一种瑞加德松注射液有关物质检测方法技术

本发明专利技术属于药物分析技术领域，具体涉及一种瑞加德松注射液有关物质的检测方法，为解决瑞加德松注射液有关物质的检测问题，提供了一种便捷、高效、准确的检测方法，该方法能检测瑞加德松注射液有关物质的含量，从而有效保障用药安全，便于瑞加德松注射液的质量控制，该方法便捷、高效、准确，在系统适用性、重复性、专属性、准确度方面完全符合中国药典方法验证的指导原则，可用于瑞加德松注射液的质量控制。

【技术实现步骤摘要】
一种瑞加德松注射液有关物质检测方法
本专利技术属于药物分析
，具体涉及一种瑞加德松注射液有关物质检测方法。
技术介绍
瑞加德松，也叫瑞加诺生，英文名：Regadenoson，化学名称：(1-｛9-〔〔4S，2R，3R，5R〕-3,4-二羟甲基氧杂环戊-2-基〕-6-氨基嘌呤-2-基｝吡唑-4-基)-N甲基甲酰胺，一水合物，结构式如下所示：，是CVTherapeutics公司开发的一种选择性腺苷受体激动剂，可使冠状动脉产生舒张。这款药物作为药物负荷剂，用于不能接受充分的运动负荷测试的放射性核素心肌灌注成像的患者，辅助诊断冠状动脉疾病。瑞加德松杂质较多，从来源看，瑞加德松的杂质主要来源于合成过程中引入的反应原料、合成中间体、反应副产物及降解杂质，瑞加德松制剂的杂质来源于原料引入杂质、工艺杂质及降解杂质。目前，对于瑞加德松有关物质或质量研究的文献较少。现有专利中公开了检测瑞加德松原料药及其杂质含量的方法，该专利检测的是瑞加德松杂质数量较少。根据瑞加德松注射液工艺杂质的研究，本专利技术人发现了瑞加德松注射液中的有关物质，其杂质及结构式如下：杂质A：1-（6-氨基-9-（（2R,3S,4R,5R）-3，4-二氢-5-（羟甲基）-四氢呋喃-2-基）-9H-嘌呤-2-基）-N,N-二甲基-1H-吡唑-羧酸（分子式：C14H15N7O6；分子量：377.31）杂质B：1-（6-氨基-9-（（2R,3S,4R,5R）-3，4-二氢-5-（羟甲基）-四氢呋喃-2-基）-9H-嘌呤-2-基）-N,N-二甲基-1H-吡唑-羧酸胺（分子式：C16H20N8O5；分子量：404.38）杂质C：（即类伽腺苷中间体2）：2-（3-甲酸甲酯）吡唑基腺苷（分子式：C15H17N7O6；分子量：391.34）杂质D：(同分异构体)(1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-二羟基-5-羟甲基氧杂环戊-2-基]-2-氨基嘌呤-6-基}吡唑-4-基)-N-甲基甲酰胺（分子式：C15H18N8O5；分子量：390.35）杂质E：（工艺杂质）1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-二羟基-5-羟甲基氧杂环戊-2-基]-6-氨基嘌呤-2-基}吡唑（分子式：C13H15N7O4；分子量：333.3）通过重复试验条件后发现，本专利技术所述杂质在已公开的专利条件下无法有效地分离分析，更无法准确定量测定这些潜在的杂质，给瑞加德松注射液的用药安全带来很大风险。
技术实现思路
本专利技术提供一种瑞加德松注射液有关物质检测方法，为解决瑞加德松注射液有关物质的检测问题，提供了一种便捷、高效、准确的检测方法，该方法能检测瑞加德松注射液有关物质的含量，从而有效保障用药安全，便于瑞加德松注射液的质量控制，该方法便捷、高效、准确，在系统适用性、重复性、专属性、准确度方面完全符合中国药典方法验证的指导原则，可用于瑞加德松注射液的质量控制。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种瑞加德松注射液有关物质检测方法，所述检测方法包括以下步骤：（1）配制溶液，分别配制空白溶液、对照溶液和供试品溶液。（2）测定方法：采用液相色谱法测定瑞加德松注射液有关物质的含量，待系统稳定后，分别进空白溶液，对照溶液和供试品溶液，记录色谱图；色谱条件如下:色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，检测波长：260nm；流速：1.5ml/min；柱温：45℃；进样量：50μl，流动相以缓冲液：乙腈体系为流动相。进一步的，所述空白溶液包括空白溶液A和空白溶液B；所述空白溶液A为流动相A，所述空白溶液B为空白辅料溶液；所述空白辅料溶液：分别取丙二醇，依地酸二钠，二水磷酸氢二钠，一水磷酸二氢钠适量，置于容量量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀；所述流动相为：流动相A：缓冲液（水-冰醋酸-三乙胺（1000:1:1））-乙腈=（96:4）；流动相B：缓冲液（水-冰醋酸-三乙胺（1000:1:1））-乙腈=（80:20）；所述对照溶液：取瑞加德松对照品适量，置于容量瓶瓶中，加流动相A稀释至刻度，摇匀；所述供试品溶液：取瑞加德松注射液直接进样；所述色谱柱为：WatersXterraRP184.6×150mm，3.5μm，或相当的色谱柱。