用于增强阳离子大环肽的全身递送能力、耐受性和效力的组合物和方法技术

本文提供了用于θ‑防御素和/或θ‑防御素类似物的制剂的组合物，其非常适合肠胃外施用。该制剂在包括丙二醇的微酸性缓冲液中提供θ‑防御素和/或θ‑防御素类似物。发明专利技术人惊讶地发现该制剂将所提供的θ‑防御素和/或θ‑防御素类似物的生物利用度相对于常规等渗盐溶液而言提高了至少10倍，并且相对于动物模型而言，该制剂显着提高了在人类受试者中的生物利用度。发明专利技术人还发现该制剂在高肽浓度下有利地表现出低粘度，同时减少了注射体积，从而允许通过简单过滤进行灭菌。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于增强阳离子大环肽的全身递送能力、耐受性和效力的组合物和方法本申请要求于2018年10月9日提交的美国临时申请62/743,243的权益，其与所有其他参考的外部材料通过引用整体并入本文。在通过引用并入的参考文献中术语的定义与本文提供的术语的定义不一致或相反，或该参考文献使用的术语的定义与本文提供的术语的定义不一致或相反的情况下，适用本文提供的该术语的定义。
本专利技术的领域是增强阳离子肽药物特别是大环θ-防御素和/或其类似物的全身递送能力或药理作用。
技术介绍
以下描述包括用于帮助理解本专利技术的信息，但并不表示承认本文提供的任何信息是现有技术或与当前要求保护的专利技术有关，或明确或隐含引用的任何出版物是现有技术。炎症是对病原体、组织损伤和暴露于刺激物的复杂的保护性反应，涉及血管的改变、免疫细胞的迁移以及多种化学和肽介质的释放。尽管炎症消除细胞损伤的动因并从受损组织中消除坏死细胞，但炎症反应本身却具有破坏性。例如，由自身免疫性疾病引起的慢性炎症可导致受影响组织的损伤。同样，由急性过程引起的炎症，例如病毒或细菌感染，可能会导致组织损伤和败血性休克，而当炎症延长且无法解决时，慢性炎症会加剧这种炎症。慢性炎症通常会导致组织瘢痕形成、纤维化和功能丧失。另外，伴随炎症的疼痛和肿胀可能使人衰弱，特别是当它由慢性疾病引起时。不幸的是，目前用于治疗炎症的方法具有许多缺点。例如，传统的药物方法(例如用类固醇或非类固醇炎性药物治疗)仅提供短期缓解，并且通常以限制此类药物使用的显着副作用为代价。最近，“生物制剂”(例如，针对促炎性细胞因子的人源化单克隆抗体)已用于治疗某些以炎症为特征的慢性疾病，但是这种方法只能靶向单一的炎症机制，并可能导致免疫抑制甚至使接受治疗的人免疫功能低下。另外，基于抗体的生物制剂可能需要静脉内施用相对大量的液体，这通常需要在受过训练的医护人员的照护下通过输液进行静脉内施用。哺乳动物防御素是含三二硫键的阳离子肽，包含三个结构不同的亚科。α-和β-防御素是线性肽，长度范围为29至约60个氨基酸，具有游离的氨基和羧基末端氨基酸。α-和β-防御素具有相似的三维拓扑结构，但是它们的二硫键不同(SelstedandOuellette，NatImmunol6：551-557(2005))。相反，天然存在的θ-防御素是肽主链环化的18个氨基酸的肽，其在结构和功能上均与α-和β-防御素不同。防御素作为抗微生物剂(Ericksenetal，AntimicrobAgentsChemother49：269-275(2005))并通过调节炎症(Khineetal，Blood107：2936-2942(2006))和适应性免疫应答促进宿主防御(Chertovetal，JBiolChem271：2935-2940(1996))。本文所有出版物的引用均与具体引用每个单独出版物或专利申请相同。当在并入的参考文献中术语的定义与本文提供的术语的定义不一致或相反，或该参考文献使用的术语的定义与本文提供的术语的定义不一致或相反时，适用本文提供的该术语的定义，而参考文献中该术语的定义不适用。θ-防御素在东半球猴(例如，猕猴和狒狒)中表达，并且是动物中唯一已知的环状蛋白(Lehreretal，JBiolChem287：27014-27019(2012))。θ-防御素的基本骨架结构是通过将两个非肽前体从头到尾拼接而成的。在猕猴中，由三个前体基因编码的九肽的交替二元剪接提供了六个θ-防御素同种型，猕猴θ-防御素RTD-1至RTD-6(SEQIDNOs.1-6)(Tangetal，Science286：498-502(1999)；Leonovaetal，JLeukocBiol70：461-464(2001))。