酿酒酵母工程菌及其在制备原儿茶酸中的应用制造技术

本发明专利技术涉及基因工程技术领域，尤其涉及酿酒酵母工程菌及其在制备原儿茶酸中的应用。本发明专利技术在酿酒酵母菌株的基础上，转入外源基因4CL、Ech、Fcs、vdh、PobA中的至少一种。本发明专利技术通过精准控制以上关键基因的转入，在酵母体内构建了一种全新的利用木质素或对香豆酸转化合成原儿茶酸的路径，实现了利用木质素单体及木质素合成原儿茶酸。实验表明，本发明专利技术基因工程菌可以充分利用木质素及其衍生的芳香族化合物制备原儿茶酸，不仅可以解决木质素的利用问题，而且可以生成原儿茶酸这种重要的化工原料，实现木质素的高值化利用。

【技术实现步骤摘要】
酿酒酵母工程菌及其在制备原儿茶酸中的应用
本专利技术涉及基因工程
，尤其涉及酿酒酵母工程菌及其在制备原儿茶酸中的应用。
技术介绍
原儿茶酸作为药物，在临床上可用于治疗慢性气管炎、烧伤、小儿肺炎、菌痢、急性盂肾炎、急性胰腺炎及某种溃疡病的治疗。另外，其具有一定的抗氧化抗菌作用，对金黄葡萄球菌，沙门氏菌，大肠杆菌等有抑制作用。原儿茶酸是一种关键的代谢中间体，可以进一步转化为许多化学物质，如己二酸，吡啶2,4-二羧酸等。此外，在最近的研究中，原儿茶酸可以用做合成聚合物的单体。因此原儿茶酸具有广阔的应用前景，化学合成主要以香兰素为原料，经碱熔溶氧化脱甲基，再经酸化制备，该工艺需要240℃以上高温，反应大部分时间为固相反应，难于控制，必须使用特殊的反应设备，投资大、设备利用率低。微生物转化合成原儿茶酸技术，已经进行了开发研究。原儿茶酸主要通过3-脱氢莽草酸脱水酶(3-dehydroshikimatedehydratase，aroZ)作用于3-脱氢莽草酸(DHS)一步催化形成。利用该基因在大肠杆菌，芽孢杆菌，谷氨酸棒杆菌及酿酒酵母中实现了从葡萄糖合成本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.酿酒酵母工程菌，其特征在于，所述酿酒酵母工程菌以敲除ADH6、ADH7和BDH2基因的酿酒酵母菌株为底盘菌株，转入外源基因4CL、Ech、Fcs、vdh、PobA中的至少一种。/n

【技术特征摘要】
1.酿酒酵母工程菌，其特征在于，所述酿酒酵母工程菌以敲除ADH6、ADH7和BDH2基因的酿酒酵母菌株为底盘菌株，转入外源基因4CL、Ech、Fcs、vdh、PobA中的至少一种。


2.根据权利要求2所述的酿酒酵母工程菌，其特征在于，所述底盘菌株的出发菌为酿酒酵母菌株BY4742。


3.根据权利要求1所述的酿酒酵母工程菌，其特征在于，转入外源基因1)～5)中的任意一种：
1)Ech和Fcs；
2)4CL和Ech；
3)4CL、Ech和vdh；
4)4CL、Ech、vdh和PobA；
5)vdh或PobA。


4.根据权利要求1所述的酿酒酵母工程菌，其特征在于，所述外源基因中，4CL基因来源于欧芹；Ech基因来源于恶臭假单胞菌或链霉菌；Fcs基因来源于恶臭假单胞菌或链霉菌；vdh基因来源于恶臭假单胞菌。


5.根据权利要求1～4任一项所述的酿...

【专利技术属性】
技术研发人员：元英进，李炳志，张仁宽，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：天津;12