地榆药材的UPLC指纹图谱构建方法和检测方法技术

本发明专利技术涉及地榆药材的UPLC指纹图谱构建方法和检测方法，本发明专利技术的通过采用UPLC法对各批次地榆供试品进行检测分析，寻找出各地榆供试品的特征峰，构建指纹图谱，为地榆药材的质量控制奠定了基础。且本发明专利技术简单、可靠、重现性好，能够较为全面地反映地榆药材的整体质量，进而能够有效地提高地榆药材质量检测的准确性和稳定性。

【技术实现步骤摘要】
地榆药材的UPLC指纹图谱构建方法和检测方法
本专利技术涉及中药质量控制
，特别涉及地榆药材的UPLC指纹图谱构建方法和检测方法。
技术介绍
《中国药典》2020年版记载地榆为蔷薇科植物地榆SanguisorbaofficinalisL.或长叶地榆SanguisorbaofficinalisL.var.longifolia(Bert.)YüetLi的干燥根。后者习称“绵地榆”。地榆味苦、酸、涩，微寒；归肝、大肠经；具有凉血止血，解毒敛疮，可用于治疗便血，痔血，血痢，崩漏，水火烫伤，痈肿疮毒等。通常，地榆需要春季将发芽时或秋季植株枯萎后采挖，采挖后需依次经过除去须根，洗净，干燥，或趁鲜切片，干燥等加工工序，地榆不同的生长地、不同的处理工艺等均会导致地榆药材质量的差异，故而很难评价相应的地榆药材是否满足药用标准。因此，亟需构建一个准确且稳定的地榆药材质量评价标准。
技术实现思路
基于此，有必要提供一种地榆药材的UPLC指纹图谱构建方法和检测方法。该方法构建得到的地榆药材指纹图谱可以用于对地榆药材进行质量评价，提高地榆药材检测的准确性和稳定性。一种构建地榆药材指纹图谱的方法，包括以下步骤：配制没食子酸对照品溶液、地榆对照药材溶液和多批地榆供试品溶液；采用超高液相色谱法检测所述没食子酸对照品溶液、所述地榆对照药材溶液和各批地榆供试品溶液，获得对应的色谱图；根据地榆对照药材的色谱图建立地榆药材对照特征图谱；标识各地榆供试品的色谱图中的共有峰，从所述共有峰中选择与所述地榆对照药材保留时间一致的峰，作为特征峰，并使所述特征峰与所述地榆药材对照特征图谱相应的各特征峰对应，构建所述地榆药材指纹图谱。在其中一些实施例中，采用以下方法建立所述地榆药材对照特征图谱：采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统，以没食子酸对应的峰为参照峰，计算地榆对照药材的各特征峰的相对保留时间及相对峰面积，按照平均数法或中位数法生成对照图谱，建立地榆药材对照特征图谱。在其中一些实施例中，所述超高效液相色谱仪的流动相A相为甲醇，B相为0.08％-0.12％的磷酸的水溶液。在其中一些实施例中，所述超高效液相色谱仪的洗脱程序为：0-6min，A相从3％到6％，B相从97％到94％；6-8min，A相从6％到11％，B相从94％到89％；8-20min，A相为11％，B相为89％；20-25min，A相从11％到42％，B相从89％到58％；25-30min，A相为42％，B相为58％；30-35min，A相为42％到55％，B相为58％到45％；35-40min，A相从55％到97％，B相从45％到3％；40-45min，A相为97％，B相为3％；45-46min，A相从97％到3％，B相从3％到97％；46-60min，A相为3％，B相为97％。在其中一些实施例中，流速为0.1mL/min-0.3mL/min，检测波长为270nm。在其中一些实施例中，所述特征峰包含第一峰、第二峰、第三峰和第四峰中至少三个峰；所述第一峰的保留时间为4.49-4.67min，所述第二峰的保留时间为13.28-13.50min，所述第三峰的保留时间为17.53-17.70min，所述第四峰的保留时间为30.37-30.71min。在其中一些实施例中，所述特征峰包含第一峰、第二峰、第三峰和第四峰中至少三个峰；其中，所述第一峰为具有以下质谱信息的峰：正离子模式下的m/z为171.0288±3ppm、或负离子模式的m/z为169.0132±3ppm；所述第二峰为具有以下质谱信息的峰：正离子模式下的m/z为315.0710±3ppm、或负离子模式下的m/z为345.0829±3ppm；所述第三峰为具有以下质谱信息的峰：正离子模式下的m/z为291.0861±3ppm、或负离子模式的m/z为289.0720±3ppm；所述第四峰为具有以下质谱信息的峰：负离子模式的m/z为300.9991±3ppm。在其中一些实施例中，所述第一峰的m/z为171.0288±3ppm的峰的二级质谱图至少在以下m/z存在碎片离子峰：153.0183±3ppm、127.0391±3ppm、125.0235±3ppm、109.0288±3ppm、107.0132±3ppm、81.0341±3ppm；或所述第一峰的m/z为169.0132±3ppm的峰的二级质谱图至少在以下m/z存在碎片离子峰：125.0232±3ppm；或所述第二峰的m/z为315.0710±3ppm的峰的二级质谱图至少在以下m/z存在碎片离子峰：153.0182±3ppm；或所述第二峰的m/z为345.0829±3ppm的峰的二级质谱图至少在以下m/z存在碎片离子峰：239.0594±3ppm、148.0155±3ppm、223.0280±3ppm、87.0438±3ppm；或所述第三峰的m/z为291.0861±3ppm的峰的二级质谱图至少在以下m/z存在碎片离子峰：139.0390±3ppm、123.0442±3ppm、147.0441±3ppm；或所述第三峰的m/z为289.0720±3ppm的峰的二级质谱图至少在以下m/z存在碎片离子峰：109.0282±3ppm、125.0232±3ppm、123.0440±3ppm、151.0390±3ppm；或所述第四峰的m/z为300.9991±3ppm的峰的二级质谱图至少在以下m/z存在碎片离子峰：229.0138±3ppm。在其中一些实施例中，所述第一峰为没食子酸对应的峰，所述第三峰为儿茶素或表儿茶素对应的峰，所述第四峰为鞣花酸对应的峰。在其中一些实施例中，所述没食子酸对照品溶液的浓度为0.8mg/mL-1.2mg/mL。在其中一些实施例中，所述地榆供试品溶液的浓度为3mg/mL-6mg/mL。一种地榆药材的检测方法，包括以下步骤：配制地榆药材的供试品溶液；采用超高效液相色谱-质谱联用技术对所述供试品溶液进行检测，获得相应的谱图；采用上述方法构建而成的地榆药材指纹图谱对所述谱图进行分析。在其中一些实施例中，所述超高效液相色谱仪的色谱条件为：A相为甲醇，B相为0.08％-0.12％的甲酸的水溶液；洗脱程序为：0-6min，A相从3％到6％，B相从97％到94％；6-8min，A相从6％到11％，B相从94％到89％；8-20min，A相为11％，B相为89％；20-25min，A相从11％到42％，B相从89％到58％；25-30min，A相为42％，B相为58％；30-35min，A相为42％到55％，B相为58％到45％；35-40min，A相从55％到97％，B相从45％到3％；40-45min，A相为97％，B相为3％；45-46min，A相从97％到3％，B相从3％到97％；46-60min，A相为3％，B相为97％；质谱条件为：HESI离本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种构建地榆药材指纹图谱的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n配制没食子酸对照品溶液、地榆对照药材溶液和多批地榆供试品溶液；/n采用超高液相色谱法检测所述没食子酸对照品溶液、所述地榆对照药材溶液和各批地榆供试品溶液，获得对应的色谱图；/n根据地榆对照药材的色谱图建立地榆药材对照特征图谱；标识各地榆供试品的色谱图中的共有峰，从所述共有峰中选择与所述地榆对照药材保留时间一致的峰，作为特征峰，并使所述特征峰与所述地榆药材对照特征图谱相应的各特征峰对应，构建所述地榆药材指纹图谱。/n