在狒狒中，交替的非肽剪接产生十个θ-防御素同种型，狒狒θ-防御素BTD-1至BTD-10(SEQIDNos.7-16)(Garciaetal，InfectImmun76：5883-5891(2001))。θ-防御素在嗜中性粒细胞颗粒和这些物种的单核细胞中高水平表达。这些θ-防御素在猕猴中性粒细胞颗粒提取物的抗菌活性中起主要作用。RTD-1同种型是猕猴中最丰富的θ-防御素，约占猕猴中性粒细胞总θ-防御素含量的55％(Tongaonkaretal，JLeukocBiol89：283-290(2011))。由于在这些物种中的θ-防御素基因的预编码序列中存在终止密码子突变，因此人类和其他人科动物缺乏θ-防御素(Nguyenetal，Peptides24：1647-1654(2003))。据建议，在东半球猴中θ-防御素的表达与这些非人类灵长类动物与人的免疫和炎症反应的差异有关(Lehreretal，JBiolChem287：27014-27019(2012))。虽然最初基于广谱抗微生物特性鉴定了α-，β-和θ-防御素，但随后的研究已经揭示了它们不同而独特的免疫调节作用(Yangetal，AnnuRevImmunol22：181-215(2004))。例如，一些α-和β-防御素对T细胞、嗜中性粒细胞、树突状细胞和单核细胞具有趋化性(Chertovetal，JBiolChem271：2935-2940(1996)；Yangetal，Science286：525-528(1999)；Grigatetal，JImmunol179：3958-3965(2007)；Sorurietal，EurJImmunol37：2474-2486(2007))，并诱导活化的树突状细胞、外周血单核细胞和上皮细胞分泌促炎细胞因子(Khineetal，107：2936-2942(2006)；Boniottoetal，AntimicrobAgentsChemother50：1433-1441(2006)；Itoetal，TohokuJExpMed227：39-48(2012)；Yinetal，Immunol11：37(2010)；Niyonsabaetal，JImmunol175：1776-1784(2005)；Lietal，InvestOphthalmolVisSci50：644-653(2009)；Syedaetal，JCellPhysiol214：820-827(2008))。与这种促炎活性相反，最近报道了θ-防御素在体外和体内均具有抗炎特性。例如，据发现RTD-1是由多种Toll样受体(TLR)激动剂刺激的人外周血白细胞的细胞因子分泌的有效抑制剂(Schaaletal，PLoSOne7，e51337(2012))。天然存在的θ-防御素同种型(RTD1-6)在降低脂多糖或大肠杆菌刺激的白细胞中的TNF方面具有不同的效力(Schaaletal，PLoSOne7，e51337(2012))。据发现，RTD-1还可以减少炎症细胞因子，包括TNF-α，IL-1β，和几种趋化因子，在SARS冠状病毒感染的小鼠模型中(Wohlford-Lenaneetal，JVirol83：11385-11390(2009)，大肠杆菌腹膜炎中，和多发性败血症中(Schaaletal，PLoS本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种治疗患有慢性炎症疾病的个体的方法，包括：/n提供一定量的θ-防御素或θ-防御素类似物作为第一水溶液，所述第一水溶液包含θ-防御素或θ-防御素类似物和0.5％至1.5％v/v的丙二醇，其中所述第一水溶液的pH为5.0至7.0；和/n通过皮下注射向需要治疗的个体施用所述第一水溶液，/n其中所述第一水溶液被配制为相对于在生理盐水中包含所述量的θ-防御素或θ-防御素类似物的第二水溶液而言提高θ-防御素或θ-防御素类似物的药理效力或治疗效果。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181009 US 62/743,2431.一种治疗患有慢性炎症疾病的个体的方法，包括：
提供一定量的θ-防御素或θ-防御素类似物作为第一水溶液，所述第一水溶液包含θ-防御素或θ-防御素类似物和0.5％至1.5％v/v的丙二醇，其中所述第一水溶液的pH为5.0至7.0；和
通过皮下注射向需要治疗的个体施用所述第一水溶液，
其中所述第一水溶液被配制为相对于在生理盐水中包含所述量的θ-防御素或θ-防御素类似物的第二水溶液而言提高θ-防御素或θ-防御素类似物的药理效力或治疗效果。


