CIML NK细胞及其方法技术

提出了具有增强的细胞毒性的细胞因子诱导的记忆样(CIML)NK细胞。最通常地，这些CIML NK细胞源自外周血或脐带血的单核细胞级分。在进一步考虑的方面，这些CIML NK细胞在大大降低操作复杂性和生产成本的封闭和自动化生产环境中扩增和诱导。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】CIMLNK细胞及其方法
本披露涉及生成和/或培育活化的免疫感受态细胞的组合物、方法和装置，特别是当它涉及由脐带血(CB)或外周血(PB)产生的记忆样NK细胞时。
技术介绍

技术介绍
描述包括在理解本披露中可能有用的信息。这不是承认本文提供的任何信息为现有技术或与当前要求保护的专利技术有关，也不是承认明确或隐含引用的任何出版物为现有技术。本文中所有出版物和专利申请都通过引用并入，其程度如同每个单独的出版物或专利申请均被明确地和单独地指出通过引用并入一样。在并入的参考文件中术语的定义或用法与本文提供的术语的定义不一致或相反时，本文提供的该术语的定义适用而在该参考文件中该术语的定义不适用。自然杀伤(NK)细胞构成一组先天免疫细胞，常常将先天免疫细胞表征为经由颗粒溶素和穿孔素的靶标定向释放而表现出抗体依赖性细胞毒性的细胞毒性淋巴细胞。大多数NK细胞除了具有各种活化性和抑制性受体的集合外还具有特异性的细胞表面标志物谱(例如，CD3-、CD56+、CD16+、CD57+、CD8+)。尽管最近NK细胞已经成为某些癌症治疗的重要组成部分，但是由本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种产生具有增强的细胞毒性的细胞因子诱导的记忆样(CIML)NK细胞的方法，该方法包括：/n从生物流体中分离单核细胞的混合物，并且使该单核细胞的混合物与抗CD16抗体和N-803接触以扩增NK细胞；以及/n使经扩增的NK细胞与刺激细胞因子组合物接触，该刺激细胞因子组合物包含IL-18/IL-12-TxM融合蛋白复合物，IL-12、N-803和IL-18的混合物，或IL-12、IL-15和IL-18的混合物，从而生成这些具有增强的细胞毒性的CIML NK细胞。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种产生具有增强的细胞毒性的细胞因子诱导的记忆样(CIML)NK细胞的方法，该方法包括：
从生物流体中分离单核细胞的混合物，并且使该单核细胞的混合物与抗CD16抗体和N-803接触以扩增NK细胞；以及
使经扩增的NK细胞与刺激细胞因子组合物接触，该刺激细胞因子组合物包含IL-18/IL-12-TxM融合蛋白复合物，IL-12、N-803和IL-18的混合物，或IL-12、IL-15和IL-18的混合物，从而生成这些具有增强的细胞毒性的CIMLNK细胞。


2.如权利要求1所述的方法，该方法进一步包括：再刺激这些CIMLNK细胞后，使这些CIMLNK细胞与N-803接触的步骤。


3.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中该生物流体是全血或脐带血。


4.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中未进一步加工该单核细胞的混合物以富集NK细胞。


5.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中该单核细胞的混合物含有约100-500×106个细胞。


6.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中接触该混合物的步骤在约100-300ml的体积中或以约1×106个细胞/ml的细胞密度进行。


7.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中在接触该混合物的步骤中该抗CD16抗体以0.05-0.5mcg/ml的浓度存在。


8.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中在接触该混合物的步骤中该N-803以0.1-1.0nM的浓度存在。


9.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中接触该混合物的步骤进一步包括使该单核细胞的混合物与抗CD3抗体接触。


10.如权利要求9所述的方法，其中该抗CD3抗体以0.1-1.0ng/ml的浓度存在。


11.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中该刺激细胞因子组合物包含该IL-18/IL-12-TxM融合蛋白复合物。


12.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中该刺激细胞因子组合物包含该IL-12、N-803和IL-18的混合物。


13.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中该刺激细胞因子组合物包含该IL-12、IL-15和IL-18的混合物。


14.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中这些NK细胞扩增到约0.5-5.0×109个细胞的总细胞数。


15.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中使经扩增的NK细胞与刺激细胞因子组合物接触的步骤在与扩增这些NK细胞的步骤相同的容器中进行。


16.一种活化NK细胞以形成具有增强的细胞毒性的细胞因子诱导的记忆样(CIML)NK细胞的方法，该方法包括：
提供经扩增的NK细胞，其中这些NK细胞由全血或脐带血的单核细胞扩增；以及
使经扩增的NK细胞与刺激细胞因子组合物接触，该刺激细胞因子组合物包含IL-18/IL-12-TxM融合蛋白复合物，IL-12、N-803和IL-18的混合物，或IL-12、IL-15和IL-18的混合物，从而生成这些具有增强的细胞毒性的CIMLNK细胞。


17.如权利要求16所述的方法，其中这些NK细胞由全血扩增。


18.如权利要求16所述的方法，其中这些NK细胞由脐带血扩增。


19.如权利要求16-18中任一项所述的方法，其中相对于接受包含这些CIMLNK细胞的输注的个体，这些NK细胞是自体的。


20.如...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗希特·杜加尔，拉吉特·辛哈，李文钊，詹森·艾萨克森，派翠克·松吉翁，
申请(专利权)人：南克维斯特公司，
类型：发明
国别省市：美国;US