【技术特征摘要】
1.一种构建地榆药材指纹图谱的方法，其特征在于，包括以下步骤：
配制没食子酸对照品溶液、地榆对照药材溶液和多批地榆供试品溶液；
采用超高液相色谱法检测所述没食子酸对照品溶液、所述地榆对照药材溶液和各批地榆供试品溶液，获得对应的色谱图；
根据地榆对照药材的色谱图建立地榆药材对照特征图谱；标识各地榆供试品的色谱图中的共有峰，从所述共有峰中选择与所述地榆对照药材保留时间一致的峰，作为特征峰，并使所述特征峰与所述地榆药材对照特征图谱相应的各特征峰对应，构建所述地榆药材指纹图谱。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，采用以下方法建立所述地榆药材对照特征图谱：
采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统，以没食子酸对应的峰为参照峰，计算地榆对照药材的各特征峰的相对保留时间及相对峰面积，按照平均数法或中位数法生成对照图谱，建立地榆药材对照特征图谱。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱仪的流动相A相为甲醇，B相为0.08％-0.12％的磷酸的水溶液。


4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱仪的洗脱程序为：0-6min，A相从3％到6％，B相从97％到94％；6-8min，A相从6％到11％，B相从94％到89％；8-20min，A相为11％，B相为89％；20-25min，A相从11％到42％，B相从89％到58％；25-30min，A相为42％，B相为58％；30-35min，A相为42％到55％，B相为58％到45％；35-40min，A相从55％到97％，B相从45％到3％；40-45min，A相为97％，B相为3％；45-46min，A相从97％到3％，B相从3％到97％；46-60min，A相为3％，B相为97％。


5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，流速为0.1mL/min-0.3mL/min，检测波长为270nm。


6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述特征峰包含第一峰、第二峰、第三峰和第四峰中至少三个峰；
所述第一峰的保留时间为4.49-4.67min，所述第二峰的保留时间为13.28-13.50min，所述第三峰的保留时间为17.53-17.70min，所述第四峰的保留时间为30.37-30.71min。


7.根据权利要求1-5所述的方法，其特征在于，所述特征峰包含第一峰、第二峰、第三峰和第四峰中至少三个峰；
其中，所述第一峰为具有以下质谱信息的峰：正离子模式下的m/z为171.0288±3ppm、或负离子模式的m/z为169.0132±3ppm；
所述第二峰为具有以下质谱信息的峰：正离子模式下的m/z为315.0710±3ppm、或负离子模式下的m/z为345.0829±3ppm；
所述第三峰为具有以下质谱信息的峰：正离子模式下的m/z为291.0861±3ppm、或负离子模式的m/z为289.0720±3ppm；
所述第四峰为具有以下质谱信息的峰：负离子模式的m/z为300.9991±3ppm。


8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述第一峰的m/z为171.0288±3ppm的峰的二级质谱图至少在以下m/z存在碎片离子峰：153.01...

【专利技术属性】
技术研发人员：李国卫，贾小舟，何民友，索彩仙，杨小龙，卢晓莹，凌志洲，魏梅，孙冬梅，陈向东，程学仁，
申请(专利权)人：广东一方制药有限公司，山东一方制药有限公司，浙江一方制药有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44