进一步的，所述流动相梯度过程如下：所述的瑞加德松注射液有关物质的检测方法还包括在检测之前的方法验证，该方法验证为按照正式检测的色谱条件，测定结果为：本专利技术公开了一种瑞加德松注射液有关物质的检测方法，为解决瑞加德松注射液有关物质的检测问题，提供了一种便捷、高效、准确的检测方法，该方法能检测瑞加德松有关物质的含量，从而有效保障用药安全。附图说明图1为使用公开方法检测瑞加德松注射液有关物质对照品溶液图谱图2为本专利技术系统适用性溶液图谱图3为本专利技术瑞加德松线性图谱具体实施方式以下通过实施例进一步说明本专利技术，但不作为对本专利技术的限制。实施例1：（1）配制溶液：空白溶液：流动相A；空白辅料溶液：分别取丙二醇15g，依地酸二钠100mg，二水磷酸氢二钠1090mg，一水磷酸二氢钠540mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。对照品溶液：称取瑞加德松对照品约20mg，精密称定，置250ml量瓶中，加流动相A稀释至刻度，摇匀，再精密量取2ml，置100ml量瓶中，用流动相A稀释至刻度，摇匀，再精密量取5ml，置50ml量瓶中，用流动相A稀释至刻度，摇匀，即得（浓度：0.16μg/ml）。供试品溶液：取瑞加德松注射液直接进样。（2）色谱条件：照高效液相色谱法（ChP2020通则0512）测定。仪器：高效液相色谱仪、电子分析天平试剂：水、冰醋酸、三乙胺、乙腈。色谱柱：WatersXterraRP184.6×150mm，3.5μm，或相当的色谱柱；流动相：流动相A：缓冲液（水-冰醋酸-三乙胺（1000:1:1））-乙腈=（96:4）；流动相B：缓冲液（水-冰醋酸-三乙胺（1000:1:1））-乙腈=（80:20）；检测波长：260nm；流速：1.5ml/min；柱温：45℃；进样量：50μl。按下表进行梯度洗脱：(3)测定方法：进样序列与要求名称针数要求空白溶液≥1应无明显干扰峰辅料空白溶液1应无明显干扰峰对照品溶液55针对照品溶液中瑞加德松峰面积的RSD≤5.0％供试品溶液1NA回校对照品溶液1与前5针对照品溶液峰面积的RSD≤5.0％计算公式：式中：AS：供试品溶液中杂质的峰面积；NR：对照品称样量；(单位：mg)；PR：对照品的纯度；AR：对照品溶液中主峰的平均峰面积；NS：供试品的稀释倍数；NR：对本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种瑞加德松注射液有关物质检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：/n（1）配制溶液，分别配制空白溶液、对照溶液和供试品溶液；/n（2）测定方法：采用液相色谱法测定瑞加德松注射液有关物质的含量，待系统稳定后，分别进空白溶液，对照溶液和供试品溶液，记录色谱图；/n色谱条件如下:色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，检测波长：260nm；流速：1.5ml/min；柱温：45℃；进样量：50μl，流动相以缓冲液：乙腈体系为流动相。/n

【技术特征摘要】
1.一种瑞加德松注射液有关物质检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：
（1）配制溶液，分别配制空白溶液、对照溶液和供试品溶液；
（2）测定方法：采用液相色谱法测定瑞加德松注射液有关物质的含量，待系统稳定后，分别进空白溶液，对照溶液和供试品溶液，记录色谱图；
色谱条件如下:色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，检测波长：260nm；流速：1.5ml/min；柱温：45℃；进样量：50μl，流动相以缓冲液：乙腈体系为流动相。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
所述空白溶液包括空白溶液A和空白溶液B；所述空白溶液A为流动相A，所述空白溶液B为空白辅料溶液；
所述空白辅料溶液：分...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡强，祁雯雯，金林波，雷正发，兰柳琴，
申请(专利权)人：珠海润都制药股份有限公司，润都制药武汉研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44