2.根据权利要求1所述的方法，其中所述水溶液还包含乙酸盐。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述量的θ-防御素或θ-防御素类似物的药理效力相对于在生理盐水中提供的所述量的θ-防御素或θ-防御素类似物而言，提高至少10倍。


4.权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述量的θ-防御素或θ-防御素类似物的药理效力相对于在生理盐水中提供的所述量的θ-防御素或θ-防御素类似物而言，提高至少40倍。


5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述慢性炎症疾病选自类风湿性关节炎、炎症性肠病、与癌症有关的炎症、糖尿病和以慢性炎症失调或未解决的慢性炎症为特征的慢性疾病。


6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述第一水溶液包含浓度高达50mgmL-1的θ-防御素或θ-防御素类似物。


7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述θ-防御素类似物选自环状二十肽、环状十九肽、环状十八肽、环状十七肽、环状十六肽、环状十五肽、环状十四肽、环状十三肽、环状十二肽、环状十一肽和环状十肽。


8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述第一水溶液包含1％v/v的丙二醇和20mM的乙酸盐，并且所述第一水溶液的pH为6.0。


9.一种对水性θ-防御素制剂进行灭菌的方法，包括：
在包含浓度至少为1mgmL-1的θ-防御素和0.5％至1.5％v/v的丙二醇的水性缓冲液中提供θ-防御素或θ-防御素类似物；和
使水性缓冲液通过孔径为0.2μm以下的过滤器。


10.根据权利要求9所述的方法，其中所述水性缓冲液还包含乙酸盐。


11.根据权利要求9或10所述的方法，其中所述水性θ-防御素制剂的pH为5.0至7.0。


12.根据权利要求9至11中任一项所述的方法，其中以50mgmL-1以上的浓度提供所述θ-防御素或θ-防御素类似物。


13.一种用于治疗慢性炎症疾病的药物组合物，其包含：
在包含0.5％至1.5％v/v丙二醇的水溶液中浓度高达50mgmL-1的θ-防御素或θ-防御素类似物，
其中所述药物组合物的pH为5.0至7.0，并被配制为用于肠胃外施用。


14.根据权利要求13所述的药物组合物，其还包含乙酸盐。


15.根据权利要求13或14所述的药物组合物，其中所述θ-防御素或θ-防御素类似物的浓度使得θ-防御素或θ-防御素类似物的药理效力相对于在生理盐水中提供的相似浓度的θ-防御素或θ-防御素类似物而言，提高至少10倍。


16.根据权利要求13至15中任一项所述的药物组合物，其中所述θ-防御素或θ-防御素类似物的浓度使得θ-防御素或θ-防御素类似物的药理效力相对于在生理盐水中提供的相似浓度的θ-防御素或θ-防御素类似物而言，提高至少40倍。


17.根据权利要求13至16中任一项所述的药物组合物，其中所述慢性炎症疾病选自类风湿性关节炎、炎症性肠病、与癌症有关的炎症、糖尿病和以慢性炎症失调或未解决的慢性炎症为特征的慢性疾病。


18.根据权利要求13至17中任一...

【专利技术属性】
技术研发人员：达特·特兰，贾斯汀·B·史卡尔，佩蒂·特兰，迈克尔·E·塞尔斯特德，
申请(专利权)人：达特·特兰，贾斯汀·B·史卡尔，佩蒂·特兰，迈克尔·E·塞尔斯特德，
类型：发明
国别省市：美国;US