯，或者可与二甲苯互溶的溶剂，否则，会因为不互溶而出现雾状甚至牛奶状的后果，导致无法看清细胞。只要找到合适的中性树胶替代品，即可省略乙醇及二甲苯等有机溶剂的使用。
[0005]因此，如何提供一种绿色环保、高效快捷的封片新方法是研究人员迫切需要解决的问题。

技术实现思路

[0006]有鉴于此，本专利技术提供了一种封片新方法，以解决现有封片方法步骤繁琐、耗时长及污染环境等问题。
[0007]为解决上述技术问题，本专利技术提供了以下技术方案：
[0008]本专利技术提供了一种水性UV固化树脂在封片中的应用。
[0009]其中，本专利技术所述水性UV固化树脂为在UV固化树脂的基础上引入了水性基团或链段，使树脂具有一定的亲水性和吸水性。
[0010]优选的，所述水性UV固化树脂为不饱和聚酯类树脂、聚氨酯丙烯酸酯或环氧丙烯酸酯。
[0011]本专利技术还提供了一种封片方法，样本用水性UV固化树脂封片，紫外光照射固化。
[0012]优选的，所述样本为细胞成分或组织切片。
[0013]优选的，所述样本为染色样本或非染色样本。
[0014]优选的，所述样本染色后用清水冲洗。
[0015]优选的，所述紫外光的波长为315
‑
400nm。
[0016]优选的，所述紫外光照射时间为10秒
‑
1分钟。
[0017]优选的，所述紫外光源与玻片的距离小于10cm。
[0018]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0019]本专利技术利用水性UV固化树脂来替代中性树胶进行封片。水性UV固化树脂是成熟的工业产品，生产企业众多，原料易得，无需使用者自己费时配制，有利于大规模采购和推广。
[0020]本专利技术水性UV固化树脂因为内含紫外线光固化引物，因此，只要使用一定强度的紫外光近距离照射，在10秒
‑
1分钟内，即可固化成坚固的透明树脂层。其折光率和封固强度，与中性树胶固化的效果一致，甚至优于中性树胶。
[0021]经固化后的样本，背景明亮清澈，细胞核结构清晰，细胞膜边界对比度高，色彩无失真现象，染色液无被溶解晕染情况；与中性树胶的封片效果相同，但背景明显更加明亮，透光度方面优于中性树胶。
[0022]本专利技术完全取消了乙醇、二甲苯等危险品及高毒性试剂，操作步骤比传统方法至少省略了50％，固化时间缩短到传统的方法的千分之一。整个流程高效快捷，绿色环保，质量提升。
附图说明具体实施方式
[0023]本专利技术提供了一种水性UV固化树脂在封片中的应用。本专利技术中所述水性UV固化树脂为在UV固化树脂的基础上引入了水性基团或链段，使树脂具有一定的亲水性和吸水性。常见的水性UV固化树脂的合成方法有两种：一种是在传统树脂的分子链上引入亲水性基团，如UP(不饱和聚酯类树脂)；另一种是与丙烯酸酯反应生成水性丙烯酸酯类低聚物，如PUA(聚氨酯丙烯酸酯)、EA(环氧丙烯酸酯)等。水性UV固化树脂作为一种新型、环保和节能型树脂，具有无溶剂臭味、无毒、无污染、操作方便、残胶易清理、固含量高和储运安全方便等优点，是环保节能型UV固化树脂的发展方向，其各项性能均优于传统的UV固化树脂。本专利技术可以采取以上水性UV固化树脂类型的任意一种。
[0024]本专利技术提供了一种封片方法，样本用水性UV固化树脂封片，紫外光照射固化。水性UV固化树脂可以与水互溶，也可以用少量水稀释，流动性与中性树胶一致。本专利技术中，直接在样本区域滴几滴水性UV固化树脂，贴附一张盖玻片，水性UV树脂就会弥散在载玻片和盖玻片之间，完成封片。由于水性UV固化树脂内含紫外线光固化引物，因此，只需一定强度的紫外光近距离照射，即可固化成坚固的透明树脂层。本专利技术中，紫外光的波长优选为315
‑
400nm，更优选为365nm
‑
395nm，可根据生产企业的具体要求灵活选用相应波长；紫外光照射时间为10秒
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1分钟，优选为30秒，固化时间短；紫外光源与玻片的距离小于10cm，优选为8cm，以保证固化效果。
[0025]本专利技术中，样本优选为经过染色后的细胞成分或组织切片。本专利技术对染色方法没
有特殊限定，采用本领域所熟知的染色方法即可。样本染色后用清水冲洗，清洗掉多余的染色液。
[0026]为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例对本专利技术进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。
[0027]实施例1
[0028]将经过染色清洗后的细胞样本上滴加水性UV固化树脂，贴附一张盖玻片，待水性UV固化树脂弥散在载玻片和盖玻片之间后，完成封片。然后，将封好的片子放在距离紫外灯8nm处，于315nm波长下照射10秒，完成固化。
[0029]实施例2
[0030]将经过染色清洗后的组织切片样本上滴加水性UV固化树脂，贴附一张盖玻片，待水性UV固化树脂弥散在载玻片和盖玻片之间后，完成封片。然后，将封好的片子放在距离紫外灯5nm处，于400nm波长下照射30秒，完成固化。
[0031]实施例3
[0032]将经过染色清洗后的组织切片样本上滴加水性UV固化树脂，贴附一张盖玻片，待水性UV固化树脂弥散在载玻片和盖玻片之间后，完成封片。然后，将封好的片子放在距离紫外灯9nm处，于395本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.水性UV固化树脂在封片中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述水性UV固化树脂为在UV固化树脂的基础上引入水性基团或链段，使树脂具有亲水性和吸水性。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述水性UV固化树脂为不饱和聚酯类树脂、聚氨酯丙烯酸酯或环氧丙烯酸酯。4.一种封片方法，其特征在于，样本用水性UV固化树脂封片，紫外光照射固化。5.根据权利要求4所述的封片方法，其特征在于，所述样本为细胞成分或组织切片。6.根据权利要求4或5...

【专利技术属性】
技术研发人员：马雪松，
申请(专利权)人：上海蓝盎医学科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：