制备(2R,3S)-2-氨基-3-羟基-3-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酸的方法技术

本发明专利技术公开一种来源于Burkholderia diffusa的MSPS合成酶，及其制备(2R,3S)‑2‑氨基‑3‑羟基‑3‑(4‑(甲基磺酰基)苯基)丙酸的方法。由于该酶本发明专利技术使得合成(2R,3S)‑2‑氨基‑3‑羟基‑3‑(4‑(甲基磺酰基)苯基)丙酸的方法，具有操作简单，条件温和，且使用较为廉价的对甲砜基苯甲醛和苏氨酸作为底物，可大幅度降低生产成本的优点。

【技术实现步骤摘要】
制备(2R,3S)-2-氨基-3-羟基-3-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酸的方法
本专利技术涉及生物
，具体涉及来源于Burkholderiadiffusa的MSPS合成酶，及其制备(2R,3S)-2-氨基-3-羟基-3-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酸的方法。
技术介绍
(2R,3S)-2-氨基-3-羟基-3-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酸是一种重要的化工原料，主要用于合成广谱抗菌药物氟苯尼考等化学品，其结构式如下所示：现行的手性(2R,3S)-2-氨基-3-羟基-3-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酸合成主要是通过化学法来实现，通过缩合、拆分多步工艺进行制备，在工业生产上，化学法步骤繁琐，污染环境。因此，开发更为环保的(2R,3S)-2-氨基-3-羟基-3-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酸不对称合成方法具有重要的应用价值。生物工作者对手性(2R,3S)-2-氨基-3-羟基-3-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酸的不对称合成也做了一些尝试。以对甲砜基苯甲醛和甘氨酸作为底物，使用具有手性选择性的缩醛酶可以将其缩合为(2R,3S)-2-氨基-3-羟基-3-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酸。如下反应式所示。在CN109836362A中公开一种(2S,3R)-对甲砜基苯丝氨酸乙酯的制备方法，其中采用对甲砜基苯甲醛和L-苏氨酸在转醛酶的作用下得到氨基酸中间体(2R,3S)-2-氨基-3-羟基-3-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酸。CN111377839A公开了一种(2S,3R)-对甲砜基苯丝氨酸乙酯的制备方法，包括对甲砜基苯甲醛和L-苏氨酸在转醛酶的作用下得到氨基酸中间体(2R,3S)-2-氨基-3-羟基-3-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酸，其中在酶反应过程中添加乙醛还原酶使乙醛还原为乙醇，将(2R,3S)-2-氨基-3-羟基-3-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酸再进行乙酯化反应得到(2S,3R)-对甲砜基苯丝氨酸乙酯。在上述合成过程中，最重要的酶，其性能好坏直接决定，反应过程是否简单易行，具有实际价值，有必要开发性能更好的酶作为催化剂。
技术实现思路
本专利技术是提供了一种采用新型生物酶作为催化剂，简单易行的合成(2R,3S)-2-氨基-3-羟基-3-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酸的方法。本专利技术研究过程中发现，来源于Burkholderiadiffusa的一种酶能够使用较为廉价的对甲砜基苯甲醛和苏氨酸作为底物，能有效合成(2R,3S)-2-氨基-3-羟基-3-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酸。因此，本专利技术一种MSPS合成酶，来源于Burkholderiadiffusa，其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示：1mkqeptgafevatvlndifsadhryreatlsltanenypselvrvtsgstagafyhvsfp61fdvpdgewhfpepghmhavadkvrslgksllhaqtfdwrpnggsaaeqalmlaacqpgdg121fvhfahgdgghfalealaskagieifhlpvdpdtllidvdrlaalvdahpririvildqs181fklrwqplrairdalpahctltydashdgglvmggwfdsplrcgadvvhgnthktiagpq241kayvafgsaehplltdtsiwvcpniqsnchaeqlpsmwvalkeieaygpayasqvvhnaa301afaralhargldvsgesfgftethqvhfsvgtpedalltcrdvlhrggirttnielpgkp361gvhgirlgvqamtrrgmverdfetvadfiaalctrkrtpeevapdvatflgdfplsplaf421sfdggmtdelrtalrqgvmr。相应地，本专利技术提供一种编码上述MSPS合成酶的基因，且在一个具体的实例中，其核苷酸序列如下（SEQIDNo.2）：1ATGAAACAGGAACCGACGGGCGCATTCGAAGTTGCAACTGTTCTGAACGACATTTTCAGCGCCGACCACC71GCTACCGTGAAGCTACCCTGAGCCTGACGGCAAATGAAAACTATCCGTCTGAACTGGTTCGTGTGACCTC141TGGTTCTACTGCTGGCGCCTTCTATCATGTTTCCTTCCCGTTCGATGTGCCGGACGGTGAGTGGCATTTC211CCGGAGCCTGGTCATATGCATGCTGTTGCTGACAAAGTACGCTCTCTGGGTAAGTCCCTGCTGCATGCGC281AAACCTTTGACTGGCGTCCGAACGGTGGTAGCGCAGCTGAACAGGCACTGATGCTGGCAGCATGTCAGCC351GGGCGATGGTTTCGTCCATTTCGCTCACGGTGATGGTGGTCACTTCGCACTGGAAGCGCTGGCAAGCAAA421GCAGGCATTGAAATCTTCCACCTGCCGGTGGACCCTGATACCCTGCTGATCGATGTTGACCGTCTGGCTG491CACTGGTTGATGCTCACCCACGTATCCGCATTGTTATCCTGGACCAGAGCTTTAAACTGCGTTGGCAGCC561GCTGCGTGCAATTCGTGACGCACTGCCTGCGCACTGCACTCTGACTTACGACGCGAGCCACGATGGCGGT631CTGGTTATGGGTGGCTGGTTCGATAGCCCTCTGCGCTGTGGTGCGGACGTTGTTCATGGTAACACTCACA701AAACCATTGCTGGCCCGCAGAAAGCATATGTTGCGTTCGGCAGCGCAGAACATCCACTGCTGACTGACAC771CAGCATCTGGGTGTGTCCGAACATTCAATCCAACTGTCATGCAGAGCAGCTGCCGTCCATGTGGGTAGCT841CTGAAAGAAATTGAAGCCTACGGTCCGGCGTATGCATCCCAGGTTGTTCACAACGCAGCCGCATTCGCAC911GTGCTCTGCATGCACGTGGTCTGGATGTTAGCGGTGAAAGCTTCGGTTTCACCGAGACCCACCAGGTGCA981CTTCAGCGTGGGTACTCCGGAAGACGCACTGCTGACCTGCCGTGACGTTCTGCATCGTGGTGGTATTCGT1051ACTACCAACATCGAGCTGCCAGGTAAACCGGGTGTTCACGGTATCCGTCTGGGCGTTCAGGCAATGACTC1121GTCGCGGTATGGTAGAACGCGACTTTGAAACTGTTG本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种MSPS合成酶在制备(2R,3S)-2-氨基-3-羟基-3-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酸中的应用，其特征在于，所述MSPS合成酶的氨基酸序列如SEQ ID NO. 1所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种MSPS合成酶在制备(2R,3S)-2-氨基-3-羟基-3-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酸中的应用，其特征在于，所述MSPS合成酶的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。


2.一种合成(2R,3S)-2-氨基-3-羟基-3-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酸的方法，其特征在于，以对甲砜基苯甲醛和苏氨酸作为底物，使用MSPS合成酶驱动反应，其中所述MSPS合成酶的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。


3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述反应按100ml体系计，由反应液、对甲砜基苯甲醛、苏氨酸、所述的MSPS合成酶的蛋白溶液或表达催化酶的全细胞组成。


4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述反应液为pH7.5的20mM磷酸缓冲液；对甲砜基苯甲醛在反应体系中的浓度为50-150mM；所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：不公告发明人，
申请(专利权)人：天津工微生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12